DNA複製酵素遺伝子の発現制御を担う共通の転写因子DREF

DREF，一种控制 DNA 复制酶基因表达的常见转录因子

• 批准号: 07258228
• 负责人: 廣瀬 富美子
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: Aichi Cancer Center Research Institute
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07258228/
• 关键词: DNA複製; DNAポリメラーゼα; PCNA; 転写因子; DRE; DREF; ショウジョウバエ

本年度は、DREF遺伝子の発現調節部位の解析、DREFと相互作用する転写因子の検索に着手し、さらに、DREFの突然変異体の作成の準備を始め、以下の成果を得た。(1)DREF遺伝子のプロモーターには、4つのDRE配列が存在し、自己調節していることを証明したが、それらDRE配列の他にDREF遺伝子の発現に必須な正の制御配列を見い出した。(2)PCNA遺伝子のプロモーターに様々な変異を入れ、連結したlacZ遺伝子を個体に導入し作成したトランスジェニックフライ百数十系統を用いてDRE/DREFの発生過程における役割を個体のレベルで解析し、その結果、DRE/DREFは、生殖細胞を除く全発生過程で必須であることが明らかとなったが、同時に、幼虫期の発現にはURE(upstream regulatory element)が、生殖細胞においてはE2F結合配列がそれぞれ必要であることも見い出した。また、これらの転写調節因子間の相互作用あるいは組み合わせによって、精緻にPCNA遺伝子を発現制御している可能性を示唆する結果も得た。(3)DREF遺伝子がbigbrain(bib)遺伝子の上流約10kbに位置することを見い出し、すでに、bibのP element insertional mutantを入手した。transposonが、100kb以内に高頻度に飛ぶ(local transposition)ことを利用して、DREF遺伝子の突然変異体を単離するための、遺伝学的、分子生物学的な準備を整えた。(4)zerknullt遺伝子産物は、DREF遺伝子のプロモーターを負に制御することを明らかにしているが、この負の制御には、-70〜+254内の配列が関与していることが解ったので、現在、具体的なzerknultの標的配列をしぼり込んでいる。

This year は, DREF but 伝 の 発 now adjust parts の parsing, DREF と interaction す る planning write factor の 検 cable に し, さ ら に, DREF の suddenly - variant の made の prepare を め, the following の results を た. (1) DREF posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ ー に は, 4 つ の DRE with column が し, oneself adjust し て い る こ と を prove し た が, そ れ ら DRE with column の he に DREF heritage 伝 son の 発 に must now な is の suppression with column を see い out し た. (2) PCNA posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ ー に others 々 な variations in different を れ and link し た lacZ posthumous son 伝 を individual に import し made し た ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ラ イ hundreds of dozens of systems を い て DRE/DREF の 発 birth process に お け る "を cut individual の レ ベ ル で analytical し, そ の results, DRE/DREF は, reproductive cells を except く で 発 birth process must all で あ る こ と が Ming ら か と な っ た が, at the same time に, larval stage の 発 now に は URE (upstream regulatory element) が, reproductive cells に お い て は E2F combined with column が そ れ ぞ れ necessary で あ る こ と も see い out し た. ま た, こ れ ら の planning write の interaction between regulatory factor あ る い は group み close わ せ に よ っ て, delicate に PCNA posthumous son 伝 を 発 now suppression し て い を る possibility in stopping す た も る results. (3) DREF posthumous son 伝 が bigbrain (bib) posthumous son 伝 の high position about 10 KB に す る こ と を see い し, す で に, bib の P element insertional mutant を of し た. Transposon が, within 100 KB に fly high frequency に ぶ (local transposition) こ と を using し て sudden variations, DREF but 伝 の variants を 単 from す る た め の, but 伝 study, molecular biology of な prepare を whole え た. (4) zerknullt heritage 伝 zi chan は, DREF posthumous son 伝 の プ ロ モ ー タ ー を negative に suppression す る こ と を Ming ら か に し て い る が, こ の negative の suppression に は, - 70 ~ + 254 の match column が masato and し て い る こ と が solution っ た の で, now, the specific な zerknult の mark with column を し ぼ り 込 ん で い る.

项目成果

Matsukage A.: "The DRE sequence TATCGATA. a putative promoter-activating element for Drosophila melanogaster cell proliferation-related genes." Gene. 166. 233-236 (1995)

Matsukage A.：“DRE 序列 TATCGATA。果蝇细胞增殖相关基因的推定启动子激活元件。”

Yamaguchi M.: "Roles of multiple promoter elements of the proliterating cell nuclear artigen gene during Drosophila development" Genes to Cell. (in press).

Yamaguchi M.：“果蝇发育过程中增殖细胞核抗原基因的多个启动子元件的作用”基因到细胞。

Hirose F.: "Repression of requlatory factor for Drosophila DNA replication-related gene promoters by zerknullt homeodomain protein" J. Biol. Chem.269. 2937-2942 (1994)

Hirose F.：“zerknullt 同源域蛋白对果蝇 DNA 复制相关基因启动子的调节因子的抑制” J. Biol。

Yamaguchi, M.: "A nucleotide sequence essential for the function of DRE, a common promoter element for Drosophila DNA replication-related genes." J. Biol. Chem.270. 15808-15814 (1995)

Yamaguchi, M.：“DRE 功能所必需的核苷酸序列，DRE 是果蝇 DNA 复制相关基因的常见启动子元件。”

Hirose F.: "Isolation and characterization of cDNA for DREF, a promoter-activating factor for Drosophila DNA replication-related genes." J. Biol. Chem.(in press).

Hirose F.：“DREF cDNA 的分离和表征，DREF 是果蝇 DNA 复制相关基因的启动子激活因子。”