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T細胞亜集団による免疫制御の分子機構

T细胞亚群免疫调节的分子机制

基本信息

批准号：
07257206
负责人：
成内秀雄
金额：
$ 2.56万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07257206/
关键词：
IL-12産生 CD40-CD40L Th1 Th2 IL-10 B7分子

项目摘要

Tヘルパー細胞(Th)の亜集団Th1、Th2のバランスを決める重要な因子と考えられるIL-12の産生と、Th1細胞に対する作用機序、特に抗原提示細胞上にあるB7分子との共同作用にいて研究した。IL-12は抗原提示細胞とTh1細胞とを抗原存在下に培養したときに産生されることは以前の我々の実験から分かっている。この培養系に抗CD40Lを存在させたところ、IL-12の産生とIL-12p40mRNA発現が抑制された。IL-12産生とIL-12p40mRNA発現はCD40Lノックアウトマウス由来Th1細胞を用いた場合には見られず、CD40L分子を発現した昆虫細胞膜分画で刺激した抗原提示細胞には見られ、且つ、この反応は抗CD40Lで阻害されることから、活性化T細胞上に発現されるCD40Lと抗原提示細胞上のCD40の反応によって抗原提示細胞からIL-12が産生されることが分かった。抗IL-12を用いた細胞内染色法と細胞表面蛍光抗体法との組み合わせによって、実際にIL-12p40を発現しIL-12を産生している細胞はMac-1^+大食細胞が主であることも明らかになった。T細胞としてTh2を用いると、活性化によってTh2もCD40Lを発現するにも拘わらず、IL-12の産生は起こらないことも分かった。Th2を用いた時に見られるこの現象はTh2が活性化によって産生するIL-10によってIL-12p40mRNA発現の抑制が起こることが原因であることが分かった。IL-12の産生機序をさらに研究するために、IL-12p40,p35の遺伝子構造を明らかにし、p40の5'上流領域のDNA構造を決めた。さらに、クロムフェニコールアセチールトランスフェラーゼアッセイを行い、5'上流領域の内、NF-kB結合が最も重要で、上述のCD40-CD40L反応においても、LPS刺激によるIL-12産生においてもNF-kBが核内因子として働いていることが分かった。さらに、細胞表面分子でT細胞活性化に重要な副刺激を送るB7分子とIL-12の関係を研究した結果、B7分子とIL-12とはTh1細胞、および、脾由来T細胞の活性化において相乗作用を示す副刺激分子であることが明らかになった。

The important factors for the regulation of Th1 and Th2 in T cells (Th) were studied. The production of IL-12, the mechanism of Th1 cells, and the interaction of B7 molecules on T cells were studied. IL-12 antigen prompt cells and Th1 cells are cultured in the presence of antigen. These cultures were resistant to CD40L, IL-12 production, and IL-12p40 mRNA expression. IL-12 production, IL-12p40mRNA expression, CD40L expression, Th1 cell activation, CD40L molecule expression, insect cell membrane stimulation, antigen signaling, cell activation, CD40L inhibition, CD40L inhibition CD40L is expressed on activated T cells and CD40 is expressed on antigen-indicating cells. IL-12 is expressed on antigen-indicating cells. Anti-IL-12 was detected by intracellular staining and cell surface photoantibody assay, and IL-12p40 was detected in Mac-1 cells. T cells are activated by Th2 and CD40L, and IL-12 is produced. Th2 is activated, IL-10 is produced, IL-12p40 mRNA expression is inhibited, and the reasons for this phenomenon are as follows: IL-12 gene production mechanism is studied, IL-12p40,p35 gene structure is studied, p40 and 5'upstream DNA structure is determined. In addition, NF-kB binding is most important in the 5'upstream region, and NF-kB binding is most important in the above CD40-CD40L reaction, LPS stimulation, IL-12 production, and nuclear factor. In addition, cell surface molecules play an important role in the activation of T cells, and IL-12 plays an important role in the activation of T cells.