発がん過程における遺伝子変異

(1)Brcalの染色体マッピングおよびPhIP誘発乳がんにおける役割報告されているマウスBrcalの配列にもとづいてprimerを設定し、ラット精巣cDNAライブラリーよりクローンを複数個得、PCR-SSCPによりSD,F344,ACI,BUF,DON,WKY,WF,LEW,SHR,WTCおよびZIの多型を検討した。BNとWTC間で多型が検出されたのでLinkage解析した。染色体10番Gh locusより4.6cMの部位、Aep,Ppyから0.4cM Ghよりに相当する部位にマップされた。PhIP誘発乳がん4/15例およびDMBA誘発乳がん4/15例でGhまたはPpyにLOHが誘発された。(2)Brca2の染色体マッピングとPhIP誘発乳がんにおける役割ヒトBRCA2cDNAをプローブとしてラット精巣からcDNAクローンを得た。それをプローブとしてラットゲノムクローンを得、ACI,BN,BUF,COP,F344,SD,WKYおよびWTC系統間の多型を検討した。ACI-BUF間で多型が検出されたので連鎖解析し、染色体12番にマップした。ヒトBRCA2は13q12-13でRB1は13q13にマップされているがラットではRb1遺伝子は染色体15番で、Rbとは分離された。(3)PP2A B制御サブユニットαの乳発がんにおける役割PP2A B制御サブユニットαのラットcDNAクローンを用いて3'の非翻訳領域のPCR-SSCP解析を行いACI-BUF間に多型を見い出し、染色体12番Rb1から1cMはなれた部位にマップした。SD-F344間で多型を検出し、16例のPhIP誘発SD x F344 F1乳がんおよび5例のDMBA誘発乳がんのLOH解析を行ったが、検出されなかった。(4)結論ラット乳発がんにおけるBrcalの関与が示唆されたが、Brcalの両アレルに変異があるかは、今後解決すべき問題である。Brca2に関してはエキソン11のコードされるアミノ酸の系統間における多型は、系統間の乳発がん感受性の差を説明できるものではない。今後SD-F344間の多型を検出し、Brca2遺伝子の関与を解明する。セリン/スレオニンホスファターゼの発がんにおける役割解明を目的とし、種々の分子種について今後検討する。

(1)Brcalの染色体マッピングおよびPhIP誘発乳がんにおける役割報告されているマウスBrcalの配列にもとづいてprimerを設定し、ラット精巣cDNAライブラリーよりクローンを複数個得、PCR-SSCPによりSD,F344,ACI,BUF,DON,WKY,WF,LEW,SHR,WTCおよびZIの多型を検討した。BNとWTC間で多型が検出されたのでLinkage解析した。染色体10番Gh locusより4.6cMの部位、Aep,Ppyから0.4cM Ghよりに相当する部位にマップされた。PhIP誘発乳がん4/15例およびDMBA誘発乳がん4/15例でGhまたはPpyにLOHが誘発された。(2)Brca2の染色体マッピングとPhIP誘発乳がんにおける役割ヒトBRCA2cDNAをプローブとしてラット精巣からcDNAクローンを得た。それをプローブとしてラットゲノムクローンを得、ACI,BN,BUF,COP,F344,SD,WKYおよびWTC系統間の多型を検討した。ACI-BUF間で多型が検出されたので連鎖解析し、染色体12番にマップした。ヒトBRCA2は13q12-13でRB1は13q13にマップされているがラットではRb1遺伝子は染色体15番で、Rbとは分離された。(3)PP2A B制御サブユニットαの乳発がんにおける役割PP2A B制御サブユニットαのラットcDNAクローンを用いて3'の非翻訳領域のPCR-SSCP解析を行いACI-BUF間に多型を見い出し、染色体12番Rb1から1cMはなれた部位にマップした。SD-F344間で多型を検出し、16例のPhIP誘発SD x F344 F1乳がんおよび5例のDMBA誘発乳がんのLOH解析を行ったが、検出されなかった。(4)結論ラット乳発がんにおけるBrcalの関与が示唆されたが、Brcalの両アレルに変異があるかは、今後解決すべき問題である。Brca2に関してはエキソン11のコードされるアミノ酸の系統間における多型は、系統間の乳発がん感受性の差を説明できるものではない。今後SD-F344間の多型を検出し、Brca2遺伝子の関与を解明する。セリン/スレオニンホスファターゼの発がんにおける役割解明を目的とし、種々の分子種について今後検討する。