細胞マイクロアレイ法を用いた自己抗体遺伝子の同定および自己免疫疾患の病態解析

细胞芯片法鉴定自身抗体基因及自身免疫性疾病病理分析

• 批准号: 16012219
• 负责人: 岸 裕幸
• 金额: $ 3.9万
• 依托单位: Toyama Medical and Pharmaceutical University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16012219/
• 关键词: 細胞マイクロアレイ法; 自己抗体遺伝子; 自己免疫疾患

重症筋無力症や甲状腺機能亢進症等に代表される自己免疫疾患はアセチルコリン受容体や甲状腺刺激ホルモン受容体などに対する自己抗体が産生されることにより引き起こされると考えられている。このような自己免疫疾患の発症には環境要因のほかに遺伝的要因が考えられる。遺伝的要因のひとつに抗体遺伝子の多型性が考えられるが、抗体遺伝子の多型性と自己免疫疾患の関連については未だ研究が進んでいない。本研究は、自己免疫疾患患者の自己抗体を遺伝子レベルでハイスループットな解析を行うために、自己抗原特異的Bリンパ球のクローンレベルでの同定ならびに自己抗体遺伝子の取得ができるような細胞マイクロアレイ法の樹立およびそれを用いた自己免疫疾患の解析を目的とする。そのために、リンパ球が1個入るマイクロウェルで構成されたアレイを作製し、これを用いて抗原特異的リンパ球を検出する。今回、細胞マイクロアレイ法の評価をニワトリ卵リゾチームに特異的な抗体遺伝子トランスジェニックマウスのBリンパ球を用い行った。その結果、0.1%の頻度の抗原特異的Bリンパ球の検出は問題なく行われることが示された。今後さらにシステムを改良することで検出の精度を上げていいきたいと考えている。さらに、細胞マイクロアレイ法の実際的な応用としてB型肝炎ウィルス抗原(HBs抗原)により感作されされた健常人ボランティアの末梢血Bリンパ球を用い、抗原特異的Bリンパ球の検出条件の検討を行った。その結果、検出したBリンパ球より作製した抗体がHBs抗原に結合することを確認した。さらにこの抗体のHBウィルスのヒト肝細胞への感染を中和することを示す結果を得た。今後このシステムを用いて抗体遺伝子の多型性と自己免疫疾患との関連について研究を進めたい。

Myasthenia gravis, hyperthyroidism, etc., represent immune disorders such as thyroid gland stimulation, and thyroid gland stimulation. The main causes of immune disease are environmental factors and genetic factors. The main causes of the virus are the polymorphism of antibody genes, the polymorphism of antibody genes and the relationship between immune diseases. This study aimed to establish and apply the method for the analysis of autoantibodies in patients with autoimmune diseases by identifying and identifying autoantibodies specific to autoantigens. A single entry is required to make a reservation, and a single entry is required to make an antigen-specific reservation. Now, the cell phone is ready for the test, and the antibody is ready for the test. The results showed that 0.1% of the frequency of antigen-specific B lymphocytes was detected. In the future, we will improve the accuracy of the test. In addition, the study on the detection conditions of hepatitis B virus antigen (HBs antigen) in human peripheral blood was carried out. The results showed that the antibody binding to HBs antigen was confirmed. The results of this study were as follows: In the future, the study of the relationship between the polymorphism of antibody genes and immune diseases will be further developed.

项目成果

バイオチップの最新技術と応用

生物芯片最新技术及应用

• 发表时间: 2004
• 作者: 岸 裕幸;他
• 通讯作者: 他

Characterization of the proximal enhancer element and transcriptional regulatory factors for murine recombination activating gene‐2

• DOI: 10.1002/eji.200425185
• 发表时间: 2005-02
• 期刊: European Journal of Immunology
• 影响因子: 5.4
• 作者: Xing-Cheng Wei;Jun-ichi Dohkan;H. Kishi;Chun-xiao Wu;Sachiko Kondo;A. Muraguchi

Activation of mouse RAG-2 promoter by Myc-associated zinc finger protein.

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2004.03.159
• 发表时间: 2004-05
• 期刊: Biochemical and biophysical research communications
• 影响因子: 3.1
• 作者: Chun-xiao Wu;Wen-Pu Zhao;H. Kishi;Junichi Dokan;Zhe-xiong Jin;Xing-Cheng Wei;K. Yokoyama;A. Muraguchi

Involvement of NF-κB in TGF-β-mediated suppression of IL-4 signaling.

NF-κB 参与 TGF-β 介导的 IL-4 信号传导抑制。

• 发表时间: 2004
• 期刊: Biochem.Biophys.Res.Commun. 313
• 作者: Yamamoto T.;et al.
• 通讯作者: et al.

RGA protein associates with a TRPV ion channel during biosynthesis and trafficking

• DOI: 10.1002/jcb.10775
• 发表时间: 2004-03-01
• 期刊: JOURNAL OF CELLULAR BIOCHEMISTRY
• 影响因子: 4
• 作者: Barnhill, JC;Stokes, AJ;Turner, H
• 通讯作者: Turner, H