ゼブラフィッシュ胚における活動依存的な脊椎介在ニューロン形成

斑马鱼胚胎中活动依赖性脊髓中间神经元的形成

• 批准号: 06F06423
• 负责人: 川上 浩一
• 金额: $ 1.92万
• 依托单位: National Institute of Genetics
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• 财政年份: 2006
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2006 至 2007
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-06F06423/
• 关键词: 分子生物学; 発生遺伝学; ゼブラフィッシュ; トランスポゾン; テタナス毒素; 脊椎神経; 遺伝子トラップ; トランスジェニックフィッシュ; 挿入変異; 転移酵素; トランスジェニック動物

1.To12トランスポゾンベクターに、スプライスアクセプター部位、Ga14遺伝子、SV40ポリAシグナルを組み込んだ遺伝子トラップコンストラクトを、ゼブラフィッシュゲノムにランダムに挿入させ、Ga14を脊椎内介在神経特異的に発現するトランスジェニックフィッシュ約50系統の分離、同定、系統化を行った。2.フグevx1遺伝子のエンハンサーを単離し、To12転移システムを用いた遺伝子導入により介在神経特異的にGa14を発現するトランスジェニックフィッシュ系統を作製した。3.Ga14の認識配列UASの下流にテタナス毒素遺伝子と青色蛍光蛋白質CFP遺伝子の融合遺伝子を組み込んだトランスジェニックフィッシュ系統を樹立した。また、UASの下流にボツリヌス毒素遺伝子とGFP遺伝子の融合遺伝子を組み込んだトランスジェニックフィッシュ系統を樹立した。これらエフェクター系統が神経機能の阻害に有効であることを明らかにした。4.熱ショックプロモーターの下流にCre遺伝子を組み込んだトランスジェニックフィッシュを作製した。この系統と毒素遺伝子の上流にLoxP部位ではさまれたRFP遺伝子をもつ系統と組み合わせることにより、熱ショック依存的に毒素遺伝子を発現するシステムの構築を行った。5.遺伝子トラップ系統の解析によりNotchシグナル伝達に重要なDeltaA遺伝子の変異体を同定した。DeltaA遺伝子が脊椎動物の初期発生に必須であることを示した。

1 To12 ト ラ ン ス ポ ゾ ン ベ ク タ ー に, ス プ ラ イ ス ア ク セ プ タ ー parts and Ga14 heritage 伝, SV40 ポ リ A シ グ ナ ル を group み 込 ん だ posthumous son 伝 ト ラ ッ プ コ ン ス ト ラ ク ト を, ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ ゲ ノ ム に ラ ン ダ ム に scions into さ せ, Ga14 を spine interface in god 経 specific に 発 now す る ト ラ ン ス Youdaoplaceholder0 フィッシュ フィッシュ about 50 systems <s:1> separation, homozygalization, systematization を lines った. 2. フ グ evx1 posthumous son 伝 の エ ン ハ ン サ ー を 単 し, To12 planning move シ ス テ ム を with い た posthumous son 伝 import に よ り interface in god 経 specific に Ga14 を 発 now す る ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ ュ を cropping system し た. 3. Ga14 の know go UAS の obscene に テ タ ナ ス toxin heritage 伝 son と cyan light 蛍 CFP but 伝 son survived 伝 の fusion protein sequence を group み 込 ん だ ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ を ュ system set up し た. ま た, UAS の obscene に ボ ツ リ ヌ ス toxin heritage 伝 son と GFP heritage 伝 child survived 伝 の fusion を group み 込 ん だ ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ を ュ system set up し た. こ れ ら エ フ ェ ク タ ー system が god の resistance against に 経 function is sharper で あ る こ と を Ming ら か に し た. 4. Hot シ ョ ッ ク プ ロ モ ー タ ー の obscene に Cre heritage 伝 son を group み 込 ん だ ト ラ ン ス ジ ェ ニ ッ ク フ ィ ッ シ ュ を cropping し た. こ の legacy system と toxin 伝 son の upper に LoxP parts で は さ ま れ た RFP heritage 伝 son を も つ system と group み わ せ る こ と に よ り, hot シ ョ ッ ク に toxin of interdependent 伝 son を 発 now す る シ ス テ ム の line build を っ た. 5. Heritage 伝 son ト ラ ッ プ system analytical に の よ り Notch シ グ ナ ル 伝 に important な DeltaA heritage 伝 son の - variant を be し た. The initial occurrence of DeltaA 伝 offspring が vertebrates に must である た とを show た た.

项目成果

The Fugu tyrp1 promoter directs specific GFP expression in zebrafish:: tools to study the RPE and the neural crest-derived melanophores

• DOI: 10.1111/j.1600-0749.2006.00349.x
• 发表时间: 2006-12-01
• 期刊: PIGMENT CELL RESEARCH
• 作者: Zou, Jian;Beermann, Friedrich;Wei, Xiangyun
• 通讯作者: Wei, Xiangyun

Functional dissection of the Tol2 transposable element identified the minimal cis-sequence and a highly repetitive sequence in the subterminal region essential for transposition

• DOI: 10.1534/genetics.106.060244
• 发表时间: 2006-10-01
• 期刊: GENETICS
• 影响因子: 3.3
• 作者: Urasaki, Akihiro;Morvan, Ghislaine;Kawakami, Koichi
• 通讯作者: Kawakami, Koichi

Visualization in zebrafish larvae of Na+ uptake in mitochondrion-rich cells whose differentiation is dependent on foxi3a

斑马鱼幼虫富含线粒体的细胞中 Na 吸收的可视化，其分化依赖于foxi3a

• 发表时间: 2007
• 期刊: American Journal of Physiology : Regulatory Integrative and Comparative Physiology 292
• 作者: Scott;E.K.;浦崎明宏;浅川和秀;Jae-Yeon Jeong;Masahiro Esaki
• 通讯作者: Masahiro Esaki

Genetic Dissection of Neural Circuits by To12 Transposon-Mediated Ga14 and Enhancer Trapping in Zebrafish

To12 转座子介导的 Ga14 和增强子捕获斑马鱼神经回路的遗传解剖

• 发表时间: 2008
• 作者: Asakawa;K.
• 通讯作者: K.

Spatiotemporal localization of germ plasm RNAs during zebrafish oogenesis

• DOI: 10.1016/j.mod.2007.01.003
• 发表时间: 2007-04-01
• 期刊: MECHANISMS OF DEVELOPMENT
• 影响因子: 2.6
• 作者: Kosaka, Kyoko;Kawakami, Koichi;Inoue, Kunio
• 通讯作者: Inoue, Kunio