HIV/SIV Gagハイブリッドウイルスの作製とその解析

HIV/SIV Gag 杂交病毒的制备和分析

• 批准号: 14657076
• 负责人: 足立 昭夫
• 金额: $ 2.11万
• 依托单位: The University of Tokushima
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• 财政年份: 2002
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2002 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-14657076/
• 关键词: HIV-1; SIVmac; HSIV; Gag

ヒトエイズの動物モデルを確立するためには、サルに感染可能でエイズ発症能力のあるHIV-1を作製することが肝要である。これまでに得られた成績から、サル細胞へのトロピズムを決定しているウイルス遺伝子はgagキャプシド(CA)領域とされている。本研究では、site-specific mutagenesis法によりHIV-1の感染性分子クローンのgag CA領域にSIVmacの対応する領域を導入し、カニクイザルやアカゲザルに感染性がありかつエイズ発症能のあるハイブリッドウイルス(HSIV)を作製することを目指した。HIV-1 CA領域の全般にわたって合計49種類のHSIVクローンを構築し、塩基配列を確認した上で、これらウイルスクローンの基本的性状を解析した。293T細胞へのトランスフェクションでは、全てのクローンが逆転写酵素活性で見るかぎりウイルス粒子を産生した。次に、これらのクローンの感染能を種々のHIV/SIVに極めて感受性の高いM8166細胞で検討した。18種に感染性があり、うち6種が比較的良く増殖した。ループ領域でのハイブリッドウイルスに感染性の高い傾向が認められ、かつ、感染性のあるクローンはCA内でクラスターを形成する傾向にあった。しかし、サルリンパ球細胞株HSC-Fでは、これら6種の感染性の高いクローンを含め全てのHSIVが増殖不能であった。これらの成績は、HIV/SIVにおいてはCA領域内の遺伝子組み換えにより容易に感染性が失われることやCA内に機能的に保存されている領域があることを示しており、目標とするHSIVのデザインに反映し得る。

The ability to control HIV-1 infection is essential to the establishment of an animal model. This is the first time that a cell phone has been sent to a cell phone. This study is aimed at introducing HIV-1 infectious molecules into the gag CA domain, introducing HIV-1 into the SIVmac domain, and controlling HIV-1 infectivity by site-specific mutagenesis. The HIV-1 CA domain contains a total of 49 HSIV species that are identified for their basic traits. 293T cells are active in reverse transcription enzymes, and they are active in reverse transcription enzymes. In addition, the infection of HIV/SIV can be detected by M8166 cells with high sensitivity. 18 kinds of infection, 6 kinds of good breeding. The tendency of infectious diseases to be high in the field of infection is to form a tendency of infection. HSC-F cell line contains 6 kinds of highly infectious HSIV and can not reproduce. This achievement is reflected in HIV/SIV transmission in the CA domain, which is susceptible to infection, loss of function, and preservation of functions in the CA domain.

项目成果

Fujita, M.: "Susceptibility of HVS-immortalized lymphocytic HSC-F cells to various strains and mutants of HIV/SIV"International Journal of Molecular Medicine. (in press).

Fujita, M.：“HVS 永生化淋巴细胞 HSC-F 细胞对 HIV/SIV 各种毒株和突变体的敏感性”国际分子医学杂志。

Tomiyama, H.: "Different effects of Nef-mediated HLA class I down-regulation on human immunodeficiency virus type 1-specific CD8^+-T cell cytolytic activity....."Journal of Virology. 76. 7535-7543 (2002)

Tomiyama, H.：“Nef 介导的 HLA I 类下调对人类免疫缺陷病毒 1 型特异性 CD8^ -T 细胞溶细胞活性的不同影响......”病毒学杂志。

Fujita, M.: "Amino acid residues 88 and 89 in the central hydrophilic region of human immunodeficiency virus type 1 Vif are critical for viral....."Journal of Virology. 77. 1626-1632 (2003)

Fujita, M.：“人类免疫缺陷病毒 1 型 Vif 中央亲水区的氨基酸残基 88 和 89 对于病毒至关重要......”病毒学杂志。

Fujita, M.: "Subtle mutations in the cysteine region of HIV-1 Vif drastically alter the viral replication phenotype"Microbes and Infection. 4. 621-624 (2002)

Fujita, M.：“HIV-1 Vif 半胱氨酸区域的细微突变极大地改变了病毒复制表型”微生物与感染。

Fujita, M.: "Apparent lack of trans-dominant negative effects of various vif mutants on the replication of HIV-1"Microbes and Infection. 4. 1203-1207 (2002)

Fujita, M.：“各种 vif 突变体对 HIV-1 复制明显缺乏反式显性负面影响”微生物和感染。