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ボツリヌス毒素を用いたCa流入以降のトランスミッタ-放出過程の解明

使用肉毒杆菌毒素阐明 Ca 流入后递质释放过程

基本信息

批准号：
02241201
负责人：
栗原堅三
金额：
$ 0.96万
依托单位：
Hokkaido University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1990
资助国家：
日本
起止时间：
1990 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

ウシの脳からシナプス小胞を分離し、低分子量GTP結合蛋白質の局在化を調べた。この結果、シナプス小胞には3種の低分子量GTP結合蛋白質が存在することを明らかにした。このうちの1種類のGTP結合蛋白質は、ボツリヌス毒素によりADPーリボシル化される蛋白質であった。トランスミッタ-放出過程に対するこの蛋白質の役割を種々検討したが、現在のところまだこの蛋白質の役割を解明するには至らなかった。一方、ラット胎児脳初代培養細胞をジギトニン処理して膜透過性を増大させた標品を作製した。この系では、細胞外のCa濃度を変化させると細胞内のCa濃度を容易に変えられる利点がある。この方法で細胞内Ca濃度を変化させると、ノルエピネフリン、セロトニン、GABA等のトランスミッタ-の放出が起こるが、ボツリヌス毒素によりこの放出は完全に抑制された。したがって、ボツリヌス毒素がトランスミッタ-放出過程におけるCa流入以降のどこかに働いていることは確かである。また、ボツリヌス毒素は、各種のトランスミッタ-放出に共通の機構をブロックしていることも確かである。しかしながら、ボツリヌス毒素の細胞内タ-ゲットは、依然として不明である。またラット胎児脳初代培養細胞にグリア細胞由来の神経分化因子を作用させ、アセチルコリンの合成酵素の活性化を調べた。この結果、この因子を作用させるとアセチルコリン合成酵素の顕著な活性化が起こったが、コリンの細胞内への取り込み能は変化がなかった。すなわち、神経がコリン作動性に分化する際、アセチルコリン合成酵素とコリン取り込み能は、全く独立の機構で発達することがわかった。

The isolation of low molecular weight GTP binding proteins and the regulation of their localization As a result, three low molecular weight GTP binding proteins exist in small cells. The first type of GTP binding protein is ADP. The process of protein release is discussed in detail below. A method for the preparation of standard samples for membrane permeability enhancement in primary culture cells This is a system in which extracellular Ca concentration changes easily and intracellular Ca concentration changes rapidly. This method can completely inhibit the release of intracellular Ca concentration, intracellular Ca concentration, intracellular Ca concentration and intracellular Ca concentration. Ca influx in order to reduce the concentration of toxins The common mechanism for the release of toxic substances There is still no clear picture of the intracellular toxin in the cells. The role of cell-derived neurodifferentiation factors in primary cultured fetal cells and the regulation of the activity of synthetic enzymes in fetal cells As a result of this, the activity of the enzyme in the cell can be reduced. The activity of the enzyme is differentiated, the activity of the enzyme is selected, and the activity of the enzyme is determined.