ヒトのコリンアセチル転移酵素の構造と病態に関する研究

人胆碱乙酰转移酶的结构与病理学研究

• 批准号: 07780711
• 负责人: 三澤 日出巳
• 金额: $ 0.64万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-07780711/
• 关键词: アセチルコリン; コリンアセチル転移酵素; 神経変性疾患; コリン作動性ニューロン; cDNA

コリン作動性ニューロンは運動機能、自立神経機能、記憶や学習などの高次脳機能に深く関与し、アルツハイマー病や筋萎縮性側索硬化症(ALS)などの神経変性疾患で変性、脱落が知られている。コリン作動性ニューロンの伝達物質であるアセチルコリンはコリンアセチル転移酵素(ChAT)による一段階反応で生合成される。我々は、ラットおよびマウスのChATmRNAの多様性を明らかにしている。一方でヒトのChATmRNAは、現在まで1種類のみが知られている。このmRNAは、齧歯類やブタのChATmRNAで翻訳開始コドン(ATG)に相当する箇所がスレオニン(ACG)に変異し、N末側に108アミノ酸残基が付加する特異な構造であった。また、このmRNAは約80kDaのタンパク質をコードしており、ヒトの脳組織から精製されるChATタンパク質の分子量(66-70kDa)と一致しない。さらに、ヒトの脊椎運動ニューロンの単一細胞あたりのChAT活性は齧歯類などの哺乳動物に比べて一桁低く、カエルや魚などの冷血動物と同程度の活性しかもたないことが知られており、ヒトの神経系の機能や病態との関連が注目されている。我々はこれらの現象の分子的基盤を明らかにする目的で実験を行い、以下の結果を得た。剖検ヒト脳組織から従来知られているタイプ(Mタイプ)のほかに、新たに3種類のChATcDNAclone(R,N1,N2タイプ)を単離した。in-vitro及びin-vivoの発現実験の結果、齧歯類に比べてヒト脳のChAT活性が低い原因は、(1)ヒトChAT遺伝子上のATGからACGへの変異により、本来とは異なるATGコドンを翻訳開始部位として使っていること、(2)最も多量に発現しているMタイプのChATmRNAの翻訳効率が最も低いことの2つに由来することが判明した。

Exercise, self-reliance mental function, memory test, high-speed aircraft training, disease, muscular dystrophy, atypical cord sclerosis (ALS), neuropathic disorder, loss of knowledge, cognitive disorder. This is the first step in the synthesis of ChAT (enzyme transfer enzyme). I don't know how to tell you the truth. I don't know. I don't know, I don't know. One party will contact the ChATmRNA, and now the first class will know how to do it. The starting point of the mRNA and other ChATmRNA applications (ATG) is the same as that of the ACG. At the end of the day, 108% acid residues will be added to the system. The molecular weight (66-70kDa) was consistent with the molecular weight (66-70kDa) of the same molecular weight (66-70kDa) in the tissue samples of 80kDa and mRNA. The level of ChAT activity in breast-feeding animals is lower than that in other animals, and the same level of activity in cold-blooded animals is higher than that in other animals. We are interested in the basic information of the molecule. The purpose is to improve the operation. The following results show good results. You can learn about the three types of ChATcDNAclone (Rmeno N1 and N2 movies) quarantines by analyzing the organization profile to learn about the three categories: the (M) license, and the new one. The results of the in-vitro and in-vivo tests show that the ChAT activity is lower than that of the normal ChAT, (1) the ATG activity on the ACG spool is abnormal, and the original ATG error is closed at the beginning of the test. (2) the most important thing is that there is a significant difference between the two groups. (2) the lowest ChATmRNA turnover rate is the lowest in terms of origin.

项目成果

MISAWA, Hidemi: "Coordinate expression of vesicular acetylcholine transporter and choline acetyltransferase in sympatetic superior cervical neurons" NeuroReport. 6. 965-968 (1995)

MISAWA，Hidemi：“交感上颈神经元中囊泡乙酰胆碱转运蛋白和胆碱乙酰转移酶的协调表达”NeuroReport。

MISAWA, Hidemi: "A subtype of opioid kappa-receptor is coupled to inhibition of Gil-mediated phospholipase C activity in the guinea pig cerebellum" FEBS Lett.361. 106-110 (1995)

MISAWA，Hidemi：“阿片类 kappa 受体的亚型与豚鼠小脑中 Gil 介导的磷脂酶 C 活性的抑制相结合”FEBS Lett.361。

YOKOJI, Hidehiro: "cDNA cloning and chromosomal localization of the human ciliary neurotrophic factor gene" Neurosci. Lett.185. 175-178 (1995)

YOKOJI、Hidehiro：“人类睫状神经营养因子基因的 cDNA 克隆和染色体定位” Neurosci。

ZHONG, Zhen-Guo: "Discrete acetylcholine release from neuroblastoma or hybrid cells overexpressing choline acetyltransferase into neuromuscular synaptic cleft" Neurosci. Res. 22. 81-88 (1995)

钟振国：“神经母细胞瘤或过度表达胆碱乙酰转移酶的杂交细胞进入神经肌肉突触间隙离散乙酰胆碱释放” Neurosci。