アミロイド線維形成の分子機構

淀粉样原纤维形成的分子机制

• 批准号: 14037222
• 负责人: 内木 宏延
• 金额: $ 1.86万
• 依托单位: 福井医科大学
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14037222/
• 关键词: アミロイド; アルツハイマー病; ベータアミロイド線維; 透析アミロイド症; ベータ2ミクログロブリン; 立体構造変化; 試験管内形成・分解; アミロイド共存分子

1.アミロイド線維形成・分解反応を説明する統一モデルの構築:アミロイド線維形成の重合核依存性重合モデルの全貌を解明するため、(1>従来酸性溶液中でしか行えなかった、β2ミクログロブリン(β2-m)から、透析アミロイド線維を形成する系について検討し、ある種のアルコールによりβ2-mの立体構造を変化させることで、中性pHでも重合核依存性に線維を伸長させる系を確立した。また、この線維伸長反応は、生体のグリコサミノグリカンにより増強されることを示した。(2)アルツハイマー病βアミロイド線維伸長・脱重合反応を高感度に解析するため、表面プラズマ共鳴法を用いた測定系を開発し、伸長過程のみならず、脱重合過程も一次反応速度論形式に従うことを示した。また、この方法により、反応平衡定数を求めることが初めて可能になり、動力学的解析の方法としても有用である。2.アミロイド線維形成及び分解に伴う前駆蛋白質のコンフォメーション変化の解析:酸性溶液中でβ2-mがアミロイド線維を形成する過程の構造変化を系統的に検討した。NMRを用いた重水素交換実験等により、β2-mのN, C末端領域以外の殆ど全ての残基が、立体構造を変え、強固なβシート構造を形成し、線維を形成しいることを示した。また、前駆蛋白質β2-mの分子内SS結合が、アミロイド原性の構造を保持するために重要であることを示した。3.アポE等のアミロイド共存分子、及び沈着組織の様々なマトリックス分子が線維形成に及ぼす影響の解析;表面プラズマ共鳴法による測定系を用いて、βアミロイド線維並びにβアミロイド蛋白質と、アポEやアルブミン等の生体分子の相互作用を定量的に解析する方法を開発した。また、複数の生体分子が共存するシステムにおいて、どの分子が線維形成に対し、促進的あるいは抑制的に作用するのかを、定量的に比較することが可能であることを示した。

1. ア ミ ロ イ ド line d formation, decompose the 応 を illustrate す る unified モ デ ル の constructs: ア ミ ロ イ ド form の overlap d nuclear dependency overlap モ デ ル の whole を interpret す る た め, (1 > 従 to acid で し か line え な か っ た, beta 2 ミ ク ロ グ ロ ブ リ ン (beta 2 - m) か ら, dialysis ア ミ ロ イ ド form す d を る department に つ い て Beg し, 検 あ る kind の ア ル コ ー ル に よ り beta 2 - m の three-dimensional structure を variations change さ せ る こ と で, neutral pH で も overlap nuclear dependency に line d を elongation さ せ を る department establish し た. Youdaoplaceholder0, <s:1> the elongation of the <s:1> linear dimension is 応 応, and the enhancement of the <s:1> グリコサ of the living body is グリコサ, ノグリカ, <s:1>, によ, される and とを. (2) ア ル ツ ハ イ マ ー disease beta ア ミ ロ イ ド wire d elongation, overlap reverse 応 を Gao Gan degrees に parsing す る た め, surface プ ラ ズ を マ resonance method with い た determination started を 発 し, elongation process の み な ら も ず, superposition process forms a reverse 応 speed theory に 従 う こ と を shown し た. ま た, こ の way に よ り 応 equilibrium constant and anti を o め る こ と が early め て may に な り, dynamics methods と の し て も useful で あ る. 2. ア ミ ロ イ ド line d before the formation and decomposition of び に with う 駆 protein の コ ン フ ォ メ ー シ ョ ン variations change の resolution: in acidic solution で beta 2 - m が ア ミ ロ イ ド form す d を る process の structure - を system に beg し 検 た. NMR を with い た heavy water element exchange be 験 etc に よ り, beta 2 - m の N, C terminal areas outside の perilous ど full て の residues が, three-dimensional structure を - え, strong な beta シ ー を ト structure formation し, line d を し い る こ と を shown し た. ま た, former 駆 protein beta 2 - m の intramolecular SS が, ア ミ ロ イ ド を keep original sex の structure す る た め に important で あ る こ と を shown し た. 3. ア ポ e. の ア ミ ロ イ ド coexistence molecules, and び shen the organization の others 々 な マ ト リ ッ ク ス molecular が に line d formation and ぼ す effect の resolution; Surface プ ラ ズ マ resonance method に よ る department を measure い て, beta ア ミ ロ イ ド line d and び に beta ア ミ ロ イ ド protein と, ア ポ E や ア ル ブ ミ ン の raw body such as molecular の interaction を quantitative analytical す に る method を open 発 し た. ま た, plural の raw molecular が coexistence す る シ ス テ ム に お い て, ど の molecular が line d form に し seaborne, promote あ る い は inhibitory effect of the に す る の か を, quantitative に compare す る こ と が may で あ る こ と を shown し た.

项目成果

Yamamoto, A., et al.: "Iron (III) induces aggregation of hyperphosphorylated tau and its reduction to iron (II) reverses the aggregation : implications in the formation of neurofibrillary tangles of Alzheimer's disease"J. Neurochem.. 82(5). 1137-1147 (200

Yamamoto, A. 等人：“铁 (III) 诱导过度磷酸化 tau 蛋白聚集，铁 (II) 还原可逆转聚集：对阿尔茨海默病神经原纤维缠结形成的影响”J.

Katou, H., et al.: "The role of disulfide bond in the amyloidogenic state of β2-microglobulin stidied by heteronuclear NMR"Protein Sci.. 11(9). 2218-2229 (2002)

Katou, H.等人：“通过异核NMR研究二硫键在β2-微球蛋白的淀粉样蛋白形成状态中的作用”Protein Sci.. 11(9) (2002)。

Ono, K., et al.: "Nordihydroguaiaretic acid potently breaks down pre-formed Alzheimer's β-amyloid fibrils in vitro"J. Neurochem.. 81(3). 434-440 (2002)

Ono, K. 等人：“去甲二氢愈创木酸在体外有效分解预先形成的阿尔茨海默病 β-淀粉样原纤维”J. Neurochem.. 81(3) (2002)。

Martsev, S.P., et al.: "Amyloidfibril formation of the mouse VL domain at acidic pH"Biochemistry. 41(10). 3389-3395 (2002)

Martsev, S.P. 等人：“酸性 pH 条件下小鼠 VL 结构域的淀粉样原纤维形成”生物化学。

Hasegawa, K., et al.: "Kinetic modeling and determination of reaction constants of Alzheimer's β-amyloid fibril extension and dissociation using surface plasmon resonance"Biochemistry. 41(46). 13489-13498 (2002)

Hasekawa，K.等人：“使用表面等离振子共振对阿尔茨海默病β-淀粉样原纤维延伸和解离的反应常数进行动力学建模和测定”生物化学41(46)(2002)。