免疫担当細胞の活性化と発癌抑制の研究

免疫活性细胞活化及抑制癌变的研究

• 批准号: 06283204
• 负责人: 高津 聖志
• 金额: $ 23.04万
• 依托单位: The University of Tokyo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06283204/
• 关键词: ウィルス発癌; 免疫不全症候群; XID; JAK; STAT; IL-5; IL-5R欠損マウス; サイトカイン; マウス; レトロウイルス; 伴性免疫不全; Btk; IL-5レセプター; シグナル伝達

本研究は免疫担当細胞の発生・分化、活性化機構を明らかにし、それを攪乱する要因を明らかにするとともに、その制御法を開発し、ウイルス発癌の動物モデルを用いて個体レベルで発癌抑制を試みる。(研究方法と研究効果)(1)マウスレトロウイルス(LP-BM5 MuLV)感染による免疫不全症候群(MAIDS)の発症機構を解析する目的で、MAIDS発症が遅延する伴性免疫不全マウス(XID)の骨髄の移植によるMAIDS発症の抑制効果を調べた。ウィルス感染マウスXIDマウスの骨髄細胞を移植することでMAIDS発症を抑制できることを初めて明らかにした。(2)XIDマウスはブルトン型チロシンキナーゼ(Btk)に-アミノ酸変異がある。MAIDS発症遅延とBtkの異常の関連を明らかにするために野生型及びXID型Btkのトランスジェニックマウスを作製した。解析の結果、導入遺伝子由来のBtkが活性を有すること、野生型Btkを導入したXIDマウスではXIDマウスでは欠損しているCD5陽性B細胞が部分的に回復し、その脾臓B細胞はXIDマウスでは応答しない抗CD38抗体とIL-5の共刺激に対して有意な応答を示した。(3)IFNγ-R遺伝子欠損マウスではMAIDSの発症が遅延することを明らかにし、病態形成にIFNγが重要な役割を持つことを示した。(4)IL-5応答性株化細胞を用いて、IL-5刺激によりBtk、JAK1、JAK2キナーゼのチロシンリン酸化および活性化とJAKキナーゼの基質の一つであるSTAT5の活性化が惹起されることを明らかにした。また、これらの活性化にIL-5Rαの細胞内のプロリン残基に富む領域(Pro-Pro-X-Pro)が必須であることを初めて示した。(5)IL-5Rαの染色体遺伝子にネオマイシン耐性遺伝子とチミヂンキナーゼ遺伝子を導入したベクターを胚性幹細胞(ES)に導入し、変異ES細胞を選択した。それを用いて常法によりIL-5Rα遺伝子欠損マウスの作製に初めて成功した。IL-5Rα欠損マウスではIL-5で惹起される好酸球増多が認められず、CD5陽性B細胞の割合が有意に低いことを明らかにした。

This study aims to explore the mechanisms for the development, differentiation and activation of immune cells, and to explore the mechanisms for the development, differentiation and activation of immune cells. (Methods and Results)(1) To analyze the mechanism of development of MAIDS during LP-BM5 MuLV infection, and to modulate the inhibitory effect of MAIDS during XID bone transplantation. It's the first time I've ever seen a bone marrow transplant. (2)XID The abnormal association between MAIDS and Btk is clearly identified and controlled by wild-type and XID Btk. The results of the analysis showed that the Btk activity of the introduced Btk was partially restored after the introduction of XID, and that the CD5-positive B cells were partially restored after the introduction of XID, and that the anti-CD38 antibody and IL-5 co-stimulation were intentionally responded to. (3)IFNγ-R gene deficiency is an important factor in the development of MAIDS. (4)IL-5-responsive cells were stimulated by IL-5 to activate Btk, JAK1, JAK2 and STAT5. Pro-Pro-X-Pro is a domain rich in the intracellular residues of IL-5R α. (5) Introduction of IL-5R α chromosome gene into embryonic stem cells (ES) and selection of different ES cells. The IL-5R α gene was successfully synthesized by using the normal method. IL-5Rα deficiency is caused by increased levels of IL-5 and CD5 positive B cells.

项目成果

Li,T.et al.: "Activation of Bruton′s tyrosine kinase(Btk)by a point mutation in its pleckstrin homology(PH)domain" Immunity. 2. 451-460 (1995)

Li, T. 等人：“通过其 pleckstrin 同源 (PH) 结构域中的点突变激活布鲁顿酪氨酸激酶 (Btk)”免疫。

Takatsu,K.: "Interleukin-5(IL-5)as a B all growth and differentiation factor" John Wiley & Sons, 印刷中 (1996)

Takatsu, K.：“Interleukin-5(IL-5) 作为 B 族生长和分化因子”John Wiley & Sons，出版中 (1996)

Kouro,T.et al.: "Critical residues of cytoplasmic domain of the IL-5 receptor α chain and its function in IL-5-mediated activation of JAK kinase and STAT 5" Int.Immunol. (印刷中). (1996)

Kouro, T. 等人：“IL-5 受体 α 链胞质结构域的关键残基及其在 IL-5 介导的 JAK 激酶和 STAT 5 激活中的功能”Int.Immunol（出版中）。 ）

Makino,M.et al.: "Rapid development of murine AIDS is dependent on signals provided by CD54 and CD11a" J.Immunol. 155. 974-981 (1995)

Makino,M.等人：“小鼠艾滋病的快速发展依赖于 CD54 和 CD11a 提供的信号”J.Immunol。

Y.Kikuchi,他: "Biochemical and functional characterization of soluble form of IL-5 receptor α (SIL-5Rα):Development of ELISA system" Journal of Immunological Methods. 167. 289-298 (1994)

Y. Kikuchi 等人：“可溶形式 IL-5 受体 α (SIL-5Rα) 的生化和功能表征：ELISA 系统的开发”《免疫学方法杂志》167. 289-298 (1994)。