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HIVの複製・病原性発現に必須なアクセサリー蛋白質の系統的構造・機能相関解析

HIV复制和致病性表达所必需的辅助蛋白的系统结构和功能关系分析

基本信息

批准号：
16017270
负责人：
足立昭夫
金额：
$ 5.38万
依托单位：
The University of Tokushima
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16017270/
关键词：
HIV-1 HIV-2 Vif Vpr Vpx 種特異性細胞毒性プロテアソーム分解

项目摘要

本研究では、エイズ発症に必須であると考えられているHIVのVifおよびVpx/Vprの構造と機能に関して系統的に解析し、要約以下の成果を得た。(1)HIV-1 gag-CAとHIV-1の種特異的増殖能について検討した。我々が作製した49種類のHIV-1/SIVmac CAキメラウイルスは全てサル細胞HSC-Fで増殖できなかった。そこで、これに加えてSIVmacのvif遺伝子を挿入したHIV-1を作製したところ、HSC-Fでの増殖性を獲得したクローンが見出された(HIV-1 DT:gag-CAのシクロフィリン A結合ループに対応する領域とvif遺伝子のみがSIVmac由来で、ゲノムの約94%がHIV-1)。この結果により、HIV-1種特異性決定領域はvifおよびgagのごく一部にあることが明らかになった。今後、各種のHIV-1 DTウイルスを用いて、HIV-1の種特異的ウイルス複製の分子基盤の解明や新しいサルモデルシステムの構築に取組んで行く。(2)HIV-1はVprを持つが、HIV-2はVprに加えてアミノ酸配列で相同性があるVpxも持つ。ホモロジーモデリングを行った結果、これらの3つの蛋白質はそれぞれ3つのヘリックスから成る類似した構造を持つことがわかった。さらに、HIV-1 Vpr、HIV-2 VprおよびHIV-2 Vpxの細胞毒性効果の比較を試みた。ルシフェラーゼをマーカーに用いた実験から、HIV-1およびHIV-2のVprが強い細胞毒性を持つことを確認した。程度はやや低いがHIV-2 Vpxにも細胞毒性があった。HeLa Tet-Off細胞は、HIV-2 Vpxの発現を誘導した時にのみ、ほとんど増殖しなかった。これにより、HIV-2 Vpxも細胞増殖抑制能を持つことが明らかになった。

This study is necessary for the prevention and treatment of HIV infection. The structure and function of Vpx/Vpr are analyzed and the following results are provided. (1) HIV-1 gag-CA and HIV-1 species-specific reproductive capabilities are used. I have produced 49 types of HIV-1/SIVmac CA HIV-1/SIVmac full-cell HSC-F multiplication system. Made by そこで、これに加えてSIVmacのvif伝子をinsertしたHIV-1をHIV-1 DT: gag-CA のシクロフィリン A combined ループに対応する区とvif伝子のみがSIVmac origin で、ゲノムのabout 94%がHIV-1).このRESULTSにより、HIV-1 species specificity determines the field はvifおよびgagのごく一一にあることが明らかになった. In the future, various types of HIV-1 DT ウイルスを uses いて and HIV-1 specific ウイルス to copy the molecular base of the molecule and explain the new しいサルモデルシステムのconstruct the んで行く. (2) HIV-1 is the same as Vpr and HIV-2 is the same as Vpx.ホモロジーモデリングを行ったRESULTS、これらの3つのproteinはそれThe ぞれ3つのヘリックスから成る is similar to the したstructural をhold つことがわかった.さらに、HIV-1 Vpr、HIV-2 VprおよびHIV-2 VpxのComparison of cytotoxic effectsをtestみた.ルシフェラーゼをマーカーに用いた験から,HIV-1およびHIV-2のVprがstrongいcytotoxicityをholdつことをconfirmationした. The degree of HIV-2 Vpx is low and the cytotoxicity is low. HeLa Tet-Off cells and HIV-2 Vpx are used to induce and reproduce the virus.これにより, HIV-2 Vpxも Cell Proliferation Inhibitory Energy つことが明らかになった.