ゲノムレベルにおける酸化ストレス病態解析法の開発とその応用

基因组水平氧化应激病理分析方法的建立及其应用

• 批准号: 16012234
• 负责人: 豊國 伸哉
• 金额: $ 2.56万
• 依托单位: Kyoto University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16012234/
• 关键词: 酸化ストレス; DNA修飾塩基; 免疫沈降法; 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine; ゲノム; 生活習慣病

酸化ストレスは動脈硬化、糖尿病などの生活習慣病の発症に関与していると考えられる。これまで私たちはラジカル発がんモデルにおいて、変異の標的となる遺伝子が存在することを報告した。酸化ストレス病態のゲノムへの影響を調べるため、ゲノムDNAで酸化傷害が生じた部位を網羅的に検出する方法を開発した。修飾塩基を含む8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG)に対するモノクローナル抗体で免疫沈降することにより、その修飾塩基を含むDNA断片をクローニングする技術を確立した。無処置あるいは鉄ニトリロ三酢酸を投与したマウス腎から抽出したゲノムDNAを材料として、各動物について100個以上の8-OHdGを含有する断片をクローニング、塩基配列を決定し、その断片の染色体上における位置情報・意義をインタネット上のデータベースで検索し、解析した。1)N45.1は8-OHdGを含有する断片を特異的に免疫沈降した。2)このシステムでDNA負荷量と8-OHdG含有量に関して量依存性を認めた。3)「ランダム」という現象を「各染色体の塩基長に比例した断片の分布」と仮定すると、カイ2乗統計量による適合度検定でp=0.07程度の危険率でランダムではない。特に16番はどちらの群でも頻度が高い。5)遺伝子領域からの距離という観点で8-OHdG含有断片を解析すると、遺伝子領域の比率がやや高い。遺伝子領域ならびに遺伝子から数百kb離れた領域の断片の割合が鉄ニトリロ三酢酸投与で増加した。6)遺伝子領域断片のうち、その発現の認められる割合も鉄ニトリロ三酢酸投与で増加した。ゲノムDNAにおける8-OHdGの生成部位はランダムではない。少なくとも、どの染色体上にあるか、遺伝子領域かどうか、遺伝子領域なら発現しているかどうかなどの多因子が関係していることが示唆される。

Acidified animal sclerosis, diabetes mellitus, daily life, illness, symptoms and symptoms. Please tell me that there is a report in the middle of the report in the first place. Acidify the pathologic state of the disease and DNA the method of acidifying the network in the affected area of health. The repair kit contains 8-hydroxy-2'-deoxyguanosine (8-OHdG) antigens, antibody antibodies, immunoprecipitation agents, antigens, and antigens, which contain DNA fragments that do not need to be detected. In this paper, we use this method to extract the DNA material, each animal contains more than 100 fragments of 8-OHdG, the location of the fragments on the chromosomes of the fragments is determined, and the location of the fragments on the chromosomes means that the location of the fragments is significant. 1) N45.1 "8-OHdG" contains "immuno-sedimentation" with the special "fragment". 2) the content of DNA is 8-OHdG, which is dependent on the quantity. 3) the proportion of the basic length of each chromosome, the distribution of fragments, the proportion of the base length of each chromosome, the proportion of the base length of each chromosome, the proportion of the base length of each chromosome, the distribution of fragments, the proportion of chromosomes, the distribution of fragments, the distribution of chromosomes, the proportion of chromosomes, the distribution of fragments. In particular, 16 times, the crowd is very high. 5) the OHdG contains fragments of parsing data and the ratio of sub-domain data is high. In the sub-field, there are hundreds of kb in the field, and the fragments are cut and cut. 6) in the sub-field, the fragments are broken, and you can see that there is no difference between the two groups. "DNA", "8-OHdG", "generating part", "generating part". There is a lack of information on the chromosome, in the area of the chromosome, in the field of the chromosome and in the field of the chromosome.

项目成果

Susceptibility of actin to modification by 4-hydroxy-2-nonenal.

• DOI: 10.1016/j.jchromb.2005.02.025
• 发表时间: 2005-11
• 期刊: Journal of chromatography. B, Analytical technologies in the biomedical and life sciences
• 作者: M. Ozeki;A. Miyagawa-Hayashino;Shinya Akatsuka;T. Shirase;Wen-Hua Lee;K. Uchida;S. Toyokuni

Redox regulation of annexin 2 and its implications for oxidative stress-induced renal carcinogenesis and metastasis

• DOI: 10.1038/sj.onc.1207555
• 发表时间: 2004-05-13
• 期刊: ONCOGENE
• 影响因子: 8
• 作者: Tanaka, T;Akatsuka, S;Toyokuni, S
• 通讯作者: Toyokuni, S