ヘモグロビンのサブユニットに4量体形成以前から用意されている構造変化の機構

四聚体形成前血红蛋白亚基结构变化的机制

基本信息

  • 批准号:
    09261220
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 1.09万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    1997
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    1997 至 无数据
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

1)前年度に引き続き、脊椎動物の系統樹の分岐点のまわりで、Hb(ヘモグロビン)の立体構造と機能の変化を見るために使うHbとして、硬骨魚類のクロマグロ、軟骨魚類のアカエイとシロザメ、脊椎動物と無脊椎動物の中間的存在である円口類の日本産のカワヤツメウナギ、Hbを持つ無脊椎動物で脊椎動物に最も近い棘皮動物のシロナマコからHbを取り、常時使用できる状態を維持した。一部他の研究室へも提供した。2)アカエイHbのβ鎖、シロザメHbのα鎖とβ鎖のcDNAを発現系に組み込み効率よく発現させることができた。アカエイα鎖のcDNAも発現系に組み込んだがよく働いていない。得られたシロザメβグロビン鎖はヘムを結合させてフォールドさせることができた。また3本のグロビン鎖ともMgプロトポルフィリンを結合させてフォールドさせることができた。3)クロマグロHbは4量体を解裂させα鎖2本とβ鎖3本を得ることができた。精製法をさらに改良中である。これをもとに、魚Hbのルート効果(特別大きなボ-ア効果)の解明に向けた機能研究やクロマグロHbのβ鎖のX線結晶解析を開始した。4)クロマグロHbのα鎖1種とβ鎖1種、ヒトのα鎖とβ鎖、2)で得られたα鎖1種とβ鎖3種を含め、合計α鎖3種とβ鎖5種の間でα鎖とβ鎖の再結合実験を開始した。まだ異種動物間ではヒトとクロマグロの間でしかα鎖とβ鎖の再結合が証明できていない。部分的に4量体が形成されたのを検出する方法を見つける必要がある。5)アカエイHbのCO結合型とdeoxy(配位子非結合)型の結晶のX線結晶解析の論文を投稿準備中。クロマグロHbのCO結合型とdeoxy型の結晶の立体構造を「タンパク質立体構造の構築原理」ワークショップのポスターで発表した。6)ヤツメウナギHbのdeoxy型とCO結合型双方の結晶については、すでに解析データが得られていて解析中である。シロナマコのHbの結晶についてはまだ解析に耐えるデータが得られていない。
1)Previous year's introduction, vertebrate phylogenetic tree divergence point, Hb(Hb) three-dimensional structure and function change, Hb(Hb), teleost fish, cartilage fish, vertebrate and invertebrate intermediate existence, Japanese production, Hb (Hb), teleost fish, cartilaginous fish, vertebrate and invertebrate intermediate existence, vertebrate and invertebrate. Hb is maintained in invertebrate, vertebrate and echinoderm. A part of his research room was provided. 2) β-lock of Hb, α-lock of Hb, β-lock of Hb, α-lock of Hb, α-lock of Hb, β-lock of Hb, α-lock of Hb, α-lock of Hb, α- The cDNA encoding system of the α-lock is composed of two parts. The main reason for this is that we have to pay attention to the quality of the products. The three main reasons for this are: 3) The Hb 4 quantity is resolved by α lock 2 and β lock 3. The Hb 4 quantity is resolved by α lock 2 and β lock 3. The refining method is improved. The X-ray crystal analysis of Hb was started. 4) Hb α lock 1, β lock 1, α lock 2, β lock 3, α lock 3, β lock 5, α lock 3, β lock 5, α lock 3, β lock 3, β lock 3 It is proved that the recombination of α-and β-locks between heterogeneous animals is not easy. Part of the four volume formation and detection methods are necessary. 5) Preparation of a paper on X-ray crystallographic analysis of Hb CO-bound and deoxy(ligand unbound) crystals. The structure of CO binding type and deoxy type of Hb is described in the "Construction Principle of Solid Structure". 6) Both deoxy and CO binding types of Hb are crystallized and analyzed. The structure of Hb is not stable.

项目成果

期刊论文数量(1)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
柴山修哉: "Reexamination of the hyperthermodynamic stability of assymmetric cyanonet valency hybrid hemoglobin,(α^<+CN> β^<+CN>)(αβ)" Biochemistry. 36(15). 4375-4381 (1997)
Shuya Shibayama:“不对称氰基化合价杂合血红蛋白的超热力学稳定性的重新检查,(α^<+CN> β^<+CN>)(αβ)”生物化学 36(15) 4375-4381 (1997)。
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    0
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