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神経分化因子による伝達物質の合成および放出機構の発達

神经元分化因子递质合成和释放机制的发展

基本信息

批准号：
02220201
负责人：
栗原堅三
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、グリア細胞腫C6の産生する蛋白性の神経分化因子およびレチノイン酸が神経細胞におけるアセチルコリンの合成を活性化するメカニズムを調べた。これらの2つの分化因子をNG108ー15細胞およびラット胎児脳の初代培養細胞に作用させると、アセチルコリンの合成酵素であるコリンアセチルトランスフェラ-ゼ(ChAT)活性を増大させた。この際、NG108ー15細胞内に27K蛋白質が増大することを見出した。27K蛋白質が、ChAT活性の増大に関与するかどうかを明らかにするために、グリア由来の細胞分化因子およびレチノイン酸をNG108ー15細胞に作用させ、細胞質画分を分離した。つぎにこの細胞質画分を未処理のNG108ー15細胞内に導入したところ、ChAT活性の増大がみられた。神経分化因子で処理した細胞の細胞質画分をクロマトグラフィ-で分画したところ、27K蛋白質がChAT活性を増大させる有効成分であることが明らかになった。また上記の神経分化因子をNG108ー15細胞に作用させ、コリンの取り込み能を調べたところ、これらの因子はコリンの取り込み能は増大させないことがわかった。すなわち、神経分化因子による分化においては、ChAT活性の増大とコリン取り込み能の増大は別々の機構で起こることがわかった。またN18細胞は神経芽細胞腫であるが、グリア由来の分化因子やレチノイン酸により、ChAT活性の増大はみられなかった。しかしながら、この細胞を脱メチル化剤で処理するとこれらの因子により顕著なChAT活性の増大がみられた。このことは、N18細胞では、通常ではDNAがメチル化され、分化因子によるChAT活性の増大が抑制されているが、脱メチル化により分化誘導が起こることが示唆された。

This study aims to modulate the production of proteinaceous neurodifferentiation factors and their activation in the synthesis of neuroproteins in neurons. The activity of 2 differentiation factors in NG108 - 15 cells and the activity of ChAT (ChAT) in primary culture cells of fetal embryos increased. At this time, NG108 - 15 cells 27K protein increased significantly. 27K protein and ChAT activity increase in NG108 cells, cytoplasmic separation The increase of ChAT activity in NG108 - 15 cells without treatment Cell differentiation factors can increase the activity of ChAT in the cytoplasm of cells. In addition, the gene expression of NG108 - 15 can be regulated by gene expression. ChAT activity increases when the differentiation factor increases. N18 cells are derived from differentiation factors and increased ChAT activity. This is the first time that a cell has been treated with a chemical agent, and the second time that a chemical agent has been treated with a chemical agent. In contrast, N18 cells are usually inhibited by DNA fragmentation and differentiation factors, and ChAT activity is inhibited by DNA fragmentation and differentiation induction.