新しい遺伝子変異に基づく髄鞘形成異常の解析と神経伝達の機能的再生にむけた技術開発

基于新基因突变的髓鞘发育不良分析和神经传递功能再生技术开发

• 批准号: 08878144
• 负责人: 和田 圭司
• 金额: $ 1.22万
• 依托单位: National Center of Neurology and Psychiatry
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 1997
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-08878144/
• 关键词: 疾患モデルマウス; 髄鞘; 運動感覚神経ニューロパチー; 分子遺伝学; 軸索変性; 末梢神経; 遺伝性疾患

ミエリン構成分子の同定が進んでいるが神経細胞・グリアの相互作用を含め髄鞘の形成機構並びにその病態生理についてはまだ不明の点が多い。本計画では髄鞘形成、軸索機能維持にそれぞれ障害を有するTr-ncnpマウス並びにgracile axonal dystrophy(gad)マウスを使用して、1)各マウスの病態を生理学的に確立するとともに2)遺伝子異常から発病にいたる分子機序を解明し、さらに3)神経機能の発現・維持に関わる新たな分子群の同定を行ない、4)神経細胞、特に、軸索機能の再生にむけた基盤技術を開発することを目的とした。Tr-ncnpマウスについては昨年度原因として同定した末梢神経ミエリン蛋白、Pmp22、遺伝子エクソン4を含むゲノムの欠失が実に17kbに及ぶことを確認し、ゲノム切断部分の遺伝子配列を同定した。さらに、得られた遺伝子配列を利用し、野生型、ヘテロ接合体、ホモ接合体を1回の試行で判別できるゲノムPCR法を確立した。また、Pmp22蛋白特異的抗体を第3者より入手しTr-ncnpマウスにおける発現を検討し、ヘテロ接合体、ホモ接合体ではともにその発現が低下していることを見いだした。gadマウスについてはすでに連鎖解析によりD5Mit197とD5Mit151間の0.8cMの領域にGAD遺伝子が存在する可能性の高いことを見いだしていたが本年度は昨年度に引き続き前記2個のマーカー間をつなぐ酵母人工染色体(YAC)ならびに大腸菌人工染色体(BAC)contigの作製をめざした。当初完成されたと思われたYAC contig中にMbサイズの欠失があることが新たに判明したが、そのなかに目的のgad遺伝子が存在する可能性の高いことを示唆する結果を得た。

The identity of the constituent molecules is determined by the interaction between the neurons and the sheath, and the pathological physiology is determined by the unknown points. In this project, there are three aspects: 1) the physiological establishment of the pathological state of each axon; 2) the molecular mechanism of genetic abnormality; 3) the identification of new molecular groups in the development and maintenance of nervous function; 4) the identification of new molecular groups in the development and maintenance of nervous cells, special organs and organs. The development of shaft function regeneration and base plate technology Tr-ncnp is the same as the previous year because it contains 17kb of protein, Pmp22, and protein 4. It is the same as the sequence of protein in the disconnected part. The PCR method was established for the identification of wild-type, wild-type, and wild-type conjugants. The antibody specific for Pmp22 protein was detected in the third part of the study, and the antibody was detected in the third part of the study. The genetic linkage between GAD and YAC is very high in the 0.8cM domain between D5 Mit197 and D5 Mit151. The first time to complete the YAC contig, the missing Mb was found to be new, and the target gad was found to be present.

项目成果

Suh,J.G.et al.: "An in-frame deletion in peripheral myelin protein-22 gene causes hypomyelination--" Neuroscience. (印刷中).

Suh，J.G. 等人：“外周髓磷脂蛋白 22 基因的框内缺失导致髓鞘形成不足——”《神经科学》（出版中）。

Suh,J.G.et al.: "Sequence analysis,tissue expression and chromosomal localization of a mouse---" Mol.Cells. 7・2. 204-207 (1997)

Suh，J.G. 等：“小鼠的序列分析、组织表达和染色体定位——”Mol.Cells 204-207。

Suh,J.G.et al.: "An in-frame deletion in peripheral myelin protein-22 gene causes hypomyelination--" Neuroscience. 79・3. 735-744 (1997)

Suh，J.G. 等：“外周髓磷脂蛋白 22 基因的框内缺失导致髓鞘形成不足——”神经科学 79·3 (1997)。