環境ホルモン固定化高性能ビーズを用いて同定した生体側レセプターの機能解析
使用内分泌干扰物固定的高性能微珠鉴定生物受体的功能分析
基本信息
- 批准号:14042211
- 负责人:
- 金额:$ 2.69万
- 依托单位:
- 依托单位国家:日本
- 项目类别:Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
- 财政年份:2002
- 资助国家:日本
- 起止时间:2002 至 2003
- 项目状态:已结题
- 来源:
- 关键词:
项目摘要
高性能ビーズのラテックス微粒子の表面に、内分泌攪乱物質(Endocrine Disruptors : EDs)に含まれるフタル酸エステル、アルキルフェノール、アトラジンを共有結合を介して固定化し、細胞(子宮頸癌細胞由来HeLa細胞およびヒト乳がん細胞由来MCF7細胞)の粗抽出液からこれらのEDsに特異的に結合する生体側レセプター分子(タンパク質)の精製を試みた。また、精製条件を検討することにより、EDsとそれぞれの結合タンパク質の間の親和性が異なることがわかった。その後、フタル酸エステルとノニルフェノールに高親和性を有するタンパク質を大量に精製し、質量分析計を用いた解析によって部分アミノ酸配列を決定することに成功した。次いで、これらのタンパク質で興味深いものを選択し、対応するcDNAをRT-PCR法により単離し、大腸菌発現ベクターに組み込み、組換えタンパク質の調整を行った。一方、ノニルフェノールに選択的に結合する複数のタンパク質の内の一つは既知タンパク質であり、特異抗体を容易に入手することができた。その特異抗体を用いたウエスタンブロット法により、ノニルフェロールとの結合の親和性に関する解析を行った。さらに、抗エストロゲン受容体抗体を併用しMCF7細胞の粗抽出液で検討したところ、ノニルフェノール固定化高性能ビーズ精製画分にエストロゲン受容体に加え今回新たに同定したタンパク質が同時に検出されることがわかった。以上の結果より、ノニルフェノールの場合は、新たに同定した選択的結合タンパク質がエストロゲン受容体と同時に、あるいは同程度のアフィニティーでノニルフェノールに結合することが示された。このことは、現時点でEDsの生体に及ぼす影響のメカニズムに関する明確な結論が得られていない状況で、EDsのエストロゲン受容体とは異なる新たな生体側受容体の存在を物質レベルで証明できたことで非常に意義深いと考えられる。また、本研究成果は、生体内に未解明のEDs依存的反応が存在することを示唆しており、今後EDsに関する研究に新たな視点を与え、その分子レベルでの解析に貢献するものと考えられる。
High Performance Microparticles Surface and Endocrine Disrupting Substances (Endocrine Disruptors : EDs) contain common binding agents for the immobilization of cells (cervical cancer cell-derived HeLa cell-derived breast cell-derived MCF7 cells) and purification of cell-specific binding agents for EDs. The affinity between the two substances is different. The quality of the product was determined by mass spectrometry. In the second place, the quality of the product is very interesting, and the quality of the product is adjusted by RT-PCR. One side, the other side, the other side The affinity analysis of the binding of the specific antibodies was performed using the method. In addition, anti-receptor antibodies were used in the crude extract of MCF7 cells. The immobilized high-performance protein was purified and purified. The above results are consistent with the selection of the appropriate combination of materials. The existence of a new receptor on the biological side of EDs is proved to be very significant. The results of this study demonstrate the existence of unexplained EDs in vivo and contribute to the analysis of future EDs.
项目成果
期刊论文数量(22)
专著数量(0)
科研奖励数量(0)
会议论文数量(0)
专利数量(0)
T.Narita, et al.: "Human transcription elongation factor NELF : identification of novel subunits and reconstitution of the functionally active complex"Mol.Cell.Biol.. 23. 1863-1873 (2003)
T.Narita 等:“人类转录延伸因子 NELF:新亚基的鉴定和功能活性复合物的重建”Mol.Cell.Biol.. 23. 1863-1873 (2003)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
K.Kataoka et al.: "Maf and Jun nuclear oncoproteins share downstream target genes for inducing cell transformation."J. Biol. Chem.. 276. 36849-36856 (2001)
K.Kataoka 等人:“Maf 和 Jun 核癌蛋白共享诱导细胞转化的下游靶基因。”J.
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
K.Kataoka et al.: "MafA is a glucose-regulated and pancreatic beta-cell-specific transcriptional activator for the insulin gene"J.Biol.Chem.. 277. 49903-49910 (2002)
K.Kataoka 等人:“MafA 是胰岛素基因的葡萄糖调节和胰腺 β 细胞特异性转录激活剂”J.Biol.Chem.. 277. 49903-49910 (2002)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
K.Kataoka et al.: "Induction of cellular anti-oxidative stress genes through heterodimeric transcription factor Nrf2/Small Maf by ant-irheumatic gold(I) compounds"J.Biol.Chem.. 276. 34074-34081 (2001)
K.Kataoka 等人:“抗风湿金 (I) 化合物通过异二聚体转录因子 Nrf2/Small Maf 诱导细胞抗氧化应激基因”J.Biol.Chem.. 276. 34074-34081 (2001)
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
M.Endoh, et al.: "Human Spt6 Stimulates transcription elongation by RNA polymerase II in vitro"Mol.Cell.Biol.. (in press).
