染色体複製開始因子の制御機構から捉えた細胞増殖とがん化の研究

从染色体复制起始因子控制机制研究细胞增殖与癌症发生

• 批准号: 15024251
• 负责人: 西谷 秀男
• 金额: $ 2.5万
• 依托单位: Kyushu University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2003
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2003 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-15024251/
• 关键词: 複製; ライセンス化; がん; Cdt1; ユビキチンープロテアソーム系; 染色体

染色体複製を開始し、複製を細胞周期に一度のみに限定する制御機構は、細胞増殖と遺伝情報の維持のために必須の制御機構である。我々はこれらの機構をあきらかにするため、複製のライセンス化因子Cdt1を中心に研究を行ってきた。(1)Cdt1の分解制御Cdt1のS期における分解は、ユビキチン-プロテアソーム系により行われることを示してきた。Cdt1のN末およびC末を安定に発現する細胞を作製し、N末が分解に関与しており、さらに藤田博士(国立ガンセンター)との共同研究により、N末に存在するCyclinA結合部位を通して、Cdt1がリン酸化されてユビキチン化に関わるSkp2が結合することを明らかにした。また、DNA傷害を起こすUVを細胞に照射すると、Cdt1が素早く分解されることを見いだした。同じくライセンス化因子であるCdc6もかなり分解されたが、Orc1,MCM3は安定だった。この分解にも、Cdt1のN末が関与しており、ユビキチン-プロテアソーム系により分解されることを明らかにした。(2)過剰複製の誘導分解に関わるN末を除いたCdt1は、S期で安定に存在し、293T細胞に高発現させると、4C以上のDNA量を持つ細胞が高頻度で出現し、再複製が誘導されたと予想された。(3)Cdt1結合因子の検索Flag-Cdt1を発現する細胞を作製し、Flag抗体免疫沈降によりCdt1と共沈するものの検索を行い、30kdaのGemininの他、35,45,47kDaのタンパク質を見つけた。(4)がん組織でのCdt1の発現複製開始に必須なCdt1は、がん組織での発現が上昇していると考えられる。三菱生命研・宋博士との共同研究により、がん化の進行と共に、Cdt1の発現量が上昇していることを明らかにした。

Control mechanisms for the initiation of chromosome replication, the regulation of cell cycle replication, and the maintenance of genetic information are essential. I want you to know that I'm not going to be able to do this. (1) Cdt1 decomposition control Cdt1 S phase decomposition, conversion, conversion Cdt1 N-terminal and C-terminal stable development of cell regulation, N-terminal decomposition related to the development of Cdt1 N-terminal and Cdt1 N-terminal stable development related to the development of Cdt1 N-terminal. DNA damage is caused by UV irradiation, and Cdt1 protein is decomposed early. The same as the Cdc6 decomposition factor, Orc1,MCM3 decomposition factor. This is the first time I've ever seen a woman who's been in a relationship with someone else. (2)The induction of replication and decomposition is related to the presence of Cdt1, Cdt2, Cdt3, Cdt4, Cdt3, Cdt3, Cdt4, Cdt (3) Cdt1 binding factor detection Flag-Cdt1 expression in cells, Flag antibody immunoprecipitation detection of Cdt1 and co-precipitation, 30 kDa Geminin and other 35,45,47kDa proteins. (4)The occurrence of Cdt1 in a tissue must be increased to begin replication. Mitsubishi Life Research Institute Dr. Song's joint research, the development of a common, Cdt1 discovery increased

项目成果

Seino H. et al.: "Two ubiquitin-conjugating enzymes, UbcP1/Ubc4 and UbcP4/Ubc11, have distinct functions for ubiquitination of mitotic cyclin"Mol Cell Biol. 23. 3497-3505 (2003)

Seino H. 等人：“两种泛素结合酶，UbcP1/Ubc4 和 UbcP4/Ubc11，对有丝分裂周期蛋白泛素化具有不同的功能”Mol Cell Biol。

Nishijima H. et al.: "Caffeine mimics adenine and 2'-deoxyadenosine, both of which inhibit the guanine-nucleotide exchange activity of RCC1 and the kinase activity of ATR."Genes Cells.. 8. 423-435 (2003)

Nishijima H. 等人：“咖啡因模拟腺嘌呤和 2-脱氧腺苷，两者都会抑制 RCC1 的鸟嘌呤核苷酸交换活性和 ATR 的激酶活性。”Genes Cells.. 8. 423-435 (2003)

Takahashi T. et al.: "ORC-binding sites are required for efficient MCM loading and origin firing in fission yeast"EMBO J.. 22. 964-974 (2003)

Takahashi T. 等人：“裂殖酵母中有效的 MCM 加载和起始激发需要 ORC 结合位点”EMBO J.. 22. 964-974 (2003)

Nishitani H. et al.: "DNA Replication Licensing"Frontier Bioscience. (In press).

Nishitani H.等人：“DNA复制许可”Frontier Bioscience。

Umeda M. et al.: "A novel nuclear protein, Twa1, and Muskelin comprise a complex with RanBPM."Gene. 303. 47-54 (2003)

Umeda M. 等人：“一种新型核蛋白 Twa1 和 Muskelin 与 RanBPM 形成复合物。”基因。