核内GTPase活性化蛋白の機能制御に関与する細胞内蛋白質限定分解機構の解析

参与核 GTP 酶激活蛋白功能调节的细胞内蛋白限制降解机制的分析

• 批准号: 08278214
• 负责人: 服部 雅一
• 金额: $ 1.34万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1996
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1996 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-08278214/
• 关键词: Spa‐1; RaplGAP; PEST; プロセッシング; ATP依存性プロテアーゼ

正常の静止期リンパ球が細胞増殖周期へ進入するのに従って新たに転写誘導される遺伝子Spa‐1は、N末端にSH3結合ドメイン、中央部にヒトRap1GAP相同領域、C末端にREST配列とロイシンジッパー(LZ)配列を含むコイルドコイル構造を有する全長1,038個のアミノ酸残基より成る細胞失内蛋白質(p130)をコードする。p130は、末梢の成熟静止期リンパ球に強発現されるが、マイトゲン刺激により増殖サイクルに進入するに伴いその発現は減弱消失する。また、末梢成熟B細胞に比し骨髄中未成熟B細胞ではp130の発現は弱く、同プレB細胞ではさらに弱いことから,これら正常のリンパ球集団におけるp130の発現量は、静止期リンパ球の割合を反映すると示唆された。抗IgM抗体でB細胞株を架橋刷ると、細胞は一旦G1/G0期でサイクルを停止し、その後細胞死に至るが、アレストに伴ってp130は明らかに発現増強する。また、NIH3T3細胞では通常p130の発現は殆ど検出できないが、血清飢餓によりG0期に入るに従い発現増強され,血清再添加により増殖期へ戻ると再びその発現が限弱消失する。他方、p130発現量は増殖サイクルの各相では著名な変動を示さない。これらの結果、p130は個々の細胞の増殖サイクルへの進入と離脱に呼応して明確な発現制御を受ける分子であること、およびこの発現制御は抗原刺激により同時に誘導されるプロテアーゼ系によって速やかにp130が特異的プロセッシングを受けるためであることが強く示唆された。そこで活性化リンパ球細胞溶解液を用いたin vitroプロセッシングアッセイにより、このプロテアーゼ系の性状を調べたところ、Mg^<2+>およびATP依存性にその活性が示されることが明かとなった。また、抗体ならびに各種カラムによる部分精製からこのp130の特異的プロセッシングに関与する酵素は、プロテオソーム系とは異なる新たなATP依存性プロテアーゼであることが示唆された。

During the normal quiescent phase of the cell cycle, the new gene was induced by SPA-1, SH-3 binding sites at the N-terminal, Rap-1 in the central region, REST alignment at the C-terminal, and LZ alignment, which contained a total length of 1,038 amino acid residues. p130- The expression of p130 in mature and terminal B cells is weaker than that in immature B cells, and the expression of p130 in mature B cells is weaker than that in immature B cells, and the expression of p130 in mature B cells is weaker than that in mature B cells. Anti-IgM antibodies are present in B cell lines when they bridge, when cells stop at G1/G0, when cells die, and when they stop at p130. In NIH 3T3 cells, p130 usually appears in the medium, serum starvation occurs in the medium, serum re-addition occurs in the medium, and serum re-addition occurs in the medium. The other side, p130 emission quantity increases the reproduction of each phase of the system, and the other side, p130 emission quantity increases the reproduction of each phase. As a result, p130-specific cell proliferation, entry and exit, and expression of specific receptor molecules are strongly induced by antigen stimulation. The activity of the activated cell lysate was regulated by the activity of ATP in vitro, Mg^<2+> and ATP. For example, the antibody is purified from the p130-specific enzyme, and the p130-specific enzyme is purified from the p130-specific enzyme.

项目成果

Yasuo Wada,et al.: "Mitogen‐inducible SIPA1 is mapped to the conserved syntenic groups of chromosome 19 in mouse and chromosome 11g13.3 centromeric to BCL1 in human." Genomics. 39. 66‐73 (1997)

Yasuo Wada 等人：“有丝分裂原诱导的 SIPA1 被映射到小鼠 19 号染色体的保守同线组，以及人类 11g13.3 染色体着丝粒的保守同线组。” 39. 66-73 (1997)。

Toshihumi Morimura,et al.: "Apoptosis and CD8‐down regulation in the thymus of chickens infected with Marek's disease virus." Archives of Vitology. 141. 2243‐2249 (1996)

Toshihumi Morimura 等人：“马立克氏病病毒感染鸡胸腺中的细胞凋亡和 CD8 下调。”Vitology 档案 141. 2243-2249 (1996)

Kousuke Okada,et al.: "Phenotype analysis of lymphoid cells in Marek's disease of CD^<4+> or CD^<8+> T celldeficient chickens ; Occurrence of double negative T cell tumor." Avion Pathology. (印刷中).

Kousuke Okada 等人：“CD^4+ 或 CD^8+T 细胞缺陷鸡的马立克氏病淋巴细胞的表型分析；双阴性 T 细胞肿瘤的发生”。 。