HIVーenv遺伝子発現ヒト細胞株を用いたHIV感染致死機構の研究

利用表达HIV-env基因的人类细胞系研究HIV感染的致死机制

• 批准号: 02235210
• 负责人: 古賀 泰裕
• 金额: $ 2.24万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02235210/
• 关键词: エイズ; gP160; CD4; 核移行タンパク; 細胞傷害

HIV感染による細胞傷害の機序をその重要な決定因子と考えられるHIVーenvとCD4の関係に限定して解析するためにHIVーenv遺伝子の発現をインデュ-サ-により調節できる細胞系の樹立を試みた。そしてCD4^+、CD4^ーのヒト単球細胞株、ヒトT細胞株のそれぞれにHIVーenv発現コンストラクトを遺伝子導入したクロ-ン化細胞を得た。これらのHIVーenv発現細胞株を用いた解析により、細胞内で同様にenvタンパクを発現させても細胞傷害を生じるのはCD4^+細胞株のみでCD4^ー細胞株には生じないこと、CD4^+細胞体ではenvタンパクは細胞内でCD4と複合体を形成しておりこのことが細胞傷害に直接関与していることが明らかになった。さらに免疫電顕法を用いた研究により、それらenvーCD4複合体が核膜孔周囲に蓄積していることが明らかにされ、このenvーCD4複合体による核膜孔を介した細胞内物質輸送の障害がHIVーenvによる細胞傷害の直接原因と予想された。SV40ラ-ジT抗原の核局在化シグナルであるPraーLysーLysーLysーArgーLysーValーGluをウシ血清アルブミンに結合させて作った合成タンパクは赤血球ゴ-スト法により細胞内へ注入すると核膜孔を通過して核に移行することがYonedaら(Exp.Cell Res.170:439,1987)により報告されている。HIVーenv発現ヒト細胞株の核膜孔にenvーCD4複合体の蓄積が生じた時期に、この方法を用いて核移行タンパクを細胞内へ注入しその核移行障害の有無を電顕を用いて検討した。その結果、envタンパクが発現した細胞株では他の細胞機能が保たれている非常に早期より核移行タンパクの核膜孔を介した核への輸送が阻害されていることが実証された。

The important determinants of HIV infection were determined by sequence analysis. HIV infection, env infection, CD4 infection, restriction analysis, HIV infection, env infection, cell cycle, and cell cycle. CD4 ^ +, CD4 ^

项目成果

Yasuhiro Koga: "Intracellular distribution of the envelope glycoprotein of human immunodeficiency virus and its role in the production of cytopathic effect in CD4^+ and CD4^ー human cell lines" Journal of Virology. 64. 4661-4671 (1990)

Yasuhiro Koga：“人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白的细胞内分布及其在 CD4^+ 和 CD4^ー 人类细胞系中产生细胞病变效应中的作用”病毒学杂志 64. 4661-4671 (1990)。

Yasuhiro Koga: "Cytopathic effect determined by the amount of CD4 molecules in human cell lines expressing envelope glycoprotein of human immunodeficiency virus" Journal of Immunology. 144. 94-102 (1990)

Yasuhiro Koga：“表达人类免疫缺陷病毒包膜糖蛋白的人类细胞系中 CD4 分子数量决定细胞病变效应”《免疫学杂志》。