VHL癌抑制蛋白の機能喪失による発がんのメカニズムの解析

VHL抑癌蛋白功能丧失致癌机制分析

• 批准号: 13214110
• 负责人: 麻生 悌二郎
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kochi Medical School
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13214110/
• 关键词: エロンガン; 転写伸長; von Hippel-Lindau病; VHL癌抑制遺伝子; VHL癌抑制蛋白; 散発性腎癌; RNAポリメラーゼII

1.転写伸長因子エロンガンAの遺伝子欠失ES細胞とマウスの作製VHL癌抑制蛋白と相互作用する転写伸長因子エロンガンの触媒サブユニットであるエロンガンAを欠失したES細胞を作製した。エロンガンA(-/-)のES細胞では、細胞増殖速度の低下と細胞体積の増大を認めるが、解析によりこれらが細胞周期G2/M期での停止に基づくものであることが判明した。次いで、野生型と作製したエロンガンA(-/-)のES細胞とを用いてDNAチップ解析を実施したところ、両者の間で一群の遺伝子の発現量にのみ有意な差が認められ、エロンガンAがある特定の遺伝子の発現をのみ調節していることが判明した。現在、発現に差の認められた遺伝子とG2/M期停止との関連について解析中である。また、ヘテロマウスの掛け合わせによりホモのエロンガンA欠失マウスを作製中である。2.新規転写伸長因子エロンガンA3の単離と機能解析エロンガンAファミリーの新規メンバーであるエロンガンA3のcDNAをクローニングした。エロンガンA3は、エロンガンAと同様それ自身で転写伸長活性を有するが、エロンガンAとは異なりエロンガンBCとの結合による転写伸長能の活性化を受けないことが判明した。そこで、エロンガンA3のいくつかの領域を該当するエロンガンAの配列で置換したキメラ蛋白を作製してエロンガンBCに対する反応性を調べた結果、エロンガンAのC末端領域の配列がBCによる括性化に重要であることが明らかになった。3.VHL癌抑制蛋白の新規標的分子の単離BaitであるVHL蛋白を安定化させるためにエロンガンBとCとを共発現する酵母株を用いてTwo-hybridスクリーニングを実施した結果、ショウジョウバエの癌抑制蛋白の1つであるTid(tumorou s imaginal discs)56のヒトホモログTid-1がVHL蛋白と相互作用する分子として単離された。

1. Elongation factor A gene is deficient in ES cells, and it functions as a VHL cancer suppressor protein. ES cells with cell cycle A(-/-) were found to have low cell growth rate and increase cell volume. The expression of a specific gene in ES cells of the second and wild-type strains was determined by DNA sequencing. Now, there is a difference between the recognition and the analysis of the relationship between the G2/M period. Also, the 2. New regulation of elongation factor A3 and functional analysis of A3 and cDNA The activity of the elongation of the polymer is determined by the combination of the polymer A and the polymer B. The domain of the C-terminal region of A is important for the characterization of the C-terminal region of A. 3. The new target molecule of VHL cancer suppressor protein was isolated from the yeast strain in which VHL protein was stabilized and co-developed. The results showed that Tid(tumorou s imaginal discs)56 of VHL protein interacted with Tid-1 of VHL protein.

项目成果

Zhang, C.: "Homocysteine induces programmed cell death in human vascular endothelial cells through activation of the unfolded protein response"J. Biol. Chem.. 276. 35867-35874 (2001)

张，C.：“同型半胱氨酸通过激活未折叠蛋白反应诱导人血管内皮细胞程序性细胞死亡”J。

Zhang, C.: "Activation of JNK and transcriptional repressor ATF3/LRF1 through the IRE1/TRAF2 pathway is implicated in human vascular endothelial cell death by homocysteine"Biochem.Biophys.Res.Commun.. 289. 718-724 (2001)

张，C.：“通过 IRE1/TRAF2 途径激活 JNK 和转录抑制因子 ATF3/LRF1 与同型半胱氨酸引起的人血管内皮细胞死亡有关”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 289. 718-724 (2001)