ヒト染色体セントロメア(αサテライトDNA)領域における高次ヌクレオソーム構造

人类染色体着丝粒（α-卫星 DNA）区域的高阶核小体结构

• 批准号: 08274207
• 负责人: 依田 欣哉
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: Nagoya University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08274207/
• 关键词: ヒト染色体; セントロメア領域; α-サテライトDNA; CENPB; ヌクレオソーム構造; ポジショニング; CENPB二量体; CENPA

ヒトセントロメア領域を構成するαサテライトDNAとセントロメアタンパク質CENP-A、CENP-Bおよびコアヒストンとの相互作用によって構成されるセントロメア特異的ヌクレオソーム構造を解析し、これまでに以下の点を明らかにした。(i)CENP-Bboxの基本的分布様式が2mer毎に一回の規則的配列である(論文受理)。(ii)in vitro,in vivo解析からCENP-Bがヌクレオソーム構造のポジショニングを誘起する(論文投稿中)。(iii)CENP-A及びヒストンH2A、H2B、H3、H4を高度に精製しヌクレオソーム構造の再構成を行い、CENP-AがヒストンH3としての機能を持つことを示した(論文準備中)。本年度はこれらの成果を踏まえて、(i)HeLa細胞単離核を用いてDNaselフットプリント解析を行いCENP-Bbox周辺のヌクレオソーム構造がDNAヘリックスの回転ユニットに関しても厳密にポジショニングしていることを証明した(ロ-テ-ショナルポジショニング)。(ii)精製CENP-Aを用いたヌクレオソーム再構成系においてMNaseフットプリント解析を行い、CENP-BboxにCENP-Bが結合した条件下では、コアヒストンを用いたときと全く同一の超感受性部位がCENP-Bbox周辺に誘起されることを示した。この結果はさらにvivoに近い再構成系を組み立てることに成功したことを意味するもので意義深いと考えている。(iii)CENP-A抗体の作製を試みている。

The following points are explained in detail in the analysis of the structure of the interaction between CENP-A, CENP-B and CENP-A in the field of the structure. (i)CENP-Bbox basic distribution formula is 2mer per cycle of the regular arrangement (paper acceptance). (ii)In vitro,in vivo analysis: CENP-B is a new type of structural solution. (iii)CENP-A and H2A, H2B, H3, H4 are highly refined, and the structure of CENP-A and H3 are highly refined. This year's results are summarized as follows: (i)HeLa cells isolated from the nucleus using DNasel protein analysis, CENP-Bbox perimeter analysis, and structural analysis of DNA protein. (ii)The CENP-A box is used to reconstruct the system. The CENP-B box is used to analyze the MNase. The CENP-A box is used to analyze the MNase. The CENP-B box is used to analyze the MNase. The result is that the system is composed of two parts: one part is composed of two parts, the other part is composed of two parts. (iii) The preparation of CENP-A antibody was studied.

项目成果

岡崎、舛本、北川、池野、依田ら: "Properfies and Interaction of CENPB and Contromere Satellite DNA in Mammefiar Cells" Chromosome Segregation and Aneuphoidy III. (印刷中). (1997)

Okazaki、Masumoto、Kitakawa、Ikeno、Yoda 等：“Mammefiar 细胞中 CENPB 和 Contromere Satellite DNA 的特性和相互作用”染色体分离和非整倍性 III（印刷中）。

依田欣哉等: "Contromer ProteinB of African Grean Monkey Cells : Gene Structure,Cellular Eypression,and Amtromere Lecalization" Molecular and Cellular Biology. 16・9. 5169-5177 (1996)

Kinya Yoda 等人：“非洲绿猴细胞的 Contromer ProteinB：基因结构、细胞表达和 Amtromere Lecalization” 分子和细胞生物学 16・9（1996）。

網代,依田等: "Arleration of cell Oycle-clependent Pistone Phosphorylations by Akadaic Acid Induction of Mitosis Specific H3 Phyosphorylation and Chromation Condensetion in Mommeliare Lnterphare cells" Journal of Biological Chemistry. 271. 13197-13201 (1996)

Ajiro, Yoda 等人：“在 Mommeliare Lnterphare 细胞中通过赤田酸诱导有丝分裂特异性 H3 磷酸化和染色缩合来实现细胞 Oycle-clependent Pistone 磷酸化”，《生物化学杂志》271。13197-13201 (1996)。

依田欣哉、岡崎恒子: "Site Specific Base Relations in Human α-Satollite Monomer DNAs Are Associated with Regnlarly Distributed CENPB Bones" Chromosome Research. (印刷中). (1997)

Kinya Yoda、Tsuneko Okazaki：“人类 α-卫星单体 DNA 中的位点特定碱基关系与规则分布的 CENPB 骨骼相关”染色体研究（1997 年出版）。

依田欣哉、岡崎恒子: "Centromere Specific Nucleosome Structures in Human Cells" Keystone Symposium on Functional Organization of the Nucleus. (印刷中). (1997)

Kinya Yoda，Tsuneko Okazaki：“人类细胞中着丝粒特异性核小体结构”关于细胞核功能组织的基石研讨会（正在出版）。