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腫瘍抗原特異的T細胞抗原レセプタ-の構造解析

肿瘤抗原特异性T细胞抗原受体的结构分析

基本信息

批准号：
03258220
负责人：
山岸秀夫
金额：
$ 3.2万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1991
资助国家：
日本
起止时间：
1991 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

FBLー3腫瘍細胞特異的CTLクロ-ンとして、これまでに単クロ-ン抗体法を用いてV_<α1>^+ V_<β10>^+クロ-ンを,サザン解析法を用いてV_<α11>^+ V_<β14>^+クロ-ンをえていたが、新にTCRの鎖,β鎖に特異的な抗体を用いて、個々のMLTC細胞中の表面抗原をFACSによって解析し,新にV_<α3>^+ V_<β3>^+クロ-ンを分離した。そのTCR構造をV_<α3> J_<αc7> C_α/V_<β3> D_β J_<β2> C_<β2>と同定した。いずれも個々のMLTC細胞中では全T細胞中の数十パ-セントにまで増巾されることがある。これまでに同定されたTCR8種について,腫瘍抗原エピト-プの特異性に関与するCDR3領域の構造を比較したところ,疏水性アミノ酸で境界された非電荷型,極性アミノ酸(グリシン,アスパラギン,グルタミン,セリン)の存在が共通に認められた。CTLの認識する腫瘍抗原エピト-プを同定するために,Hー2D^bプラスミドDNAをモンキ-CVー1細胞株に感染させて,Hー2D^bをMHCとして発現する抗原呈示細胞を構成し,これにgagまたはenvの特定領域の組換え型ワクシニアウイルスを感染し,そのCTLクロ-ンの標的活性を調べた。TCR構造の同定されたCTL千株の他に未同定6株を用いて調べたところ,いずれもenvには傷害性を示さず,gag感染株にのみ特異的でほぼ140アミノ酸残基のp15領域にエピト-プが限定された。そこでp15上流のリ-ダ-部を含むペプチドYLSENMGQTVTを合成してH2ーD^b発現細胞に投与し,CTLの標的ペプチドとなるかどうかをしらべた。このペプチドは,分極化したαヘリックスとしてHー2D^bに呈示される構造としと設計されたが,意外にも細胞傷害活性は顕著でなかった。このことは,むしろ標的活性はP15の内部領域のペプチドで存在することを示している。

FBL-3 tumor cell-specific CTL antibody method was used to analyze surface antigens in MLTC cells by FACS analysis using V_<α1>^+ V_<β10>^+ V_<α11>^+ V_<β14>^+ CTL antibody method V_<α3>^+ V_<β 3>^+ V_<β3>^+ V_<α 3>^+ V_<α3>^+ V_<β 3>^+ V_<β 3>^+ V_<α3>^+ V_<β3>^+ V_<α 3>^+ V_<β 3>^+ V_<3>^+ V_<3>^ The structure of TCR is V_<α3> J_<αc7> C_α/V_<β3> D_β J_<β2> C_<β2>. In the middle of the cell, there are dozens of cells in the whole T cell. In comparison with the structure of the CDR3 domain, the hydrophobic amino acid domain has the existence of the non-charged and polar amino acids (e.g., non-charged and polar amino acids). CTL recognition of tumor antigen expression in the same way,H 2D ^b expression of DNA in the same cell line infection,H 2D ^b expression of antigen-presenting cells in the same cell line composition, this gag in the specific domain of the group of cells infected, all CTL target activity modulation. TCR structure was identified in 1,000 CTL strains, but not identified in 6 strains. The expression of virulence was detected in the middle of the virus. The p15 domain of the specific CTL residues was restricted in gag infected strains. The p15 upstream part contains a selection of YLSENMGQTVT and a selection of CTL targets. The structure and design of the cell damage activity were analyzed. However, this shows that the target activity exists as a candidate in the internal field of P15.