コリン作動性神経分化に伴う遺伝子発現機構の解明

阐明与胆碱能神经元分化相关的基因表达机制

• 批准号: 09260234
• 负责人: 三澤 日出巳
• 金额: $ 0.96万
• 依托单位: Tokyo Metropolitan Institute for Neuroscience
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09260234/
• 关键词: アセチルコリン; コリンアセチル転移酵素; アセチルコリントランスポーター; コリン作動性ニューロン; トランスジェニックマウス

コリン作動性神経に必須の機能タンパク質であるコリンアセチル転移酵素(ChAT)とシナプス小胞アセチルコリントランスポーター(VAChT)は、同一の遺伝子座に「入れ子」になってコードされるという、他に例を見ない遺伝子構造をしている。我々は以前にマウスChAT遺伝子の上流領域3.4kbの特異性をトランスジェニックマウスを作出して解析したが、コリン作動性ニューロン特異性は認められなかった。そこで、上流領域をVAChTのopen reading frame(ORF)を含む6.4kbに広げてトランスジェニックマウスを作出した。レポーター遺伝子として用いたβ-ガラクトシターゼの発現はCh1-Ch8にグループ分けされる投射ニューロン群、脳幹と脊髄の運動ニューロンおよび新線条体の局所回路ニューロンの細胞体で検出され、大脳皮質、海馬、扁桃体などの投射領域で終末様の構造が認められた。さらに、このトランスジェニックマウスではwildーtypeマウスより数倍多いVAChT mRNAの発現が検出されるが、この発現はコリン作動性ニューロンが局在する組織に限られ、異所性の発現は認められなかった。以上の結果は、VAChTのORF(もしくはその近傍)にChATとVAChTのコリン作動性ニューロンでの発現を規定するDNA配列が存在することを示している。本研究で同定したcholinergic-specific promoterは、任意の遺伝子をコリン作動性ニューロンで特異的に発現させたり、Cre/loxP systemを用いて任意の遺伝子をコリン作動性ニューロンのみでノックアウトしたマウス(cholinergicーspecific knockout mouse)を作出するために有用なtoolになると期待できる。

The action god must be able to monitor the activity of the enzyme (ChAT), which is responsible for the microcytopathic acid (VAChT). In the same constellation, it is necessary for the operator to enter the device, and to make the device. In the past, we did not know if there were any problems in the field of high-level ChAT, such as the use of 3.4kb, the characteristics of 3.4kb, the nature of behavior, and the nature of behavior. The upper-class domain "VAChT" open reading frame (ORF) contains the following words: "6.4kb". In the system, you can see that the Ch1-Ch8 data sets are projected into the cluster, the spine system, the new line, the body, the body, the skin, the sea, the tonsil, the body, the body, and the tonsil. Do you want to know that there is a difference between wild and type? the number of times more than that of VAChT mRNA, you can see that there is an increase in the level of activity in your organization, and you can see that there are significant differences in your organization. The above results show that there is a negative effect on the allocation of DNA in the specified DNA configuration. The results show that there is a negative effect on the ChAT

项目成果

SAKURAGAWA,Norio: "Evidence for active acetylcholine metabolism in human amniotic epithelial cells:Applicable to intracerebral allografting for neurologic disease." Neurosci.Lett.232. 53-56 (1997)

SAKURAGAWA,Norio：“人羊膜上皮细胞中乙酰胆碱代谢活跃的证据：适用于神经系统疾病的脑内同种异体移植。”

NAGAO,Masahiro: "Loss of cholinergic synapses on the spinal motor neurons of amyotrophic lateral sclerosis." J.Neuroopathol.Exp.Neurol.(発表予定). (1998)

NAGAO，Masahiro：“肌萎缩侧索硬化症脊髓运动神经元的胆碱能突触丧失。”J.Neuroopathol.Exp.Neurol（即将发表）。

ICHIKAWA,Tomoyuki: "Localization of two cholinergic markers,choline acetyltransferase and vesicular acetylcholine transporter in the central nervous system of the rat." J.Chem.Neuroanat.13. 23-39 (1997)

ICHIKAWA，Tomoyuki：“两种胆碱能标记物，胆碱乙酰转移酶和囊泡乙酰胆碱转运蛋白在大鼠中枢神经系统中的定位。”

FUJII,Takeshi: "Induction of choline acetyltransferase mRNA in human mononuclear leukocytes stimulated by phytohemagglutinin,a T-cell activetor." J.Neuroimmunol.(発表予定). (1998)

FUJII，Takeshi：“植物血凝素（一种 T 细胞激活剂）刺激人单核白细胞中胆碱乙酰转移酶 mRNA 的诱导”（J.Neuroimmunol）。

NACIFF,J.M.: "Molecular characterization of the mouse vesicular acetylcholine transporter gene." NeuroReport. 8. 3467-3473 (1997)

NACIFF，J.M.：“小鼠囊泡乙酰胆碱转运蛋白基因的分子特征。”