ALSマウスモデルの神経変性におけるプロテアソームの役割に関する研究

蛋白酶体在ALS小鼠模型神经退行性变中的作用研究

基本信息

批准号：
16015330
负责人：
高橋良輔
金额：
$ 3.84万
依托单位：
The Institute of Physical and Chemical Research
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至无数据
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16015330/
关键词：
SOD1 Hsp70 CHIP S5a G93A トランスジェニックマウス GluR2 酸化ストレス

项目摘要

家族性ALSの病因遺伝子である変異SOD1がミスフォールド化して、分子シャペロンHsp70に認識されること、その場合、野生型よりも還元条件下で単量体になりやすいこと、細胞内でも単量体としてHsp70と結合することを見出した。さらに変異SOD1はHsp70を介してユビキチンリガーゼ活性を持つU-box蛋白質、CHIPと結合するが、インビトロユビキチン化アッセイにより、CHIPによって直接ユビキチン化されないこと、逆にHsp70はポリユビキチン化され、26Sプロテアソームのユビキチン認識サブユニットであるS5aに結合することを見出した。これらの結果より、変異SOD1はユビキチン化されたHsp70に結合することによってプロテアソームに運ばれ、分解されるとの仮説を提唱した。いっぽう運動ニューロンに特異的に発現する、GluR2サブユニットを欠くためにカルシウム透過型となるAMPA型グルタミン酸受容体がALSにおいて果たす役割を解明するため、運動ニューロンに発現するAMPA受容体をカルシウム不透過性にするよう、運動ニューロン特異的にGluR2を過剰発現したトランスジェニックマウスを変異SOD1によるALSモデルマウスをかけ合わせたところ、発症時期が著明に遅延した。このマウスでは酸化的ストレスが抑制され、また加齢とともに増加する変異SOD1のミスフォールド化も顕著に抑制されていた。以上よりカルシウム透過性AMPA受容体は変異SOD1によるALSを増悪させることが明らかになった。

已经发现，突变体SOD1是一种家族性ALS的致病基因，被分子伴侣HSP70错误折叠和识别，在这种情况下，它比野生型在还原的条件下更有可能成为单体，并且它与HSP70结合了HSP70作为细胞中的单体。此外，突变体SOD1与ChIP结合，ChIP是一种通过HSP70的U盒蛋白，但在体外泛素化测定中发现，它并未直接被芯片泛素化，而相反，HSP70是多求的，并且与S5A结合，ubiquitin condition contiention subotion subotion subotion subotorys of 26s subunitoys和26s的蛋白酶。这些结果表明，突变体SOD1被转运到蛋白酶体，并通过与泛素化的HSP70结合而降解。 On the other hand, to clarify the role of AMPA-type glutamate receptors, which are calcium-permeable due to lack of the GluR2 subunit specifically expressed in motor neurons, in order to make AMPA receptors expressed in motor neurons calcium impermeable, transgenic mice that overexpressed GluR2 in motor neurons were interposed with ALS model mice that were mutated by SOD1, and the onset timing被显着延迟。在这只小鼠中抑制了氧化应激，并且随着年龄的增加而增加的突变体SOD1的错误折叠也得到了显着抑制。从上面可以揭示出钙可渗透的AMPA受体加剧了由突变体SOD1引起的ALS。