がん細胞分化機構の分子生物学的解明と分化誘導療法の臨床応用に関する基礎的研究

癌细胞分化机制的分子生物学基础研究及分化诱导治疗的临床应用

• 批准号: 07274107
• 负责人: 大野 竜三
• 金额: $ 12.8万
• 依托单位: Hamamatsu University School of Medicine
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07274107/
• 关键词: レチノイン酸; 分化誘導療法; 急性前骨髄球性白血病; Am-80; 細胞内レチノイン酸結合蛋白; ユビキチン・プロテアゾーム; トランスジェニック・マウス; レチノイドアンタゴニスト

レチノイン酸(ATRA)による分化誘導療法は急性前骨髄球性白血病(APL)のスタンダード治療となったが、ATRA治療の再発例には20%以下の再寛解率しか示さない。班員が創製した新レチノイドAm-80は細胞内レチノイン酸結合蛋白と親和性のないことより、これが耐性化の原因となっているATRA不応例には有効性が期待できる。そこでAm-80をATRA後再発APL12例に使用した所6例に完全寛解を得た。ATRA後再発症例から得たAPL細胞の抗PML抗体染色パターンによるin vitroの検討でも、ATRAでは分化しないがAm-80では分化する症例があり、臨床効果とも相関し、ATRA不応例に有効であることが判明した。APL細胞株NB4にATRAを添加すると、APLの原因であるPML-RARA蛋白は6時間以降に減少し、12時間以降にPMLの細胞内局在の正常化を認めるがATRA耐性株では認めない。PML-RARA蛋白の減少はPML-RARA遺伝子転写抑制によるものではなく、ユビキチン・プロテアゾーム阻害剤により阻害された。PML-RARA蛋白のPML蛋白に対するドミナントネガティブ変異性がATRAにより解除される理由として、ATRAと結合したPML-RARA蛋白はユビキチン・プロテアゾーム系による分解を受けやすくなり、PML蛋白/PML-RARA蛋白比率が減少することが考えられた。甲状腺ホルモン不応症に同定されたドミナント・ネガティブな作用を示すアミノ酸変異をRARに導入し、変異RARの正常RARの作用を抑制効果を確認後、トランスジェニック・マウスを作成し、哺乳動物の正常な固体発生にRAの作用が不可欠であることを示した。また、分子設計により強力なレチノイドアンタゴニストならびにRAR-β選択的アンタゴニストならびにレチノイドシナ-ジストの創製に成功した。後者の開発はレチノイドの投与量を大幅に低減し得ることを示唆した。また、多くの胃癌細胞においてレチノイン酸受容体が発現され、レチノイドによる増殖抑制と分化誘導の可能性が示唆された。

