染色体複製のライセンス化と細胞周期制御の解明―CDT1を中心に―

染色体复制的许可和细胞周期控制的阐明 - 聚焦 CDT1 -

基本信息

  • 批准号:
    14033234
  • 负责人:
  • 金额:
    $ 3.07万
  • 依托单位:
  • 依托单位国家:
    日本
  • 项目类别:
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 财政年份:
    2002
  • 资助国家:
    日本
  • 起止时间:
    2002 至 2003
  • 项目状态:
    已结题

项目摘要

細胞周期において、染色体の複製が正確に一回のみ行われることにより遺伝情報が維持される。我々は、複製のライセンス化に関わる因子Cdt1に焦点を当てその制御機構の研究を行ってきた。(1)Cdt1のドメイン解析Cdt1をN末、C末から削った変異体を作製し、Gemininや各種CDK-Cyclinの結合、核移行シグナルの存在領域の決定を行った。その結果、(a)GemininはCdt1の中程に結合する。(b)Cdt1は、CyclinAとは結合するが、CyclinBおよびCyclinEとは結合しない。CyclinAは、N末領域と結合する。(c)N末に核移行シグナルが存在する。ことを明らかにした。(2)Cdt1の分解制御と高発現の効果Cdt1のN末(1-189)・C末(160-end)を発現する細胞株を作製し、S期でのタンパク質の安定性を調べることにより、N末が分解に関与することを明らかにした。安定なC末を293T細胞に高発現すると、4C以上のDNA含量をもつ細胞が高頻度で出現した。従って、Cdt1の高発現が、再複製をもたらすことが示唆された。また、Cdt1がGeminin非依存的に分解されることをより明確にするため、siRNAによりGemininをサイレンス化した状態でも、ユビキチン-プロテアソーム系で分解されることを証明した。(3)cdtl結合因子の検索2ハイブリッド法により、Geminin,MCM6に加え4つの因子を同定した。また、Flag-Cdtlを安定に発現している細胞を作製し、Flag-Cdtlタンパク質を免疫沈降して、共沈する物を調べた。Gemininと思われる30kdaの主バンドに加え、20 35 45 47kdaのバンドが優位に検出された。これらのタンパク質のアミノ酸配列の決定を行っている。
The cell cycle and chromosomal DNA replication are correct in one cycle. We do not want to change the focus of the Cdt1 factor when the system is used to study the system. (1) Cdt1 analysis of the end of Cdt1, the end of C, the combination of all kinds of CDK-Cyclin, the existence of the field of nuclear transfer, and the decision of operation. The results of the test, (a) the combination of Geminin and Cdt1 medium range results. (B) the combination of Cdt1, CyclinA, CyclinB, CyclinE, and so on. The combination of CyclinA and N-terminal domain information. (C) the presence of N terminal nuclear transfer cells. I don't know what's going on. (2) Cdt1 decomposition to control the growth of Cdt1 cells at the end of N (1-189C) C (160-end), the cell lines were isolated in S phase, the stability was increased, the decomposition of N was detected and the results were clear. At the end of diazepam, the cell temperature of 293T was higher than that of diazepam, the content of DNA above 4C was higher than that of diazepam. Please tell me, Cdt1, and then copy the message to show that you are instigated. Decomposition, Cdt1 and Geminin-independent decomposition makes clear that it is not dependent on siRNA, and that it is clear that it is clear that it is not dependent on siRNA. (3) cdtl combined with factor 2 and Geminin,MCM6 plus factor 4 were identical to each other. Flag-Cdtl, diazepam, diazepam, diazep Geminin thought that the 30kda master would like to add your account, 20 35 45 47kda please send the message out of the box. I don't know. I don't know. I don't know what to do.

项目成果

期刊论文数量(18)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
Nishijima H. et al.: "Caffeine mimics adenine and 2'-deoxyadenosine, both of which inhibit the guanine-nucleotide exchange activity of RCC1 and the kinase activity of ATR."Genes Cells.. 8. 423-435 (2003)
Nishijima H. 等人:“咖啡因模拟腺嘌呤和 2-脱氧腺苷,两者都会抑制 RCC1 的鸟嘌呤核苷酸交换活性和 ATR 的激酶活性。”Genes Cells.. 8. 423-435 (2003)
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Seino H. et al.: "Two ubiquitin-conjugating enzymes, UbcP1/Ubc4 and UbcP4/Ubc11, have distinct functions for ubiquitination of mitotic cyclin"Mol Cell Biol. 23. 3497-3505 (2003)
Seino H. 等人:“两种泛素结合酶,UbcP1/Ubc4 和 UbcP4/Ubc11,对有丝分裂周期蛋白泛素化具有不同的功能”Mol Cell Biol。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Niahitani H, Z.Lygerou: "Control of DNA replication licensing in a cell cycle"Genes to Cells. 7. 523-534 (2002)
Niahitani H,Z.Lygerou:“细胞周期中 DNA 复制许可的控制”基因到细胞。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Nishitani H. et al.: "DNA Replication Licensing"Frontier Bioscience. (In press).
Nishitani H.等人:“DNA复制许可”Frontier Bioscience。
  • DOI:
  • 发表时间:
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
  • 通讯作者:
Umeda M. et al.: "A novel nuclear protein, Twa1, and Muskelin comprise a complex with RanBPM."Gene. 303. 47-54 (2003)
Umeda M. 等人:“一种新型核蛋白 Twa1 和 Muskelin 与 RanBPM 形成复合物。”基因。
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  • 发表时间:
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    0
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  • 作者:
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  • 通讯作者:
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  • 发表时间:
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  • 影响因子:
    0
  • 作者:
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  • 发表时间:
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  • 期刊:
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    0
  • 作者:
    高原 教代;田中 美如;貫名 康平;林 晃世;酒井 恒;菅澤 薫;塩見 泰史;西谷 秀男
  • 通讯作者:
    西谷 秀男
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  • DOI:
  • 发表时间:
    2017
  • 期刊:
  • 影响因子:
    0
  • 作者:
    塩見 泰史;夏目 豊彰;鐘巻 将人;西谷 秀男
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知道了