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ゼブラフィッシュの挿入変異生成法による脊椎動物遺伝子の機能解析

ゼブラフィッシュの挿入変異生成法による脊椎動物遺伝子の機能解析
使用斑马鱼插入诱变方法进行脊椎动物基因的功能分析
批准号：
16011259
负责人：
川上 浩一
金额：
$4.16万
依托单位：
National Institute of Genetics
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2004 至 --
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16011259/
关键词：
分子生物学発生遺伝学ゼブラフィッシュトランスポゾン挿入変異転移酵素遺伝子トラップトランスジェニック動物

项目摘要

项目成果

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(1)メダカTo12因子を改変し、トランスポゾンベクターの開発を行った。このトランスポゾンベクターにスプライスアクセプター部位、リポーター遺伝子であるGFP遺伝子、SV40のポリAシグナルを組み込んだ遺伝子トラップベクターを構築した。次に転移酵素をコードするmRNAを試験管内で合成し、遺伝子トラップ下クターをもつプラスミドDNAとともに、ゼブラフィッシュ受精卵内へ微量注入により導入した。(2)微量注入を施された胚を成魚にまで育て、かけあわせにより次世代のゼブラフィッシュを得た。それら次世代ゼブラフィッシュ胚を実体蛍光顕微鏡下で観察することにより、GFPを組織特異的、器官特異的に発現するトランスジェニックゼブラフィッシュを合計75系統分離した。(3)これらゼブラフィッシュ系統について、トランスポゾン挿入部位のインバースPCRによる解析を行った。その結果、51のトランスポゾン挿入をゼブラフィッシュゲノム上にマップすることができた。(4)これらゼブラフィッシュ系統について、トランスポゾン挿入がトラップしている遺伝子の5'RACEによる解析を行った。その結果、発生段階で組織特異的、器官特異的に発現している16の新規遺伝子を発見した。(5)これらトランスポゾン挿入をもつヘテロ2倍体フィッシュをかけあわせ、ホモ2倍体胚を作製し、表現型の解析を行った。その結果、劣性致死を引き起こすトランスポゾン挿入を1つ同定した。
期刊论文(12)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Transgenesis and gene trap methods in zebrafish by using the Tol2 transposable element.
DOI： 10.1016/s0091-679x(04)77011-9
发表时间： 2004
期刊： Methods in cell biology
影响因子： --
作者： [K. Kawakami]
通讯作者： K. Kawakami
Excision of the Tol2 transposable element of the medala fish Oryzias latipes in Xenopus laevis and Xenopus tropicalis
非洲爪蟾和热带爪蟾中 Medala 鱼 Oryzias latipes 的 Tol2 转座元件的切除
DOI： --
发表时间： 2004
期刊： Gene 338
影响因子： --
作者： [Kawakami, K., Imanaka, K., Itoh, M., Taira, M.]
通讯作者： M.
The zebrafish pob gene encodes a novel protein required for survival of red cone photoreceptor cells
斑马鱼 pob 基因编码红锥感光细胞生存所需的新型蛋白质
DOI： --
发表时间： 2005
期刊： Genetics 170
影响因子： --
作者： [Taylor, M.R., Kikkawa, S., Diez-Juan, A., Ramamurthy, V., Kawakami K..Carmeliet, P., Brockerhoff, S.E.]
通讯作者： S.E.
A transposon-mediated gene trap approach identifies developmentally regulated genes in zebrafish
DOI： 10.1016/j.devcel.2004.06.005
发表时间： 2004-07-01
期刊： DEVELOPMENTAL CELL
影响因子： 11.8
作者： [Kawakami, K, Takeda, H, Mishina, M]
通讯作者： Mishina, M
トランスポゾンを用いた遺伝子トラップ法に基づく生命科学の基盤形成
  • 批准号：
    24K02008
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.9万
  • 财政年份：
    2024
  • 负责人：
    川上 浩一
  • 依托单位：
    National Institute of Genetics
Biological research foundation formation and neuroscience studies based on transposon-mediated gene trap methods
  • 批准号：
    21H02463
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
  • 资助金额：
    $11.07万
  • 财政年份：
    2021
  • 负责人：
    川上 浩一
  • 依托单位：
    National Institute of Genetics
ゼブラフィッシュ胚における活動依存的な脊椎介在ニューロン形成
  • 批准号：
    06F06423
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for JSPS Fellows
  • 资助金额：
    $1.92万
  • 财政年份：
    2006
  • 负责人：
    川上 浩一
  • 依托单位：
    National Institute of Genetics
ゼブラフィッシュのフォワード遺伝学による脊椎動物初期発生研究
  • 批准号：
    16027252
  • 项目类别：
    Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
  • 资助金额：
    $3.84万
  • 财政年份：
    2004
  • 负责人：
    川上 浩一
  • 依托单位：
    National Institute of Genetics
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