免疫系担当細胞の発生・分化に関与するリンホカイン及びその受容体の解析

参与免疫系统细胞发育和分化的淋巴因子及其受体的分析

• 批准号: 02262230
• 负责人: 高津 聖志
• 金额: $ 7.68万
• 依托单位: Kumamoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1990
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1990 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-02262230/
• 关键词: ILー5; ILー5受容体; 長期骨髄細胞培養法; B前駆細胞; ILー5受容体cDNA

本研究の目的は,免疫系担当細胞の発生・分化におけるILー5の役割を見きわめ,ILー5受容体遺伝子を単離することによりILー5受容体の構成を明らかとし,ILー5受容体の種々の細胞における発現を検索することにある。1.まず長期骨髄細胞培養法を用いてILー5は好酸球の増殖とCD5(Ly1)陽性B前駆細胞の維持に有効であることを見い出した。また同時にこの培養によりT88ーMとY16という2つのILー5反応性の細胞株を樹立した。共に約10,000個の低親和性受容体(解離定数:K_D約5nM)と約1,000個の高親和性受容体(K_D約20pM)を有していた。2. ^<35>S標識ILー5を用いた化学架橋実験より,低親和性受容体は分子量約60,000の分子より,高親和性受容体はさらに分子量130,000の分子が結合してヘテロダイマ-を形成することにより構築されていると予想されている。(1)本実験ではこの分子量約60,000の分子を免疫沈降させる2つの抗体H7とT21と発現ベクタ-CDM8を用いてこの分子をコ-ドするCDNA,pILー5R.8を単離した。このcDNAをCOS7細胞で発現させることにより,この遺伝子が分子量約60,000の低親和性ILー5受容体をコ-ドしていることが示された。またこの遺伝子は親株以外にCD5^+の慢性B白血病細胞株BCL_1,またIgM産生ミエロ-マMOPC104Eで発現が認められ,mRNAのサイズは5.8kbおよび5.0kbの2種類であった。(2)また我々はT88ーM細胞3×10^<11>個よりH7結合ゲルを用いて分子量約60,000の分子を精製しそのN端17個のアミノ酸配列を決定した。その配列はcDNAから予想される18番目のアミノ酸残基から17個目までのアミノ酸残基に相当しており,cDNAはH7抗体の認識する分子をコ-ドすることが確認された。3.正常マウスの腹腔B細胞のほとんどがH7抗原を持っており,その70%以上がCD5陽性であった。この他骨髄および脾臓の一部の細胞にH7抗原の発現が認められる。今後造血分化におけるILー5受容体の発現調節を検討する予定である。

The purpose of this study is that the immune system plays the role of cellular differentiation, IL 5, IL 5. 1. The method of long-term bone cell culture was used to maintain CD5 (Ly1) progenitor cells by using IL (5) acid globules. At the same time, the T88MY16 cell lines were isolated from IL cells. A total of about 10000 cases of low and sexual receptivity (dissociation number: Klein D about 5nM) and about 1000 cases of high level of sexual receptivity (Klein D about 20pM) were found. 2. ^ & lt;35>S label IL 5 uses a chemical frame to determine that the molecular weight of the low and sexual capacitive is about 60000 molecular weight, and that the molecular weight of the high and the sexual capacitive is 130000. The molecular weight of the molecular weight is 130000, which is combined with the molecular weight of the molecular weight of 130000. (1) the molecular weight of this protein is about 60000. Immune sedimentation, antibody H7, T21, antibody H7, antibody T21, molecular weight, immune deposition, antibody H7, T21, antibody H7, H7, T21, CDM8 and 5R.8 were detected. The molecular weight of cDNA COS7 is about 60000 kDa, and the molecular weight of sex IL 5 acceptor is low. Other than the CD5 ^ + chronic B leukemia cell line BCL_1, the CD5 ^ + chronic B leukemia cell line BCL_1, the mRNA virus mRNA, the 5.8kb virus, the 5.0kb 2 cell line, the chronic B leukemia cell line, CD5 ^ + chronic B leukemia cell line, CD5 (2) the molecular weight of T88

项目成果

Sigeki Katoh,et al.: "Conversion of normal Lyー1ーpositive Bーlineage cells into Lyー1ーpositive macrophages in longーterm bone marrow cultures." Developmental'Immunol.(1990)

Sigeki Katoh 等人：“在长期骨髓培养中将正常 Ly-1 阳性 B 系细胞转化为 Ly-1 阳性巨噬细胞”（DevelopmentalImmunol）。

Naoto Yamaguchi,et al.: "Characterization of the murine interleukin 5 receptor by using a monoclonal antibody." Int.Immunol.2. 181-187 (1990)

Naoto Yamaguchi 等人：“使用单克隆抗体表征鼠白细胞介素 5 受体。”

Yasumichi Hitoshi,et al.: "Distribution of ILー5 receptorーpositive B cells,Expression of ILー5 receptor on Lyー1(CD5)^+ B cells." J.Immunol.144. 4218-4225 (1990)

Yasumichi Hitoshi 等人：“IL-5 受体阳性 B 细胞的分布，Ly-1(CD5)^+ B 细胞上 IL-5 受体的表达。J.Immunol.144 (1990)。

Akira Tominaga,et al.: "Transgenic mice expressing a B cell growth and differentiation factor gene(Interleukin 5) develop eosinophilia and auto antibody production." J.Exp.Med.(1991)

Akira Tominaga 等人：“表达 B 细胞生长和分化因子基因（白细胞介素 5）的转基因小鼠出现嗜酸性粒细胞增多症和自身抗体产生。”

Masahiro Migita,et al.: "Elevated expression of protoーoncogenes during interleukinー5ーinduced growth and differentiation of murine B lineage cells." Microbiol.Immunol.34. 937-952 (1990)

Masahiro Migita 等人：“白细胞介素 5 诱导的小鼠 B 谱系细胞生长和分化过程中原癌基因的表达升高。Microbiol.Immunol.34 (1990)。”