Tatタンパク質と複合体を形成する宿主転写因子DSIFを標的としたHIV制御

HIV 调控针对与 Tat 蛋白形成复合物的宿主转录因子 DSIF

• 批准号: 13015207
• 负责人: 和田 忠士
• 金额: $ 1.41万
• 依托单位: Tokyo Institute of Technology
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas (A)
• 财政年份: 2001
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2001 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-13015207/
• 关键词: 転写; 転写伸長反応; 複合体; エイズ; 変異体; クロマチン; Tat; DSIF

HIV-1(エイズウイルス)がコードするTatタンパク質は、HIV複製に必要なゲノムLTRからTAR(trans-acting response element)のステムループ構造に依存して転写を活性化する。TAR上でTat蛋白質と宿主因子(Tat-SF1、P-TEFb、DSIF、TFIIF)が転写伸長反応複合体として作用する。一方、私は、RNAポリメラーゼII(RNAPII)の転写伸長反応速度制御機構の研究から、mRNA合成速度を可変する蛋白性因子DSIFの同定に成功し、その後、DSIFはRNAPIIに直接結合してRNA合成速度上昇あるいは速度低下を調節する転写伸長反応制御因子であることを見出した。DSIFは160kDa(DSIFp160)と14kDa(DSIFp14)の2つのサブユニットからなり、両サブユニットがDSIF活性に必須である。本研究は、これまで解析の行われていなかったDSIFp14に着目し、種々の欠失変異体を作製してDSIFp14の生化学的解析を行った。その結果、大腸菌で10種類のN末側およびC末側からのDSIFp14欠失変異体を発現させ、DSIFp160とDSIFp14の結合がDSIF活性には必須であることがわかった。さらに、選択的スプライシングにより生じるDSIFp14の5つのエキソンのうち3番目のエキソンを欠いたDSIFp14-smallの発現を見出した。in vitro転写系の解析から、組換えDSIFp14-smallがDSIFのサブユニットとして機能しないことを見出した。また、DSIFによる転写伸長反応制御がクロマチン構造と関連することをin vitro転写系で明らかにした。よって本研究の研究成果は、Tat依存的転写伸長複合体の作用機序の分子レベルでの理解に貢献し、今後エイズウイルスの複製阻害を思考する上で貴重な情報となることが期待される。

HIV-1, LTR, TAR (trans-acting response element), necessary, LTR, TAR (trans-acting response element), dependency, TAR (trans-acting response element), TAR (trans-acting response element), dependency, dependency, The Tat protein binding host factors (Tat-SF1, P-TEFb, DSIF, TFIIF) on TAR were used to express the length and length of anticonjugates. One party, the private RNA system, the II (RNAPII) system, the research machine, the mRNA synthesis speed factor, the DSIF factor, the DSIF synthesis factor, the RNA synthesis speed, the RNA synthesis speed, the lower speed, the lower speed, the higher the speed, the lower the speed, and the higher the speed, the lower the speed. DSIFF160 kDa (DSIFp160) 14kDa (DSIFp14) 2 requires that the DSIF activity must be affected. The purpose of this study is to analyze the biochemical properties of DSIFp14 biochemistry by means of the analysis of DSIFp14 biochemistry. According to the results of the test, the results showed that the DSIFp14 was not present at the end of the test, and the combination of DSIFp160 DSIFp14 and DSIF activity must be confirmed. This is not the case. The selected one is called "DSIFp14". "5". "I need to know that you are not in the market." I am afraid that I am not in DSIFp14-small. The in vitro system is used to analyze and organize the DSIFp14-small system, DSIF system, computer system, and computer system. In recent years, the DSIF system has been used to make sure that the information system is correct, and that the in vitro system indicates that the system is accurate. In this study, based on the results of this study, the sequence of Tat-dependent elongation complex molecules is very important to understand how to contribute, and in the future, it is important to think about the complexity of the complex and expect it.

项目成果

Y.Yamaguchi et al.: "Stimulation of RNA polymerase II elongation by hepatitis delta antigen"Science. 293. 124-127 (2001)

Y.Yamaguchi 等人：“丁型肝炎抗原对 RNA 聚合酶 II 延伸的刺激”科学。

D.Kim et al.: "The regulation of elongation by eukaryotic RNA polymerase II : A recent view"Mol.Cells. 11. 267-274 (2001)

D.Kim 等人：“真核 RNA 聚合酶 II 对伸长的调节：最近的观点”Mol.Cells。

Y.Yamaguchi, et al.: "Evidence that negative elongation factor represses transcription elongation through binding to a DRB sensitivity-inducing factor/RNA polymerase II complex and RNA"Mol.Cell.Biol.. (印刷中).

Y. Yamaguchi 等人：“负延伸因子通过与 DRB 敏感性诱导因子/RNA 聚合酶 II 复合物和 RNA 结合来抑制转录延伸的证据”Mol.Cell.Biol..（出版中）。

和田忠士: "クロマチン環境下での転写開始と伸長反応にかかわる因子群"実験医学. 19・16. 2165-2170 (2001)

和田正：“染色质环境中转录起始和延伸反应的因素”实验医学19・16（2001）。

D.B.Renner et al.: "A highly purified RNA polymerase II elongation control system"J.Biol.Chem.. 276. 42601-42609 (2001)

D.B.Renner 等人：“高度纯化的 RNA 聚合酶 II 延伸控制系统”J.Biol.Chem.. 276. 42601-42609 (2001)