Regulation of mRNA polyA tail length in response to nutrient signaling and its physiological role

mRNA PolyA 尾长响应营养信号的调节及其生理作用

• 批准号: 22K06074
• 负责人: 入江 賢児
• 金额: $ 2.66万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• 财政年份: 2022
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2022-04-01 至 2025-03-31
• 项目状态: 未结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-22K06074/
• 关键词: 酵母; mRNA; Ccr4; Ccr4-Not複合体; Puf5; 細胞周期; サイクリンB; ポリA鎖; Ccr4-Not; 翻訳

本研究計画では、出芽酵母を用いて、栄養リッチなシグナルおよび栄養飢餓のシグナルによる酵母の増殖制御をRNAレベルで調節する系を用いて解析する。Ccr4-Not複合体は、細胞質における主要なデデニラーゼであり、mRNAの分解に機能している。CLB1-6遺伝子は、サイクリン依存性キナーゼCdc28と共に細胞周期進行に関与するB型サイクリンをコードする。Ccr4によるCLB1-6の発現制御について検討した。その結果、ccr4Δ変異体では、すべてのCLB1-6 mRNAレベルが野生型細胞のそれと比較して有意に増加した。CLB6 mRNA内のCcr4を介した制御のためのシスエレメントをさらに分析した結果、コード配列と3'非翻訳領域（3'UTR）の両方に不安定化する配列が存在することがわかった。CLB6の3'UTRはmRNAの不安定化とレポーターGFP遺伝子の減少に十分であり、この不安定化にはCcr4が関与していた。これらの結果から、CLB6の発現が、CLB6 mRNAのコード配列と3'UTRを介してCcr4により制御されていることが示唆された。また、Puf ファミリー RNA 結合タンパク質Puf5について解析した。puf5Δ clb2Δ二重変異体は増殖低下を示したことから、Puf5が細胞周期進行においてClb2と重複する因子の発現を正に制御していることが示唆された。puf5Δ変異体では、CLB1の発現が低下しており、このCLB1の発現低下がpuf5Δ clb2Δ二重変異体の成長障害に寄与していることがわかった。これらの結果から、Puf5が細胞周期特異的なCLB1の発現制御を通じて細胞周期の進行に寄与していることが示唆された。

This study aims to analyze the regulatory mechanism of RNA in yeast growth regulation by budding yeast, culture and starvation. The Ccr4-Not complex is a cytoplasmic complex that functions as an important component of mRNA decomposition. CLB1 -6 gene is related to cell cycle progression and cell cycle dependency. Ccr4 CLB1-6 As a result, ccr4 Δ mRNA expression in wild-type cells was intentionally increased compared with wild-type cells. Ccr4 in CLB6 mRNA is regulated by the expression of Ccr4 in the 3'UTR. CLB6 mRNA 3'UTR instability and GFP gene reduction are very important, and this instability is related to Ccr4. The results were as follows: CLB6 mRNA expression, CLB6 mRNA mRNA 3'UTR expression, and CLB6 mRNA 3'UTR expression. Puf5 analysis of RNA binding puf5 Δ clb2 Δ double heterozygote growth inhibition puf5Δ clb 2Δ double variant growth barrier, CLB1 development is low, CLB1 development is low, puf5Δ clb2Δ double variant growth barrier is low, CLB 1 development is low. The results showed that Puf5 was a cell cycle-specific inhibitor of CLB1 expression, and that the expression of CLB1 was related to the progression of cell cycle.