レ チ ノ イ ン acid (ATRA) に よ は る induction differentiation therapy of acute leukemia (APL) bone marrow and the ball before sex の ス タ ン ダ ー ド treatment と な っ た が, ATRA treatment の again 発 に は rate below 20% の again understanding solution し か shown さ な い. Audit が created し た new レ チ ノ イ ド Am - 80 は intracellular レ チ ノ イ ン acid binding protein と affinity の な い こ と よ り, こ れ が patience the の reason と な っ て い る ATRA 応 cases not に は have sharper sex が expect で き る. Youdaoplaceholder0 に でAm-80をATRA followed by an apL of 12 cases に using に た of 6 cases に complete remission を obtained た. Cases after ATRA 発 か ら have た APL cells の PML antibody staining resistance パ タ ー ン に よ る in vitro の beg で 検 も, ATRA で は differentiation し な い が Am - 80 で す は differentiation cases る が あ り, clinical services fruit と も phase masato し, ATRA not 応 に have sharper で あ る こ と が.at し た. APL cell line NB4 に ATRA を add す る と, APL の で あ る PML (RARA protein は 6 time to drop に し, 12 time onwards に PML の cells inside bureau in normalizing の を recognize め る が ATRA patience strains で は recognize め な い. PML (RARA protein の reduce は PML (RARA heritage 伝 son planning write inhibit に よ る も の で は な く, ユ ビ キ チ ン · プ ロ テ ア ゾ ー ム resistance against tonic に よ り resistance against さ れ た. PML (RARA protein の PML protein に す seaborne る ド ミ ナ ン ト ネ ガ テ ィ ブ - heterosexual が ATRA に よ り remove さ れ る reason と し て, as well as the combination of ATRA と し た PML (RARA protein は ユ ビ キ チ ン · プ ロ テ ア ゾ ー ム department に よ を る decomposition by け や す く な り, PML protein/PML (RARA が protein ratio decreases Do not use する する とが to test えられた. Thyroid ホ ル モ ン not に 応 disease with さ れ た ド ミ ナ ン ト · ネ ガ テ ィ ブ を な role す ア ミ ノ acid - different を RAR に import し, - different RAR の normal RAR の を restrain unseen fruit を confirmed, ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク · マ ウ ス を make し, born mammal の normal な solid 発 に RA の role が not owe で あ る こ と を し Youdaoplaceholder0. ま た, molecular design に よ り powerful な レ チ ノ イ ド ア ン タ ゴ ニ ス ト な ら び に RAR - beta sentaku ア ン タ ゴ ニ ス ト な ら び に レ チ ノ イ ド シ ナ - ジ ス ト の created に successful し た. The latter <s:1> developed ド レチノ ド ド <s:1> investment volume を a significant に reduction <s:1> る とを とを とを とを suggesting た. ま た, multiple く の gastric cancer cells に お い て レ チ ノ イ ン acid by let body が 発 now さ れ, レ チ ノ イ ド に よ る raised colonization inhibit と induction が の possibility in stopping さ れ た.

项目成果

Fukutani,H., Ohno,R.et al.: "Prognostic significance of the RT-PCR assayof PML-RARA transcripts in acute promyelocytic leukemia." Leukemia. 9. 588-593 (1995)

Fukutani,H.、Ohno,R.等人：“急性早幼粒细胞白血病中 PML-RARA 转录物的 RT-PCR 测定的预后意义。”

Kanamaru,A., Ohno,R.et al.: "All-trans retinoic acid for the treatment of newly diagnosed acute promyelocytic leukemia." Blood. 85. 1202-1206 (1995)

Kanamaru,A.、Ohno,R.等人：“全反式视黄酸用于治疗新诊断的急性早幼粒细胞白血病。”

Takeshita,T., Ohno,R.et al.: "Significant reduction of medical costs by differentiation therapy with alltrans retinoic acid during remission induction of newly diagnosed patients with acute promyelocytic leukemia." Cancer. 76. 602-608 (1995)

Takeshita,T., Ohno,R.等人：“在新诊断的急性早幼粒细胞白血病患者的缓解诱导期间，采用全反式视黄酸的分化治疗可显着降低医疗成本。”

Yoshida,H., Ohno,R.et al.: "Analysis of the joining sequences of the t(15; 17)translocation in human acute promyelocytic leukemia: Sequencenon-specific recombination between the PML and RARA genes within identical short stretches." Genes Chrom Cancer. 12.

Yoshida,H.、Ohno,R.等人：“人类急性早幼粒细胞白血病 t(15; 17) 易位连接序列的分析：相同短片段内 PML 和 RARA 基因之间的序列特异性重组。”

Naoe,T., Ohno,R.et al.: "Delayed or insufficient restoration of PML and PML-RARA subcelloular localization after exposure in vitro to retinoic acids in all-trans retinoic acidresistant APL cell." Leukemia. 9. 610-611 (1995)

Naoe,T.、Ohno,R.等人：“全反式视黄酸抗性 APL 细胞体外暴露于视黄酸后，PML 和 PML-RARA 亚细胞定位恢复延迟或不足。”