モデル動物を用いた神経細胞・神経軸索機能維持因子の同定

使用模型动物鉴定维持神经细胞和轴突功能的因素

• 批准号: 06272240
• 负责人: 和田 圭司
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1994
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1994 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-06272240/
• 关键词: 疾患モデルマウス; 連鎖解析; ポジショナルクローニング; 分子遺伝学; 軸索変性; 運動失調

逆行性神経軸索変性モデルマウスであるgracile axonal dystrophy(GAD)マウスを用い神経軸索の機能維持に必須の分子の単離を目的に研究を行なった。GADマウスは劣性遺伝形式を取りその責任遺伝子は第5番染色体上に存在することがこれまでの研究から知られている。しかしその遺伝子の本体については全く不明である。そこで私はポジショナルクローニング法で目的のgad遺伝子の単離に迫り軸索機能維持因子の実体を明らかにすることにした。本目的遂行のため今年度はバッククロスパネルの作成、マイクロサテライトDNAマーカーを用いた連鎖解析に基づくgad遺伝子座のファインマッピングを行なった。GADマウスとC57BL/6Jマウスを交配し、得られたF1をさらにGADマウスと交配する「戻し交配法」により462匹のprogeny(N2)を得た。市販のマイクロサテライトDNAマーカーの中から、GADマウスとC57BL/6Jマウスの間で多様性があり、かつgad遺伝子座近傍に存在すると考えられた8個を選別し、PCR法により得られてすべてのprogenyにおいて各マーカーの解析を行なった。その結果、マーカーならびにgad遺伝子はセントロメア側からD5Mit81〜D5Mit233〜D5Mit184/D5Mit254〜D5Mit256〜D5Mit197〜gad〜D5Mit113〜D5Mit7の順に並び、gad遺伝子はD5Mit197から0.4±0.3cM、D5Mit113から5.0±1.0cMの距離にあることが判明した。今後はgad遺伝子座に最も近いD5Mit197を用いて酵母人工染色体ライブラリーをスクリーニングし、得られたクローンの解析からgad遺伝子の同定を目指す予定である。

Retrograde axonal dystrophy(GAD) is used to study the molecular separation necessary for the maintenance of axonal function. GAD is a genetic variant of GAD. It is responsible for the presence of GAD on chromosome 5. The body of the child is unknown. The purpose of this study is to analyze the relationship between the function of the axons and the function of the axons. The purpose of this study is to develop a genetic linkage strategy for genetic analysis. GAD us mated with C57BL/6J us, and 462 progeny(N2) were obtained from the "us mating method" of GAD us and mating. There are 8 different DNA loci near the locus of C57BL/6J, which are identified by PCR and analyzed by GAD. The result is: D5Mit81 ~ D5Mit233 ~ D5 Mit 184/D5Mit 254 ~ D5 Mit 256 ~ D5 Mit197 ~ gad ~ D5 Mit113 ~ D5Mit7 and the distance between gad and D5Mit197 is 0.4±0.3cM and D5Mit113 is 5.0±1.0cM. In the future, the most important position of gad gene is D5 Mit197, which is used to analyze the identity of gad gene.