促通拡散ヘキソーストランスポータアイソフォームの構造・機能相関

易化扩散己糖转运蛋白亚型的结构-功能关系

• 批准号: 07276225
• 负责人: 岡 芳知
• 金额: $ 2.18万
• 依托单位: Yamaguchi University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07276225/
• 关键词: 促通拡散輸送; 糖輸送; キメラ蛋白; 細胞内ソーティング

哺乳動物促通拡散ヘキソース輸送体のアイソフォームGLUT5はフルクトース輸送体であり、この輸送能はグルコース輸送の特異的阻害剤であるサイトカラシンBでも阻止されず、サイトカラシンBのGLUT5への結合も認められなかった。グルコース輸送体であるGLUT1とGLUT5の間でさまざまなキメラ蛋白cDNAを作製しCHO細胞に発現させ、細胞での発現部位を免疫組織染色で確認すると共に、グルコースおよびフルクトースの輸送特性を検討し、グルコースおよびフルクトース輸送能に必要な部位の解明を試みた。これらの結果から、細胞内ループ部分および膜貫通ドメイン7-12がGLUT1のグルコース輸送能にきわめて重要と考えられる一方、フルクトース輸送能については、GLUT5のC末端細胞内部位をGLUT1で置き換えただけのキメラ輸送体にさえフルクトース輸送能がなく、GLUT5のフルクトース輸送能の構造要求性は他のヘキソストランスポーターに比べて厳格であることが示された。GLUT5とGLUT1については、極性のある細胞での細胞局在に違いがあり、細胞内ソーティング機構についても良いモデルとなる。すなわち、GLUT5はapical側に、GLUT1はbasolateral側に局在し、消化管腔から吸収した糖を血管内に取り込むのに関わっている。そこで、細胞内ソーテイングを決定するモチーフを解明するために、GLUT5とGLUT1の間で様々なキメラを作製し、ヒト消化管上皮細胞のモデルであるCaco-2細胞に発現させ、検討している。preliminaryな結果ではあるが、膜貫通部位6と7の間にある細胞内ループ部分がCaco-2細胞におけるGLUT1とGLUT5のソーテイングの違いを決定しているとの結果を得た。

Mammalian Facilitation of Transport Systems GLUT5 is a combination of transport systems and transport systems that are resistant to specific transport conditions. The expression of protein cDNA between GLUT1 and GLUT5 in CHO cells was confirmed by immunohistochemical staining. The expression of protein cDNA in CHO cells was confirmed by immunohistochemical staining. The transport characteristics of CHO cells were discussed. The expression of protein cDNA in CHO cells was determined by immunohistochemical staining. The results showed that the intracellular part of GLUT5 and the membrane penetration part 7-12 of GLUT1 could be used to transport GLUT5 C-terminal intracellular part of GLUT1. The structure requirements of GLUT5 are different. GLUT5 and GLUT1 are in the middle of the cell, the polarity of the cell is in the middle of the cell, and the intracellular structure is in the middle of the cell. GLUT5 is apical, GLUT1 is basal, GLUT5 is endovascular, GLUT5 is endovascular, GLUT1 is endovascular, GLUT5 is endovascular. Caco-2 cells are developed and examined in the presence of GLUT5 and GLUT1 in the presence of Caco-2 cells in the presence of GLUT5 and GLUT1. The preliminary results show that the intracellular membrane portion between membrane penetration sites 6 and 7 determines the relationship between GLUT1 and GLUT5 in Caco-2 cells.

项目成果

Ishihara H, et al.: "Human GLUT-2 overexpression does not affect glucose-stimulated insulin secretion in MIN6 cells." Am. J. Physiol.269. 897-902 (1995)

Ishihara H 等人：“人类 GLUT-2 过度表达不会影响 MIN6 细胞中葡萄糖刺激的胰岛素分泌。”

Tadokoro C, et al.: "Expresson and localization of glucose trandporter 1(GLUT1) in the rat oviduct ; a possible supplir of glucose to embryo during early embryonic development." Biochem Biophys Res Commun. 214. 1211-1218 (1995)

Tadokoro C 等人：“葡萄糖转运蛋白 1 (GLUT1) 在大鼠输卵管中的表达和定位；在早期胚胎发育过程中可能是胚胎葡萄糖的供应者。”

Ishida K,et al.: "Regulation of glucose transporter 1 (GLUT1) gene expression by epidemal growth factor in bovine comeal endothelial cells." Japanese Journal Of Ophthalmology. 39. 225-232 (1995)

Ishida K 等人：“牛角膜内皮细胞中表皮生长因子对葡萄糖转运蛋白 1 (GLUT1) 基因表达的调节。”

Katagiri, H. et al.: "A novel isoform of syntaxin-binding protein homologous to yeast Secl expressed ubiquitously in mammalian cells." J. Biol. Chem.270. 4963-4966 (1995)

Katagiri, H. 等人：“一种新的突触融合蛋白结合蛋白亚型，与在哺乳动物细胞中普遍表达的酵母 Secl 同源。”

Ishihara H, et al.: "Inhibition of pancreatic β-cell glucokinase by antisense RNA expression in transgenic mice : mouse strain-dependent alteration of glucose tolerance." FEBS Letters. 371. 329-332 (1995)

Ishihara H 等人：“转基因小鼠中反义 RNA 表达对胰腺 β 细胞葡萄糖激酶的抑制：小鼠品系依赖性的葡萄糖耐量改变。” FEBS Letters 371. 329-332 (1995)。