ElonginとVHL癌抑制蛋白による転写調節と細胞の増殖・分化との関連性の解析

Elongin和VHL抑癌蛋白转录调控与细胞增殖分化的关系分析

• 批准号: 09254205
• 负责人: 麻生 悌二郎
• 金额: $ 1.28万
• 依托单位: University of Tsukuba
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09254205/
• 关键词: エロンガン; 転写伸長因子; 基本転写因子; RNAポリメラーゼII; VHL癌抑制遺伝子; VHL癌抑制蛋白; von Hippel-Liadun病; 腎癌

1.エロンガンのin vivoの機能の解析エロンガンの機能を個体レベルで検索することを目的として、酵母ゲノムのスクリーニングにより酵母のエロンガンA、C遺伝子を、次いでヒトのエロンガンB、CをBaitとして用いたTwo-Hybridスクリーニング法によりショウジョウバエのエロンガンC、Bの遺伝子を単離した。続いて、エロンガンA、C両遺伝子を破壊した酵母の変異株を作製して表現型を詳細に調べたが、野性株との間に明らかな差異を認めなかった。また、酵母にはエロンガンBとVHLのホモログの遺伝子が存在しないことが明らかとなった。2.エロンガンA結合蛋白の同定エロンガンAのN末端(アミノ酸配列1-110)には、転写伸長因子SIIのN末端と56%の相同性を有する配列が存在する。GSTとこの領域とを融合させた蛋白をプローブとして用いて、これら両配列がRNAポリメラーゼIIホロ酵素と結合することを証明した。以上の結果より、エロンガンによる転写伸長の制御とVHL発癌との結びつきを解明するためには、より高等な生物を用いる必要があると判断し、マウスのエロンガンA遺伝子をコンディショナルな遺伝子ターゲティング法により破壊し、その機能を個体レベルで解析することにした。これまで既に、マウスのエロンガンA遺伝子を単離し、その構造を解析している。さらに、エロンガンによる転写伸長活性化の機構を解析するために、エロンガンAとRNAポリメラーゼIIホロ酵素とを仲介している因子を同定することにした。

1. Analysis of the functions of embryos in vivo To achieve this goal, the functions of embryos can be explored individually. In the yeast genome, the embryos A and C of the yeast are formed, and the embryos B and C of the yeast are formed in the middle. The Two-Hybrid hybridization method is used to form the embryos C and B of the yeast genome. A, C, D, D, The yeast and the yeast are both present. 2. The N-terminal sequence (sequence 1-110) of protein A binding protein has 56% identity to the N-terminal sequence of elongation factor SII. GSTs are the domain of fusion enzymes. The above results show that the control of elongation and VHL development is necessary for the determination of the function of higher organisms. The structure of the structure is analyzed. In addition, in order to analyze the mechanism of write elongation activation in transcription, the factors that mediate the transcription of transcription A and RNA polymerase II enzymes are determined.

项目成果

麻生悌二郎: "実験医学" 羊土社, 220 (1997)

麻生太次郎：《实验医学》Yodosha，220 (1997)

Aso,T.: "molecular cloning of DNAs encoding the regulatory subunits of Elongin from Saccharomyces cerevisiae and Droscphila melanogaster" Biochem.Biophys.Res.Commun.241. 334-340 (1997)

Aso,T.：“编码来自酿酒酵母和果蝇的伸长蛋白调节亚基的 DNA 的分子克隆”Biochem.Biophys.Res.Commun.241。

Pan,G.: "Interaction of elongation factors TFIIS and elongin A with a human RNA polymerase II hdoenzyme capable of promoter-specific initiation and responsive to transcriptional activators" J.Biol.Chem.272. 24563-24571 (1997)

Pan,G.：“伸长因子 TFIIS 和伸长蛋白 A 与能够启动子特异性启动并响应转录激活剂的人 RNA 聚合酶 II hdoenzyme 的相互作用”J.Biol.Chem.272。

麻生 悌二郎: "医学のあゆみ" 医歯薬出版, 118 (1997)

麻生太二郎：《医学史》石药出版社，118（1997）