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自然免疫機構解明に役立つ天然分子プローブの探索

寻找有助于阐明先天免疫机制的天然分子探针

基本信息

批准号：
13024208
负责人：
大島吉輝
金额：
$ 2.3万
依托单位：
Tohoku University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2001
资助国家：
日本
起止时间：
2001 至 2002
项目状态：
已结题

项目摘要

生体防御遺伝子の転写制御領域にレポーター遺伝子をつないだ遺伝子を導入したショウジョウバエの幼虫を用いて,β-galactosidaseの産生を間接定量することにより自然免疫制御物質をスクリーニングする実験系を構築した。しかしながら,本スクリーニングでは,自然免疫に特異的に作用する物質に加えて,細胞毒性あるいは転写や翻訳阻害作用を有する物質も探索されることがわかった。そこで,自然免疫以外の作用機構によってβ-galactosidaseの産生を制御する物質を排除するために,(1)培養昆虫細胞を用いたスクリーニング(細胞毒性),(2)熱刺激によってβ-galactosidaseの産生が誘導される外来遺伝子を導入したショウジョウバエを用いたスクリーニング(転写・翻訳阻害作用)を確立した。次いで,これらのスクリーニングを用いて自然免疫抑制物質の探索を行った。すなわち,159種の放線菌・糸状菌を培養して,その抽出物についてスクリーニングを行った。その結果,6種培養微生物抽出物が自然免疫に対して特異的に抑制作用を有すると判断した。さらに,6種のなかの1種である糸状菌を大量培養して得た抽出物を,スクリーニングを併用して活性成分を精製したところ,TP-1と仮称した成分が活性物質として単離された。TP-1は,自然免疫活性を濃度依存的に抑制する一方,細胞生存率,転写・翻訳活性に対しては全く影響を及ぼさなかった。

Bio-defence legacy 伝子の転WRITING CONTROL FIELDS にレポーター legacy 伝子をつないだ legacy 伝子を Import したショウジョウバエのlarvae を用いて,β- The production of galactosidase is indirectly quantified and the natural immune control substance is constructed.しかしながら,本スクリーニングでは,natural immunity にspecific にeffect するsubstance に加えて, Cytotoxicity あるいは転WRITE や訳 hindering effect を有するsubstance もExploration されることがわかった.そこで, によってβ-galactosidase のproduction をcontrol するsubstance をexclude するために, (1) culturing insect cells をいたスクリーニング (cytotoxicity), (2) Thermal stimulation can induce the production of β-galactosidase and induce the production of β-galactosidase. The introduction of したショウジョウバエを is established with いたスクリーニング (転WRITING・TRANSANDIN HIDDEN FUNCTION) を. The next step is to use natural immunosuppressive substances to explore and explore.すなわち, 159 kinds of actinomycetes and rice-shaped bacteria cultured, その extracts についてスクリーニングを行った. As a result, the natural immunity and specific inhibitory effects of the six kinds of cultured microbial extracts were determined.さらに, 6 kinds of のなかの 1 kind of である縸-shaped bacteria して got the extract を obtained by mass culture, スクリーニングをRefined with active ingredients, TP-1 is made of active ingredients and active ingredients. TP-1 has a concentration-dependent inhibition of natural immune activity, cell viability, and a complete influence on cell viability and translation activity.