コリン作動性神経分化に伴う遺伝子発現制御機構の解明

阐明与胆碱能神经元分化相关的基因表达控制机制

• 批准号: 07279252
• 负责人: 三澤 日出巳
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1995
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1995 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-07279252/
• 关键词: アセチルコリン; コリンアセチル転移酵素; 神経変性疾患; コリン作動性ニューロン; cDNA

コリン作動ニューロンは運動機能、自律神経機能、記憶や学習の高次脳機能に深く関与し、アルツハイマー病や筋萎縮性側索硬化症(ALS)などの神経変性疾患で変性、脱落が知られている。コリン作動性ニューロン伝達物質であるアセチルコリンはコリンアセチル転移酵素(ChAT)による一段階反応で生合成される。我々は、ラットおよびマウスのChATmRNAの多様性を明らかにしている。一方でヒトのChATmRNAは、現在までの1種類のみがしられている。このmRNAは、齧歯類やブタのChATmRNAで翻訳開始コドン(ATG)に相当するスレオニン(ACG)に変異し、N末側に108アミノ酸残基が付加する特異な構造であった。また。このmRNAは約80kDaのタンパク質をコードしており、ヒトの脳組織から精製されるChATタンパク質の分子量(66-70kDa)と一致しない。さらに、ヒトの脊髄運動ニューロンの単一細胞あたりのChAT活性は齧歯類などの哺乳動物に比べて一桁低く、カエルや魚などの冷血動物と同程度の活性しかもたないことが知られており、ヒトの神経系の機能や病態との関連が注目されている。我々はこれらの現象の分子的基盤を明らかにする目的で実験を行い、以下の結果を得た。剖検ヒト脳組織から従来知られているタイプ(Mタイプ)のほかに、新たに3種類のChATcRNAclone (R,N1,N2タイプ)を単離した。in-vitro及びin-vivioの発現実験の結果、齧歯類に比べてヒト脳のChAT活性が低い原因は、(1)ヒトChAT遺伝子上のATGからACGへの変異により、本来とは異なるATGコドンを翻訳開始部位として使っていること、(2)最も多量に発現しているMタイプのChATmRNAの翻訳効率が最も低いことの2つに由来することが判明した。

コリンニューロンは motor function, self-discipline function, memory and learning function, high-level function, deep connection and アルAmyotrophic lateral sclerosis (ALS), amyotrophic lateral sclerosis (ALS), is a disease of the disease.コリンACTIVITYニューロン伝大MATTER Acetaminophen transfer enzyme (ChAT) is a one-stage reaction enzyme that synthesizes acetaminophen. 々は、ラットおよびマウスのChATmRNAの多様性を明らかにしている. One side of the ChATmRNAは, the current one type of ChATmRNAのみがしられている.このmRNAは, rodent type やブタのChATmRNA で译訳start コドン(ATG)にequivalent するスレオニン(ACG)に変isoし, N-terminal に108 アミノ acid residue がfujia するspecific な structure であった.また.このmRNAはAbout 80kDa The molecular weight (66-70kDa) of refined されるChAT タンパク is consistent.さらに, ヒトのridge movement ニューロンの単一cell あたりのChAT activity は rodents などのmammalian に is lower than べて一桁く, カエルやFish are cold-blooded animals and have the same degree of activity as fish and cold-blooded animals.おり, ヒトの神経组のFUNCTIONS やpathological とのrelated が NOTE されている. I have done the basic molecular basis of the phenomenon, and the following results have been obtained. ChATcRNAclone of 3 types of ChATcRNAclone that has been analyzed and analyzed (R,N1,N2タイプ)を単里した. in-vitro and びin-vivioの発appear実験のRESULTS, rodent typeに比べてヒト脳のChA Reason for low T activity, (1) ヒトChAT 伝子上のATGからACGへの変differentにより, originallyとはdifferent なるATG コドンをturn the beginning part of として使っていること, (2) the most amount of に発appears していThe translation efficiency of るMタイプのChATmRNA is the lowest and the origin of いことの2つに is clearly understood.

项目成果

ZHONG, Zhen-Guo: "Overexpression of choline acetyltransferse constitutes discrte acetylcholine release in synapse formation-defective neuroblastoma cells" J. Physiol. (Paris). 89. 137-145 (1995)

钟振国：“胆碱乙酰转移酶的过度表达构成突触形成缺陷的神经母细胞瘤细胞中离散的乙酰胆碱释放”J. Physiol。

YOKOJI, Hidehiro: "cDNA cloning and chromosomal localization of the human ciliary neurotrophic factor gene" Neurosci. Lett.185. 175-178 (1995)

YOKOJI、Hidehiro：“人类睫状神经营养因子基因的 cDNA 克隆和染色体定位” Neurosci。

MISAWA,Hidemi: "Coordinate expression of vesicular acetylchoine transporter and choline acetyltransferase in sympatetic superior cervical neurons" Neuro Report. 6. 965-968 (1995)

MISAWA，Hidemi：“交感上颈神经元中囊泡乙酰胆碱转运蛋白和胆碱乙酰转移酶的协调表达”神经报告。

ZHONG, Zhen-Guo: "Discrete acetylcholine relese from neuroblastoma or hybird cells overexp ressing choline acetyltransferase into neuromuscular synaptic cleft" Neurosci. Res. 22. 81-88 (1995)

钟振国：“神经母细胞瘤或混合细胞过度表达胆碱乙酰转移酶进入神经肌肉突触间隙，释放离散的乙酰胆碱” Neurosci。

MISAWA, Hidemi: "A subtype of opioid kappa-receptor is coupled to inhibition of Gil-mediated phospholipase C activity in the guinea pig cerebellum" FEBS Lett.361. 106-110 (1995)

MISAWA，Hidemi：“阿片类 kappa 受体的亚型与豚鼠小脑中 Gil 介导的磷脂酶 C 活性的抑制相结合”FEBS Lett.361。