転写伸長制御の破綻に基づく発がんのメカニズムの解明

基于转录延伸控制破坏阐明致癌机制

• 批准号: 12213142
• 负责人: 麻生 悌二郎
• 金额: $ 3.01万
• 依托单位: Japanese Foundation For Cancer Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (C)
• 财政年份: 2000
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2000 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-12213142/
• 关键词: エロンガン; 転写伸長; von Hippel-Lindau病; VHL癌抑制遺伝子; VHL癌抑制蛋白; 散発性腎癌; ユビキチンリガーゼ; RNAポリメラーゼII

1.転写伸長因子エロンガンAの遺伝子欠損マウスの作製マウスのエロンガンA染色体遺伝子を単離し、転写活性に必須な領域をコードするエクソンをneo耐性遺伝子で置換したターゲティングベクターを構築した。次いで、ES細胞に導入して薬剤による選別を行ない、相同組換えを起こしたES細胞クローンが3個単離できた。現在キメラマウスの作製を試みている。2.VHL蛋白-エロンガンBC複合体のユビキチンリガーゼ機能の証明ヒトVHLと高い相同性を示すショウジョウバエの遺伝子ホモログを単離した。ヒトおよびハエ由来のVHL蛋白は、エロンガンBC複合体と直接結合し、さらにユビキチンリガーゼSCF複合体の構成因子であるCul-2、Rbx1とも結合して、計5つの蛋白から成る複合体を形成した。次に、VHL複合体がSCF複合体と類似した構造を示すため複合体の構成因子を調製して試験管内ユビキチン化アッセイを実施したところ、VHL複合体がSCF同様にユビキチンリガーゼ活性を有することが明らかとなった。さらに、VHL病では血管腫、血管芽腫など血管の豊富な腫瘍を高頻度に発症するため、血管増殖因子の発現を調節しているHIF-1αをその標的分子として想定して解析したところ、ヒトおよびハエVHL蛋白がHIF-1αと直接結合し、VHL複合体が試験管内でHIF-1αをユビキチン化することが明らかとなった。3.エロンガンAファミリーのメンバーの単離と機能解析エロンガンAに相同な新規分子エロンガンA2とA3(Aso,T.,et al.未発表)とをクローニングした。ノーザン法による解析の結果、A2が精巣特異的であるのに対して、A3はAと同様に汎組織性の発現を示した。次に、発現精製した蛋白を用いて試験管内転写伸長アッセイを実施したところ、エロンガンA2、A3ともに単独で転写伸長活性を有するが、エロンガンAとは異なりエロンガンBCとの結合による転写伸長活性の促進化を受けないことが判明した。

1. When you write the elongation factor, you need to know that your chromosome is isolated, and that your activity must be in your field. You must have your neo tolerance gene in your system. The secondary and ES cell subscribers have selected a different line, and the same group has started to switch off the ES cell subscribers to the three quarantines. Now I'm going to do something about it. I don't know. The 2.VHL protein was cloned into the BC replicate.It was shown that the VHL was highly homotypic and that it was isolated from the host. The reason for this is that the VHL protein, the BC complex, the SCF complex, the Cul-2, the Rbx1, the protein, the protein, the DNA, the protein, the Cul-2, the protein, the DNA, the protein, the Cul-2, the DNA, the protein, the DNA, the protein The secondary and VHL replicas "SCF replicates" are similar to each other. They show that the complex is a factor, and that the SCF complex of the VHL complex has the same activity. The molecular structure of HIF-1 α gene is expressed in the presence of vascular, vascular germ, vascular germ, blood vessel, blood In the VHL complex, the HIF-1 α gene was isolated from the tube, and the DNA was digested. 3. The quarantine machine is capable of parsing the same new rules, the same molecular rules, the A2aA3 (Aso,T.,et al). The table is not available.) I am sorry to hear that. This method is used to analyze the results, A2, A3, A3, and so on. The second and the third part of the system is used to improve the activity of BC, which can be used to improve the performance of the system. In this paper, the results show that the growth of the protein is affected by the application of the device in the tube, A2 and A3.

项目成果

Cai,Y: "Homocysteine-responsive ATF3 gene expression in human vascular endothelial cells : signal transduction pathway and promoter responsive element."Blood. 96. 2140-2148 (2000)

蔡Y：“人血管内皮细胞中同型半胱氨酸反应性ATF3基因表达：信号转导途径和启动子反应元件。”血液。

Aso,T.: "Identification and characterization of Elongin A2, a new member of an Elongin family of transcription elongation factors, specifically expressed in the testis."J.Biol.Chem.. 275. 6546-6552 (2000)

Aso,T.：“Elongin A2 的鉴定和表征，Elongin A2 是 Elongin 转录延伸因子家族的新成员，在睾丸中特异性表达。”J.Biol.Chem.. 275. 6546-6552 (2000)

Aso,T.: "Drosophila von Hippel-Lindau tumor suppressor complex possesses E3 ubiquitin ligase activity."Biochem.Biophys.Res.Commun.. 276. 355-361 (2000)

Aso,T.：“果蝇 von Hippel-Lindau 肿瘤抑制复合物具有 E3 泛素连接酶活性。”Biochem.Biophys.Res.Commun.. 276. 355-361 (2000)

北嶋繁孝: "転写伸長因子の機能-TFIIFとエロンガン"共立出版. 10 (2000)

Shigetaka Kitajima：“转录延伸因子的功能 - TFIIF 和 elongan”Kyoritsu Shuppan 10 (2000)。