消化器癌における遺伝子診断の臨床応用と遺伝子治療に関する研究

消化道肿瘤基因诊断及基因治疗的临床应用研究

• 批准号: 09255237
• 负责人: 杉町 圭蔵
• 金额: $ 1.73万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 1997
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 1997 至 1999
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-09255237/
• 关键词: 消化器癌; マイクロサテライト不安定性; 制癌剤感受性; 遺伝子診断; 遺伝子治療; HVJ-リポソーム

消化器癌における遺伝子診断の臨床応用および遺伝子治療の基礎的研究として、本年度、以下の成果を得た。I.DNA修復異常の遺伝子診断(1)ミスマッチ修復活性の検出系の開発ミスマッチ修復系は抗癌剤がもたらすDNA障害に深く関与していると考えられる。我々は正常組織と癌組織を異なった蛍光ラベルのプライマーを用いてPCR反応を行い、シーケンサーで解析する正確で客観的なマイクロサテライト不安定性(MSI)解析法を構築した。(2)消化器癌におけるミスマッチ修復異常上記検出系を用い、食道癌46例中6例,胃癌73例中13例のMSI陽性症例を認め、消化器癌の発生にミスマッチ修復異常の関与が示唆された。胃癌では低分化な癌に有意にMSIが多く、癌の悪性度とも関係していると考えられた。また、胃の正常組織におけるマイクロサテライト配列の長さを各個人間で比較すると、CA repeat長が長い個人において高い割合でMSIを示す傾向が認められた。従って、MSI解析を行う場合は、適切なmarkerの選択と解析する集団における平均的なCA rereatの長さを考慮する必要があると考えられた。II.肝細胞癌を用いた遺伝子治療の基礎的研究(1)HSVのtkをexpression vectorに挿入し、このプラスミドべクターをHMG-1 (High Mobility Group 1) と結合させ、ボルテックス法と超音波処理によりポソームに取り込ませ、DNA-リポソーム複合体を形成させた。これを紫外線照射したHVJと反応させHVJ-リポソームを得た。(2)動物肝癌モデルへの遺伝子治療:DNA-リポソーム複合体を、肝癌細胞株HepG2を皮下注して得られた肝癌モデルの片方の腫瘍に100μlずつDirect injectionを行った。翌日より、腹腔内にGancyclovirを注入し、腫瘍のサイズを観察したところ、治療群では 腫瘍サイズの増大は認めなかったが、非治療群では腫瘍サイズの増大を認めた。HVJ-リポソームは、繰り返し投与可能なベクターであり、遺伝子治療の有用なベクターとなることが示唆された。データ採集についての患者本人の同意は得ている。

Digesters carcinoma に お け る heritage 伝 son diagnosis の 応 with お よ び heritage 伝 son treatment based research と の し て, this year, the following の achievements を た. I.D NA repair abnormal の heritage 伝 son diagnosis (1) ミ ス マ ッ チ repair activity の 検 out started の 発 ミ ス マ ッ チ repair department は anti-cancer tonic が も た ら す DNA handicap of に deep く masato and し て い る と exam え ら れ る. I 々 は cancer と normal tissue を different な っ た 蛍 light ラ ベ ル の プ ラ イ マ ー を with い て PCR anti 応 を い, シ ー ケ ン サ ー で parsing す る correct で guest 観 な マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト unrest (MSI) analytical method を build し た. Carcinoma (2) the digester に お け る ミ ス マ ッ チ repair abnormal on record 検 を use い, 46 cases, 6 cases of esophageal cancer, gastric cancer, 73 cases, 13 cases of の MSI positive を recognize め, digesters carcinomas の 発 raw に ミ ス マ ッ チ repair abnormal の masato and が in stopping さ れ た. Gastric cancer で は な less differentiation carcinoma に intentionally に MSI が く, の 悪 sex degrees と も masato is し て い る と exam え ら れ た. ま た, stomach の normal tissue に お け る マ イ ク ロ サ テ ラ イ ト with long column の さ を each human で compare す る と, CA repeat が long い personal に お い て high い cut close で MSI を す tendency in が recognize め ら れ た. 従 っ て, MSI analytic を は う occasions, appropriate な marker の sentaku と parsing す る set 団 に お け る average な CA rereat の long さ を consider す る necessary が あ る と exam え ら れ た. II. を hepatocellular carcinoma with い た heritage 伝 son treatment based research (1) HSV の の tk を expression vector に scions into し, こ の プ ラ ス ミ ド べ ク タ ー を HMG - 1 (High Mobility Group 1) と combining さ せ, ボ ル テ ッ ク ス method と ultrasound 処 Richard に よ り ポ ソ ー ム に take り 込 ま せ, DNA - リ ポ ソ ー ム complex を form さ せ た. <s:1> れを ultraviolet irradiation of たHVJと reflects 応させHVJ-リポソ ムを ムを gives た. (2) animal liver モ デ ル へ の heritage 伝 son treatment: DNA - リ ポ ソ ー ム complex を, liver cancer cell line HepG2 を subcutaneous injection し て have ら れ た liver モ デ ル の piece side の swollen sores に 100 mu l ず つ Direct injection line を っ た. The next よ り, intra-abdominal に Gancyclovir を injection し, swollen sores の サ イ ズ を 観 examine し た と こ ろ, treatment group of で は swollen sores サ イ ズ の raised large は recognize め な か っ た が, non treatment group で は swollen sores サ イ ズ の raised large を recognize め た. HVJ - リ ポ ソ ー ム は, Qiao り cast and may return し な ベ ク タ ー で あ り, but 伝 treatment の useful な ベ ク タ ー と な る こ と が in stopping さ れ た. Youdaoplaceholder0 デ タ collect に て て て <s:1> the patient himself/herself <s:1> agrees that に obtain て る る る.

项目成果

Maehara Y,et al: "Lymph node metastasis and relation to tumour growth potential and local immune response in advanced gastric cancer." Int J Cancer. 74. 224-228 (1997)

Maehara Y 等人：“晚期胃癌的淋巴结转移及其与肿瘤生长潜力和局部免疫反应的关系。”

Maehara Y,et al: "Scientific basis for the combination of tegafur with uracil." Oncology. 11. 14-21 (1997)

Maehara Y 等人：“替加氟与尿嘧啶组合的科学依据。”

Sugimachi K,et al.: "Dose intensity of uracil and tegafur in postoperative chemotherapy for patients with poorly differentiated gastric cancer." Cancer Chemother Pharmacol. 40. 233-238 (1997)

Sugimachi K,et al.：“低分化胃癌患者术后化疗中尿嘧啶和替加氟的剂量强度。”

Maehara Y,et al: "Surgical treatment and outcome for node-negative gastric cancer." Surgery. 121. 633-639 (1997)

Maehara Y 等人：“淋巴结阴性胃癌的手术治疗和结果。”

Sugimachi K,et al.: "Risk to surgeons:My experience in surgically treating patients with HIV." Surg Today. 27. 1-2 (1997)

Sugimachi K 等人：“外科医生面临的风险：我对 HIV 患者进行手术治疗的经验。”