プロテインダイナミクスのプロテオーム解析に関する基礎的研究

蛋白质动力学蛋白质组学分析基础研究

• 批准号: 16013239
• 负责人: 榊原 陽一
• 金额: $ 3.2万
• 依托单位: University of Miyazaki
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16013239/
• 关键词: プロテオーム; チロシン硫酸化; 翻訳後修飾; ラフト; コレステロール硫酸化; 質量分析

細胞のシグナル応答によって誘導されるタンパク質のダイナミックな挙動をプロテオーム解析により網羅的に解析できる分析方法の確立を目的とし、そのための細胞分画条件、二次元電気泳動による分離条件の検討を行った。哺乳動物の細胞膜には、コレステロールやスフィンゴ脂質に富んだメンブランマイクロドメイン(ラフト)が存在する。近年、これらは細胞間情報伝達の場として重要な機能を持つことが明らかとなりつつある。細胞がシグナルを受け取ったときに多くのシグナル分子がこのラフト画分に集積してくることが報告されている。そこでシグナル伝達系の網羅的解析を目的としラフツ画分へ移行するタンパク質の網羅的解析によるシグナル伝達系全貌解明の糸口を見つける。またラフトの動的制御機構とコレステロール硫酸化の関係について検討する。さらに、タンパク質の細胞内輸送機構に関与すると考えられる翻訳後修飾としてのチロシン硫酸化の機能を解明するためにTyrosylprotein Sulfotransferase(TPST)の諸性質の比較検討を行った。ラフトの制御機構としてコレステロールの硫酸化が関与している可能性が示された。コレステロール硫酸化がアンカータイプチロシンキナーゼLckやシグナルアダプターLATの局在に影響する可能性が示された。'さらに、コレステロール硫酸化によりラフトから細胞質に局在性を変化するタンパク質を解析した結果、機能未知のタンパク質の存在が確認できた。2種類存在するタンパク質チロシン硫酸転移酵素(TPST)の諸性質を比較検討し、タンパク質機能の多様性へのチロシン硫酸化の関与を検討した。さちに、カタユウレイボヤのタンパク質チロシン硫酸転移酵素(TPST)をクローニングした。

Cell の シ グ ナ ル 応 answer に よ っ て induced さ れ る タ ン パ ク qualitative の ダ イ ナ ミ ッ ク な 挙 dynamic を プ ロ テ オ ー ム parsing に よ り snare に resolution で き の る analysis method to establish を purpose と し, そ の た め の cells draw conditions, secondary yuan electric 気 swimming に よ る separation conditions の 検 line for を っ た. Mammals の membrane に は, コ レ ス テ ロ ー ル や ス フ ィ ン ゴ lipid に rich ん だ メ ン ブ ラ ン マ イ ク ロ ド メ イ ン (ラ フ ト) が exist す る. In recent years, こ れ ら は intercellular intelligence 伝 da の field と し て important function of な を hold つ こ と が Ming ら か と な り つ つ あ る. Cell が シ グ ナ ル を by け take っ た と き に more く の シ グ ナ ル molecular が こ の ラ フ ト painting product に set し て く る こ と が report さ れ て い る. そ こ で シ グ ナ ル 伝 is の snare analytical を end と し ラ フ ツ draw points へ transitional す る タ ン パ ク qualitative の snare analytical に よ る シ グ ナ ル 伝 da system whole interpret の si mouth を see つ け る. The control mechanism of またラフト <s:1> motion is とコレステロ とコレステロ <s:1> <s:1> and <s:1> related to sulfation <e:1> is に て検 て検 て検 and する. さ ら に, タ ン パ ク qualitative の intracellular delivery agency に masato and す る と exam え ら れ る modification after turn 訳 と し て の チ ロ シ ン sulfating の function を interpret す る た め に Tyrosylprotein Sulfotransferase (TPST) の the property line の is beg を 検 っ た. The ラフト ラフト control mechanism と てコレステロ てコレステロ てコレステロ る る る が the possibility of <s:1> sulfation が and <s:1> て る る る が が shows された. コ レ ス テ ロ ー ル sulfating が ア ン カ ー タ イ プ チ ロ シ ン キ ナ ー ゼ Lck や シ グ ナ ル ア ダ プ タ ー LAT の bureau に affect す が る possibility in さ れ た. 'さ ら に, コ レ ス テ ロ ー ル sulfating に よ り ラ フ ト か ら cytoplasm に bureau in the sexual を variations change す る タ ン パ ク qualitative analytical し を た result, function of unknown の タ ン パ ク qualitative の exist が confirm で き た. 2 species exist す る タ ン パ ク qualitative チ ロ シ ン planning shift enzyme (TPST) sulfate の the nature を beg し 検, タ ン パ ク quality function の many others in sexual へ の チ ロ シ ン sulfating の masato and を beg し 検 た. さ ち に, カ タ ユ ウ レ イ ボ ヤ の タ ン パ ク qualitative チ ロ シ ン planning shift enzyme (TPST) sulfate を ク ロ ー ニ ン グ し た.