糖輸送担体サブタイプのキメラを用いた膜蛋白の細胞内選別輸送機構の解析
使用糖转运蛋白亚型嵌合体分析膜蛋白的细胞内选择性转运机制
基本信息
- 批准号:06248208
- 负责人:
- 金额:$ 1.22万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:1994
- 资助国家:日本
- 起止时间:1994 至 无数据
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
グルコーストランスポーター(糖輸送担体)は細胞へのグルコースの取り込みを担う膜蛋白であり、5種類のサブタイプ(GLUT1-5)が存在する。これらは膜を12回貫通し、N末端、C末端は細胞内に存在するなど、極めて類似した構造をとっているが、その発現は組織、細胞で異なるばかりでなく、一つの細胞のなかでもその局在が異なっている。CHO細胞に発現ベクターを用いて発現させるとGLUT1は細胞膜に発現されるのに対し、GLUT4は細胞内に留まることを明らかにした。さらに、GLUT1とGLUT4の間で種々のキメラ蛋白をCHO細胞に発現させてその細胞内局在を検討し、GLUT4を細胞内に留めるために重要な部位として、アミノ酸残基96-145と316-343の二つの部位を同定した。しかし、これらの研究は、本来CHO細胞にないGLUT4を発現させることによる問題、また、細胞内に存在することを見出しても、細胞膜へターゲッテイングされないデフォールトである可能性も考えられる。そこで、ふたつのアイソフォームが別の細胞膜に発現している、小腸上皮や尿細管上皮などの局性のある細胞で検討した。ヒト小腸上皮細胞もモデルと考えられるCaco-2細胞では、GLUT5はapical側、GLUT1はbasolateral側に発現することを見出し、腎尿細管由来のMDCK細胞ではGLUT1はbasolateral側、GLUT3はapical側に発現されることを見いだした。さらに、GLUT3のC末端側にapical側へのターゲテイングシグナルが存在することを明らかにした。
There are five kinds of membrane proteins (GLUTs 1-5) in the cell membrane. The membrane has 12 loops, N-terminal and C-terminal, and there are similar structures in the cells. The tissues and cells are different. The cells are different. CHO cells are developed in the presence of GLUT1 and GLUT4 in the cell membrane. In addition, GLUT1 and GLUT4 were found in CHO cells, and two important sites, residues 96-145 and 316-343, were identified. This study was conducted to examine the possibility of GLUT4 discovery in CHO cells and the presence of GLUT4 in CHO cells In addition, the cell membrane of the small intestine epithelium and the urine tubule epithelium were found in the middle of the cell membrane. Small intestinal epithelial cells are found in Caco-2 cells, GLUT5 on the apical side, GLUT1 on the basal side, MDCK cells from renal tubules on GLUT1 on the basal side, and GLUT3 on the apical side. In addition, the apical side of the GLUT3 has been identified.
项目成果
期刊论文数量(12)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
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