転写因子の活性を制御するシグナル伝達機構

控制转录因子活性的信号转导机制

基本信息

批准号：
07258206
负责人：
入江賢児
金额：
$ 0.9万
依托单位：
Nagoya University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1995
资助国家：
日本
起止时间：
1995 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07258206/
关键词：
MAPキナーゼ転写因子 TGF-β

项目摘要

酵母をモデル系としたMAPキナーゼカスケードの解析から、以下のような成果を得た。酵母のMAPキナーゼであるMpk1のシグナル伝達系は細胞壁合成など細胞の形態形成に機能している。Mpk1の下流で機能する遺伝子RLM1を分離した。RLM1遺伝子はserum response factorと高い相同性を示すタンパク質をコードしており、Rlm1はMpk1の下流で機能する転写因子であると考えられる。今後はMpk1キナーゼによるRlm1の活性化機構およびRlm1によって転写が制御される遺伝子の同定が重要である。Two-hybrid法によりMpk1とRlm1の相互作用が検出できるから、Rlm1がMpk1により直接リン酸化され、その転写活性化能が制御されるというモデルを現在検証している。また、酵母のMAPKKの活性型変異を用いて、動物細胞のMAPKKKであるRaf-1が酵母のMAPキナーゼカスケードを活性化する系を構築した。この系においては動物細胞においてMAPKKKとして機能することが知られているMEKKやc-Mosも、酵母のMAPキナーゼカスケードを活性化する。そこでこの系を用いて、マウス血球系細胞株BAF-BO3由来のcDNAライブラリーから、新奇のMAPKKKであるTAK1を分離した。動物細胞においてTAK1の活性化型を多量発現するとTGF-β刺激に応答したPAI-1(Plasminogen activatorinhibitor type1)遺伝子の発現を促進することが明かとなった。このことから、TAK1はTGF-βファミリーの下流でMAPKKKとして作用している可能性が考えられる。

从MAP激酶级联反应的分析中获得以下结果，该分析以酵母为模型。 MPK1的信号传导系统（一种酵母MAP激酶）在细胞形态发生中起作用，包括细胞壁合成。分离了MPK1下游的基因RLM1。 RLM1基因编码一种具有血清反应因子高的同源性的蛋白质，RLM1被认为是MPK1下游功能的转录因子。从MPK1激酶开始从RLM1激活的机理，并确定转录受RLM1调节的基因。由于可以通过两种杂交方法检测MPK1和RLM1之间的相互作用，因此我们目前正在验证一个模型，其中RLM1直接被MPK1磷酸化，并调节其转录激活能力。此外，使用酵母MAPKK的活动突变，我们构建了一个系统，其中RAF-1（动物细胞中的MAPKKK）激活了酵母的MAP激酶级联反应。在该系统中，MEKK和C-MOS（被称为动物细胞中的MAPKKK）也激活了酵母的MAP激酶级联反应。因此，使用此系统，从源自小鼠血细胞系BAF-BO3的cDNA库中分离出一种新型的mapkkk。已经揭示了动物细胞中表达大量活化形式的TAK1的大量激活形式促进了对TGF-β刺激的PAI-1（纤溶酶原激活剂1型）基因的表达。这表明TAK1可以充当TGF-β家族下游的MAPKKK。