DNA複製と連係したタンパク質分解機構の解明(p21Cip1を中心に)

阐明与 DNA 复制相关的蛋白质降解机制（重点关注 p21Cip1）

• 批准号: 19044031
• 负责人: 西谷 秀男
• 金额: $ 3.9万
• 依托单位: University of Hyogo
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2007
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2007 至 2008
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-19044031/
• 关键词: 細胞周期; 分解; 複製

我々は、染色体の複製に必須なPCNAが、新たな機能として、Cu14-DDB1を含むユビキチンリガーゼとともに、Cdt1の分解に関わることを明らかにした。この分解系は、S期のみ機能する。また、UVなどのDNA損傷を受けたときにも機能する。PIP-ボックスを持つPCNA結合蛋白質は数多く知られている中で, 新規にCDKインヒビターp21がPCNA依存的に分解されることを明らかにした。これまで、SCF-Skp2系がp21の分解に関わることが報告されていたが、Skp2をサイレンシングしても影響はなかった。PCNA、Cu14, Cdt2をサイレンシングあるいは、p21のPIP-ボックスに変異を入れるとp21は、S期およびUV照射後、安定化した。Cu14やDDB1がp21と結合した。in vitroでp21がCu14-DDB1-Cdt2によりユビキチン化されることを証明するため、昆虫細胞にてこれらの因子を発現し精製した。精製複合体を、PCNAやDNA存在下でp21を基質としてユビキチン化反応を行なったところ、ユビキチン化産物と予想される高分子量産物が検出された。HeLa細胞でのp21タンパク質量を細胞周期を追って調べると、S期に減少し、G2期頃から増加し始めた。これらの結果、S期の開始後、PCNAがクロマチンに結合すると、Cdt1に加えてCDKインヒビターp21もCu14-DDB1-Cdt2系により分解されるといえる。従って、PCNAは、細胞周期においてG1期の終了とS期の開始を結びつける重要な働きをしていると結論した。

I want to make sure that you have the ability to copy chromosomes, PCNA, Cu14-DDB1, and Cdt1. This decomposition system is the function of S phase. The DNA damage caused by UV radiation was not detected. PIP-1 is a PCNA-binding protein that binds to a large number of PCNA-dependent proteins. The SCF-Skp2 system is reported to be related to the separation of p21. PCNA, Cu14, Cdt2, P21, P22, P23, P24, P25, P26, P27, P28, P29, P29, P29, Cu14 DDB 1 p21 In vitro, p21-Cu14-DDB1-Cdt2 was found in insect cells. In the presence of purified complex DNA and PCNA, high molecular weight products were detected. HeLa cell p21 protein quality is regulated, S phase decreases, G2 phase increases. As a result, after the start of S phase, PCNA is decomposed into CDK, CDB1 and CDT2. The end of the G1 phase and the beginning of the S phase of the cell cycle are important.

项目成果

Geminin Cleavage during Apoptosis by Caspase-3 Alters Its Binding Ability to the SWI/SNF Subunit Brahma*

• DOI: 10.1074/jbc.m611643200
• 发表时间: 2007-03
• 期刊: Journal of Biological Chemistry
• 影响因子: 4.8
• 作者: Vassilis Roukos;M. Iliou;H. Nishitani;M. Gentzel;M. Wilm;S. Taraviras;Z. Lygerou

ヒトユビキチンリガーゼCu14-DDB1-Cdt2によるPCNA依存的Cdt1認識機構の解析

人泛素连接酶 Cu14-DDB1-Cdt2 分析 PCNA 依赖性 Cdt1 识别机制

• 发表时间: 2008
• 作者: 道下雅人;他
• 通讯作者: 他

ライセンス化因子Cdt1の分解機構と染色体複製の制御

许可因子Cdt1的降解机制与染色体复制的控制

• 发表时间: 2007
• 作者: 西谷 秀男;他
• 通讯作者: 他

CDK inhibitor p21 is degraded by a PCNA coupled Cu14-DDB1 Cdt2 pathway during S phase and after UV irradiation.

CDK 抑制剂 p21 在 S 期和紫外线照射后被 PCNA 偶联的 Cu14-DDB1 Cdt2 途径降解。

• 发表时间: 2008
• 期刊: J Biol Chem 283
• 作者: Nishitani H.;et.al.
• 通讯作者: et.al.

Cdtl associates dynamically with chromatin throughout Gl and recruits Geminin onto chromatin

Cdtl 在整个 Gl 中与染色质动态结合，并将 Geminin 募集到染色质上

• 发表时间: 2007
• 期刊: EMBO J 26
• 作者: Xouri G;Squire A;Dimaki M;Geverts B;Verveer PJ;Taraviras S;Nishitani H;Houtsmuller AB;Bastiaens PI;Lygerou Z.;Georgia Xouri
• 通讯作者: Georgia Xouri