慢性骨髄性白血病を発症するSPA-1遺伝子破壊マウスを用いた免疫監視機構の研究

使用 SPA-1 基因破坏的慢性粒细胞白血病小鼠进行免疫监视研究

基本信息

批准号：
16021225
负责人：
服部雅一
金额：
$ 4.35万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

リンパ・造血系組織の主たるRap1GAPであるSPA-1の遺伝子破壊(SPA-1/-)マウスは、生後1年〜1年半でほぼ全例において慢性骨髄性白血病をはじめとする多彩な白血病を発症する。本研究では、SPA-1欠失による白血病発症の分子メカニズムを明らかにするために、白血病(B-CLL)を発症したSPA-1-/-マウスの骨髄から細胞株(1629B細胞)を樹立し、解析を行った。1629B細胞は、B220^+C5^+IgM^+でB1細胞由来であると考えられ、この細胞をSCIDマウスに移入するとB-CLLが発症した。1629B細胞には、SPA-1欠失によりGTP結合型Rap1が蓄積していたが、SPA-1遺伝子の再導入により(1629B/SPA-1細胞)これを消失させると、その白血病原性は完全に消失した。1629B細胞と1629B/SPA-1細胞のin vitro増殖能については全く差が見られなかった。また、両細胞をSCIDマウス移入した後の臓器分布ならびに生体内における増殖についても差が見られなかったが、両細胞株のインターフェロン(IFN)誘導細胞死に対する感受性について調べたところ、1629B/SPA-1細胞ではIFN-β処理によりBcl-2の減少が起こり、細胞死が誘導されたのに対し、1629B細胞ではBcl-2はほとんど変化せず、細胞死誘導に強い抵抗性を示した。これらの結果から、1629B細胞は蓄積したGTP結合型Rap1によりIFNにより誘導される細胞死に抵抗性となることで、自然免疫系を介した監視機構から逃れ、白血病原性を維持していることが明らかとなった。このことは、活性化型Rap1の蓄積は白血病の発症のみならず生体における白血病原性維持にも必須であることを強く示唆するものである。

SPA-1的基因破坏（SPA-1/ - ）小鼠，淋巴机和造血组织的主要RAP1GAP，在1至1.5岁的情况下几乎所有情况下都会发展出各种白血病，包括慢性髓样白血病。在这项研究中，从Spa-1 - / - 小鼠的骨髓中建立了细胞系（1629b细胞），该小鼠产生了白血病（B-CLL）并分析了它们。 1629b细胞被认为是源自具有B220^+C5^+IgM^+的B1细胞，当这些细胞转移到SCID小鼠中时，B-CLL就会形成。由于SPA-1缺失，在1629b细胞中积累了GTP结合RAP1，但是当Spa-1基因重新引入（1629b/spa-1细胞）时，其白血病就会完全消除。 1629b细胞和1629b/spa-1细胞的体外增殖潜力没有差异。此外，两种细胞转移到SCID小鼠后的器官分布和体内生长均未发现差异，但是当研究了干扰素（IFN）诱导两种细胞系的细胞死亡的敏感性被研究时，IFN-β治疗导致Bcl-2的降低，并导致1629b细胞的细胞死亡诱导的细胞抑制均为1629B的细胞，并在1629b中均具有强烈的抑制。这些结果表明，1629b细胞对IFN诱导的细胞死亡具有抵抗力，从而累积了GTP结合的RAP1，从而通过先天免疫系统避免了监视机制并维持白血病。这强烈表明，活化的RAP1的积累不仅对白血病的发展至关重要，而且对于维持生物中白血病的维持至关重要。