細胞分裂期の染色体分配の分子メカニズムの解析

细胞分裂过程中染色体分离的分子机制分析

• 批准号: 16021261
• 负责人: 木村 圭志
• 金额: $ 2.43万
• 依托单位: The Institute of Physical and Chemical Research
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 无数据
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16021261/
• 关键词: 染色体凝縮; 染色体分配; ツメガエル卵抽出液; in vitro再構築系; 細胞分裂期; リン酸化; 細胞周期; 2ハイブリッド解析

細胞分裂期(M期)における染色体凝縮は、狭い細胞内で長大なクロマチンDNAを正確に分配するために重要な過程である。染色体凝縮に障害が生じれば、遺伝情報は正確に伝達できず、その結果として突然変異や発がんにつながると考えられる。本研究では、M期における染色体凝縮・分配の分子メカニズムを、ツメガエル卵抽出液を用いた染色体構造のin vitro再構系を用いて解析した。この系を用いた解析により、コンデンシンとよばれるタンパク質複合体が染色体凝縮に中心的な役割を果たしているが証明されている。コンデンシンはM期特異的に精子核クロマチンに結合し、クロマチンをM期染色体様の凝縮した構造に変換する。コンデンシンのクロマチンへの結合は卵抽出液のリン酸化レベルに依存しており、コンデンシンはM期卵抽出液中で特異的な部位がリン酸化される。しかしながら、精製コンデンシンは間期フォームもM期フォームも同等のDNA結合能を持ち、ヌクレオソームDNAにも同等に結合する。この結果から、コンデンシンのM期特異的なクロマチン結合はコンデンシンやヒストンのリン酸化だけでは説明できず、卵抽出液中にコンデンシンのクロマチン結合を制御する因子が存在することが予想される。精製したコンデンシンはバッファー中でDNAに結合するが、間期卵抽出液を加えるとDNAから速やかに解離する。一方、コンデンシンのDNA結合はM期欄抽出液中では維持される。これらの結果から、間期卵抽出液にはコンデンシンをクロマチンDNAから解離させ結合を抑制する因子が、M期卵抽出液中には結合を維持する因子が存在することが示唆された。現在、これらの因子を同定するために酵母ハイブリッド解析により、コンデンシンと相互作用する因子をスクリーニングしている。

Chromosome condensation, contraction, and intracellular growth during cell division (M phase) are important processes for proper DNA distribution. Chromosome condensation causes damage, genetic information is correctly transmitted, and results are suddenly transmitted. In this study, chromosome condensation and molecular distribution in M and M phases were analyzed by using chromosome extract and in vitro reconstruction. This system is used to analyze, analyze and analyze the chromosome structure, and prove that the chromosome structure is composed of the chromosome condensation center and the chromosome condensation center. M phase specific sperm nucleus binding, M phase chromosome condensation The combination of protein and protein is dependent on the acidification of egg extract, and the protein and protein are specific to the acidification of egg extract in M stage. The DNA binding energy of the purified DNA is equal to that of the purified DNA. The results indicate that the presence of factors controlling the binding of protein to protein in egg extracts is expected. DNA binding in the medium and DNA dissociation in the medium The DNA binding of a protein is maintained in the extract of M phase. The result is that the factor inhibiting the dissociation of DNA in the egg extract at the stage M is present. Now, the factors are constant, and the yeast cells are analyzed, and the interaction factors are constant.

项目成果

Direct association with inner centromere prptein(INCENP) activates the novel chromosomal passenger protein, Aurora-C

与内着丝粒蛋白 (INCENP) 直接关联可激活新型染色体过客蛋白 Aurora-C

• 发表时间: 2004
• 期刊: J.Biol.Chem. 279・45
• 作者: Li;X.;Sakashita;G.;Matsuzaki;H.;Sugimoto;K.;Kimura;K.;Hanaoka;F.;Taniguchi;H.;Furukawa;K.;Urano;T.
• 通讯作者: T.