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Ca-ATPaseの電子線・X線結晶解析

Ca-ATP 酶的电子束/X 射线晶体分析

基本信息

批准号：
11169205
负责人：
豊島近
金额：
$ 23.62万
依托单位：
The University of Tokyo
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
1999
资助国家：
日本
起止时间：
1999 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

本研究では、筋小胞体カルシウムATPaseの結晶構造解析により、膜蛋白質の結晶中の脂質二重膜の可視化を主な目標とした。これは、カルシウムATPaseの結晶化にあたって脂質を添加しているために脂質二重膜が形成されていることを利用するものである。脂質二重膜は低分解能領域にしか寄与しないので、普通の結晶解析では棄てている。また、重原子置換体による位相情報は、低分解能領域では信頼性が無い。このために、コントラスト変調法が試みられて来た。また.MAD法(多波調異常分散法)の適用も試みられるべきである。この目的のために、現在最も安定して作成できるカルシウムATPaseの結晶である、Mg/F複合体結晶を用い、庶糖と金グルコースによる密度変調を試みた。この結果,庶糖の方が可変できる範囲は広いものの,格子定数の変化も著しいことがわかった。金グルコースの場合,最大濃度は15%程度であったが,金による異常分散効果を利用できるため,コントラスト変調を用いる必要はない。また、格子定数の変化も無視できる程度であることがわかった。そこで,最大濃度の金グルコースを用いて,SPring-8でMADデータの収集を行った。その結果は現在解析中であるが、統計的には十分な信号が得られた。MADデータから位相を決定することは、重原子位置が離散的でないため無理であるが、蛋白質部分からの位相を改良することは十分可能であろうと考えられる。この部分の方法論はまだ確立していないので、今後の課題としたい。

The purpose of this study is to analyze the characteristics of lipid double membranes in the crystals of small cell bodies, small cells, and membrane proteins. The purpose of this study is to analyze the properties of lipid double membranes. The structure of the double membrane was formed by the crystallization of the double membrane of the ATPase. The low decomposition energy of aliphatic double membrane is widely used in the field of low decomposition energy, and the results are analyzed by ordinary analysis. The heavy atoms and heavy atoms are in love with each other, and the low decomposition energy domain is reliable. I'm sorry, I'm sorry. The Mad method (multi-wave constant dispersion method) is widely used in this paper. The purpose of this study is to determine whether the most stable compound can be used as an ATPase crystal, a Mg/F complex crystal, a common sugar alloy, and a density test. According to the results, the general sugar prescription can be used in a wide range of conditions, and the grid is fixed. The maximum temperature is 15%, the maximum temperature is 15%. The number of people in the grid is very high, and the degree of non-monitoring is very high. This is not true, the maximum temperature is different, the SPring-8 is MAD, and the set is the row. The results show that in the analysis, the ten-point error signal of the statistics is very bad. It is very possible that the phase of the MAD may be improved by the phase change of the heavy atom, the scattered position of the heavy atom, and the phase of the protein. In part of the discussion, we will make sure that we will have a problem in the future.