コリン作動性神経分化に伴う遺伝子発現制御機構の解明

阐明与胆碱能神经元分化相关的基因表达控制机制

• 批准号: 08271244
• 负责人: 三澤 日出巳
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08271244/
• 关键词: アセチルコリン; コリンアセチル転移酵素; アセチルコリントランスポーター; コリン作動性ニューロン; cDNA; 神経損傷; シナプス小胞

コリン作動性神経の伝達物質アセチルコリンはコリンアセチル転移酵素(choline acetyltransferase;ChAT)により合成され、シナプス小胞アセチルコリントランスポーター(vesicular acetylcholine transporter;VAChT)によりシナプス小胞に輸送される。驚くべきことに、最近クローニングされたVAChT cDNAはChAT遺伝子の第一イントロンに全長がコードされていた。この二つのタンパク質の発現がどのように制御されているかを解析するため以下の実験を行った。1、ChATとVAChTのラット脳内分布ChATおよびVAChTの陽性細胞の分布は、解析した殆どの部位で完全に一致した。抗体による染色性の相違点としては、ChAT抗体は細胞体と軸索を強く染色するのに対して、VAcT抗体は細胞体の染色性は弱く、むしろ終末様構造を強く染めうることがあげられる。従来、コリン作動性ニューロンの終末部を特異的に認識する抗体は知られておらず、我々の作製したVAcTに対する抗体は注目に値する。2、運動ニューロンの軸索切断後の発現変動ChATとVAChTの発現の変動をin-vivoで解析するため、片側の舌下神経の軸索を切断し、その後の舌下神経核での二つのタンパク質の発現を解析した。切断側でのChATとVAChTのmRNAの発現は切断後一週間でほぼ完全に消失し、その後次第に回復した。一方、タンパク質の発現は、ChATの発現は切断後一週間でほぼ完全に消失するが、VAChTの発現は全く変化せず、むしろ切断側に強い免疫反応が認められた。現在、なぜChATとVAChTで軸索切断に対する反応性が異なるのか、その機序について解析を行っている。

The active neurotransmitter is a synthetic, vesicular acetylcholine transporter (VAChT), a choline acetyltransferase (ChAT), and a vesicular acetylcholine transporter (ChAT). VAChT cDNA is the first cDNA fragment of the ChAT gene. This is the first time I've ever seen a person who's been in a relationship with someone who's been in a relationship with someone else. 1. The distribution of ChAT and VAChT positive cells in the brain is completely consistent. Antibodies stain strongly against axons, while VAcT antibodies stain weakly against terminal structures. The activity of the antibody is very important. 2. The occurrence of ChAT and VAChT after axonectomy of the motor nerve is analyzed in-vivo. The occurrence of ChAT and VAChT after axonectomy of the sublingual nerve is analyzed in-vivo. The mRNA expression of ChAT and VAChT on the cut side disappeared completely within a week after the cut, and then recovered. In one case, the occurrence of ChAT is completely different from that of VAChT, and the occurrence of ChAT is completely different from that of VAChT, and the occurrence of ChAT is completely different from that of VAChT. Now, ChAT and VAChT are different from each other in terms of shaft disconnection, and the analysis of the mechanism is performed.

项目成果

MISAWA,Hidemi: "Human choline acetyltransferase mRNA with different 5′-region produce a 69-kDa major translation product" Mol.Brain Res.44. 323-333 (1997)

MISAWA，Hidemi：“具有不同 5 区域的人胆碱乙酰转移酶 mRNA 产生 69-kDa 主要翻译产物”Mol.Brain Res.44 (1997)。

ICHIKAWA,Tomoyuki: "Localization of two cholinergic markers,choline acetyltransferase and vesicular acetvlcholine transporter in the central nervous system of the rat" J.Chem.Neuroanat.(発表予定). (1997)

ICHIKAWA，Tomoyuki：“大鼠中枢神经系统中两种胆碱能标记物、胆碱乙酰转移酶和囊泡乙酰胆碱转运蛋白的定位”J.Chem.Neuroanat（即将发表）。