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トランスポゾン転移組換えの初期反応の解析

转座子转移重组的初始反应分析

基本信息

批准号：
08280205
负责人：
大坪栄一
金额：
$ 1.54万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1996
资助国家：
日本
起止时间：
1996 至无数据
项目状态：
已结题

项目摘要

突然変異は生物の多様性、進化の基礎となったものであるが、現存の生物においては病態を引き起こす源となっている。突然変異には遺伝子の再編を伴う変異があり、生体において高頻度に起こるが、その多くはトランスポゾン自身がコードするトランスポゼ-スによって誘起される。本研究は、異なる様式で転移するバクテリアのトランスポゾンTn3と挿入因子IS3の転移機構を解明することを目的としたものである。1.Tn3トランスポゼ-スによるニッキング反応の解析。トランスポゼ-ス過剰産生菌破砕液中で、基質としてTn3を運ぶプラスミドを加えるとTn3の末端でニックが生じる。本研究において、先ず、ニッキング反応の基質として超らせん構造が必要であることを明らかにした。また、トランスポゼ-スの認識部位であるTn3の末端領域に変異を持つものを基質とした場合にニックが生じないことから、ニッキングがトランスポゼ-ス依存の反応であることを確認した。さらに、前述の菌破砕液の硫安画分IIIaにはトランスポゼ-スが、IIIcにはニッキング反応を促進する宿主タンパク質(nicking stimulation factor;NSF)が含まれていることを明らかにすると共に、IIIc中のNSFを種々のカラムを使用したクロマトグラフィーを行うことによってNSFを精製した。2.IS3トランスポゼ-スによる転移の中間体生成反応の解析。IS3のトランスポゼ-スを誘導生産させ、環状及び直鎖状IS3分子が時間経過に従ってどのように生成されるのかをゲル電気泳動によって見いだし、その後の消長を見た。ここで見いだした環状・直鎖状IS3分子は転移の中間体である可能性が強いが、同様の分子がレトロウイルスの挿入の過程でも生じることは興味深い。

There is a sudden change in the diversity of organisms, the development of biological diseases, and the occurrence of diseases in the source. All of a sudden, you can't tell me that you don't know what's going on, and all of a sudden, you don't know what's going on, and all of a sudden, all of a sudden, there's something wrong with you. In this study, the purpose of this study is to determine the input factor of Tn3. The purpose of this study is to understand the purpose of this study. 1.Tn3 has a negative effect on the resolution. In the sanitary bacteria spoilage solution, there is a significant increase in the number of bacteria in the bacteria spoilage solution, which is the end of the Tn3. The purpose of this study is to make sure that it is necessary to make the necessary information. In the end of the Tn3, the end of the field indicates that you are not aware of the situation. The end of the field is located in the end of the field. The IIIa, the aforementioned bacteria breakage solution, thioampere, and the IIIc were used to enhance the quality of the host computer (nicking stimulation factor;NSF). The products in the IIIc were used in all kinds of products, such as those in the NSF market. The analysis of the volume generation inverse in the 2.IS3 data transfer. IS3 environmental and vertical IS3 molecules have been generated during the incubation period. The environmental and environmental IS3 molecules have been generated by thermal shock wave generation, and then the temperature will grow later. In the process of environmental straight-line IS3 molecular transfer, there is a strong possibility that there is a strong possibility that the body will be affected in the process.