M.Endoh 等人:“人 Spt6 在体外通过 RNA 聚合酶 II 刺激转录延伸”Mol.Cell.Biol..(出版中)。
- DOI:
- 发表时间:
- 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
- 通讯作者:
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ journalArticles.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ monograph.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ sciAawards.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ conferencePapers.updateTime }}
{{ item.title }}
- 作者:
{{ item.author }}
数据更新时间:{{ patent.updateTime }}
和田 忠士其他文献
TECHNIQUE POUR LE CLIVAGE D'UNE PARTIE D'UNE CHAÎNE poly(A) ET/OU D'UNE SÉQUENCE 3'-TERMINALE D'UN ARNm POUR INHIBER UNE RÉACTION DE TRADUCTION
技术 POUR LE CLIVAGE DUNE PARTIE DUNE CHAÎNE Poly(A) ET/OU DUNE SÉQUENCE 3-TERMINALE DUN ARNm POUR INHIBER UNE RÉACTION DE TRADUCTION
- DOI:
- 发表时间:
2012 - 期刊:
- 影响因子:0
- 作者:
Tadashi Wada;和田 忠士;Kei Takeda;竹田 圭;Hiroshi Handa;半田 宏 - 通讯作者:
半田 宏
和田 忠士的其他文献
{{
item.title }}
{{ item.translation_title }}
- DOI:
{{ item.doi }} - 发表时间:
{{ item.publish_year }} - 期刊:
- 影响因子:{{ item.factor }}
- 作者:
{{ item.authors }} - 通讯作者:
{{ item.author }}
{{ truncateString('和田 忠士', 18)}}的其他基金
遺伝情報発現を転写伸長段階で制御するDECODE複合体の機能・構造解析
在转录延伸阶段控制遗传信息表达的DECODE复合物的功能和结构分析
- 批准号:
17054014 - 财政年份:2005
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Cdk9-サイクリンT複合体による発生・分化制御機構の解析
Cdk9-cyclin T复合物发育和分化控制机制分析
- 批准号:
16026213 - 财政年份:2004
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
Tatタンパク質と複合体を形成する宿主転写因子DSIFを標的としたHIV制御
HIV 调控针对与 Tat 蛋白形成复合物的宿主转录因子 DSIF
- 批准号:
13015207 - 财政年份:2001
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
ヒトSpt4&Spt5複合体による転写制御機構
人类Spt4&Spt5复合物的转录控制机制
- 批准号:
10780381 - 财政年份:1998
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Encouragement of Young Scientists (A)
相似海外基金
Correction of endocrine disruptor-induced transgenerational epimutations by CRISPR-dCas9
通过 CRISPR-dCas9 纠正内分泌干扰物诱导的跨代表突变
- 批准号:
9894194 - 财政年份:2019
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Production of Daphnia for endocrine disruptor sensing
用于内分泌干扰物传感的水蚤生产
- 批准号:
17H01880 - 财政年份:2017
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
Developmental consequences of prenatal exposure to endocrine disruptor chemicals - An investigation of epigenetic mechanisms in the Duisburg Birth Cohort Study
产前接触内分泌干扰物化学物质的发育后果 - 杜伊斯堡出生队列研究中表观遗传机制的调查
- 批准号:
353803853 - 财政年份:2017
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Research Grants
Removal of Endocrine Disruptor Bisphenol A from Water
从水中去除内分泌干扰物双酚 A
- 批准号:
1942255 - 财政年份:2017
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Studentship
A Longitudinal Study of Endocrine Disruptor Mixtures and Reproductive Aging
内分泌干扰物混合物与生殖衰老的纵向研究
- 批准号:
9731469 - 财政年份:2016
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
A Longitudinal Study of Endocrine Disruptor Mixtures and Reproductive Aging
内分泌干扰物混合物与生殖衰老的纵向研究
- 批准号:
10088443 - 财政年份:2016
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
A Longitudinal Study of Endocrine Disruptor Mixtures and Reproductive Aging
内分泌干扰物混合物与生殖衰老的纵向研究
- 批准号:
9321364 - 财政年份:2016
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Exploration of Cadmium as an Endocrine Disruptor in Prostate Cancer Disparities
镉作为内分泌干扰物在前列腺癌差异中的探索
- 批准号:
8875692 - 财政年份:2014
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
Effects of endocrine disruptor mixtures on testicular function
内分泌干扰物混合物对睾丸功能的影响
- 批准号:
464335-2014 - 财政年份:2014
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别:
University Undergraduate Student Research Awards
Exploration of Cadmium as an Endocrine Disruptor in Prostate Cancer Disparities
镉作为内分泌干扰物在前列腺癌差异中的探索
- 批准号:
8754792 - 财政年份:2014
- 资助金额:
$ 2.69万 - 项目类别: