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網膜神経細胞におけるトランスミッタ-放出のCa依存性に関する研究

视网膜神经元递质释放Ca依赖性研究

基本信息

批准号：
03225206
负责人：
立花政夫
金额：
$ 1.02万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

キンギョ網膜からタンパク質分解酵素を使って単離したON型双極細胞を用いて、Caー伝達物質放出連関を調べた。バッチ電極によるホ-ルセルクランプ法を適用してCa電流の性質を解析したところ、高閾値型・ジヒドロピリジン感受性Ca電流のみが存在することが明かとなった。このCaチャネルがどの細胞部位に存在するかを検討するために、蛍光性Caインジケ-タであるFura‐2を使って細胞内Caイオン濃度の変化を画象解析した。Ca電流が活性化されると、細胞内Caイオン濃度は軸索終末部において急激に増加したが、細胞体では遅延性の僅かな増加しか認められなかった。脱分極パルス終了後、細胞内Caイオン濃度は軸索終末部では直ちに減り始めたが、細胞体ではしばらく増加が続いた後ゆっくりと減少した。この結果は、軸索終末部に局在するCaチャネルを介して流入したCaイオンが、軸索を通って細胞体にまで拡散したことを示唆している。軸索終末部のジヒドロピリジン感受性Ca電流が伝達物質(興奮性アミノ酸)の放出にどのように関与しているかを検討するために、双極細胞のCa電流を記録すると同時に、興奮性アミノ酸の放出を双極細胞の軸索終末部に密着させたアメリカナマズの単離水平細胞を使って電気生理学的に検出した。双極細胞を脱分極すると、双極細胞からCa電流が活性化され、数ミリ秒遅れて水平細胞から電流応答(伝達物質応答)が記録された。Ca電流と伝達物質応答は、ジヒドロピリジン系の拮抗薬で阻害されたが、オメガコノトキシンによってはなんら影響を受けなかった。また、Caイオンの流入量と興奮性アミノ酸の放出量との関係は飽和型の上に凸な増加関数となった。以上の結果から、キンギョ網膜のON型双極細胞では、ジヒドロビリジン感受性のCaチャネルが軸索終末部に局在し、その活性化によるCaイオンの流入が興奮アミノ酸の放出を制御することが明らかになった。

The enzyme activity in the membrane is regulated by the release of Ca from ON-type bipolar cells. The analysis of the properties of Ca current by using the method of "electrode sensitivity" and "high threshold sensitivity" is discussed. The change of intracellular Ca concentration was analyzed by image analysis of Ca ~(2 +) and Ca ~(2 +). Ca current is activated, intracellular Ca concentration is increased rapidly in axonal terminals, and cell body is increased in ductility. After depolarization, the intracellular Ca concentration decreases from the axonal terminal to the cellular body. The result is that the axons end in the middle of the cell body and the axons end in the middle of the cell body. The relationship between the release of excitatory acid and Ca currents in bipolar cells and the release of excitatory acid from axonal terminals is discussed. The relationship between the release of excitatory acid and Ca currents in bipolar cells is discussed. Bipolar cells are depolarized, bipolar cells are activated, and horizontal cells are recorded. Ca current reaches the material response, the opposite of the resistance, the opposite of the resistance, the opposite of the resistance. The relationship between the inflow of Ca and the emission of excitatory acid is different from that of saturation type. The above results show that the ON bipolar cells in the retina are sensitive to Ca 2 + and Ca 3 +, and the influx of Ca 2 + and the release of Ca 2 + and Ca 3 + are controlled by the activation of Ca 2 + and Ca 3 +.