ツメガエル神経形成期に発現するレチノイン酸、アクチビン応答遺伝子の分離と解析

ヘッジホッグ(hh)はショウジョウバエのセグメントポラリティー遺伝子としてみいだされ、その後脊椎動物のホモローグであるSonic hedgehog(以下Shh)がマウス、ニワトリ、ゼブラフィッシュなどで分離された。マウスではShhのほかにDhhとIhhが分離されている。マウス発生過程ではShhはWhole mount In Siteによる解析で背索、Floor plateのほか肢芽ZPAに発現が観察され、運動神経系の分化、肢芽前後軸形成に関与していることがすでに明らかにされている。われわれは昨年、アフリカツメガエルXhhを分離し、アクチビンによる背索形成の過程でShhの発現が増大することを報告した。このようにShhは発現過程でさまざまな因子によりその発現が強調されていることが推察される。ラット発達過程のShhおよびDhhの発現をWhole mount In Siteで詳細に検討したところ、Dhhは心臓に一方、Shhは肺、消化管を含む上皮細胞に発現することをみいだした。さらに、肺上皮をマトリゲルに包埋し、aFGFにより肺分枝形成をおこさせ、その過程でのShhの発現を調べるとShhは分枝をおこす点で強く発現していることが明らかとなった。また、P19EC細胞がレチノイン酸により神経細胞へと分化する過程でShhの発現が観察されることから,Shh遺伝子を分離、5'上流4kbの塩基配列を解析した。その結果4kb以内にはレチノイン酸応答配列はみいだされなかった。

ヘッジホッグ(hh)はショウジョウバエのセグメントポラリティー遺伝子としてみいだされ、その後脊椎動物のホモローグであるSonic hedgehog(以下Shh)がマウス、ニワトリ、ゼブラフィッシュなどで分離された。マウスではShhのほかにDhhとIhhが分離されている。マウス発生過程ではShhはWhole mount In Siteによる解析で背索、Floor plateのほか肢芽ZPAに発現が観察され、運動神経系の分化、肢芽前後軸形成に関与していることがすでに明らかにされている。われわれは昨年、アフリカツメガエルXhhを分離し、アクチビンによる背索形成の過程でShhの発現が増大することを報告した。このようにShhは発現過程でさまざまな因子によりその発現が強調されていることが推察される。ラット発達過程のShhおよびDhhの発現をWhole mount In Siteで詳細に検討したところ、Dhhは心臓に一方、Shhは肺、消化管を含む上皮細胞に発現することをみいだした。さらに、肺上皮をマトリゲルに包埋し、aFGFにより肺分枝形成をおこさせ、その過程でのShhの発現を調べるとShhは分枝をおこす点で強く発現していることが明らかとなった。また、P19EC細胞がレチノイン酸により神経細胞へと分化する過程でShhの発現が観察されることから,Shh遺伝子を分離、5'上流4kbの塩基配列を解析した。その結果4kb以内にはレチノイン酸応答配列はみいだされなかった。