ゴルジ体が発生・分化に果たす役割の解析

高尔基体在发育和分化中的作用分析

• 批准号: 16044218
• 负责人: 中村 暢宏
• 金额: $ 3.97万
• 依托单位: Kanazawa University
• 依托单位国家: 日本
• 项目类别: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• 财政年份: 2004
• 资助国家: 日本
• 起止时间: 2004 至 2005
• 项目状态: 已结题
• 来源: https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16044218/
• 关键词: ゴルジ体; ゼブラフィッシュ; 初期発生

ゼブラフィッシュで使用できるゴルジ体マーカータンパク質遺伝子としてGM130とgolgin97のクローニングを行った。ラット及びヒトのGM130及びgolgin97の相同遺伝子のcDNA、EST及びゲノムDNA配列を検索したところ、それぞれについて部分的に相同な配列が同定できたが、完全長のcDNA配列は同定できなかった。GM130とgoglin97両遺伝子について、N末端とC末端部分のcDNA配列を同定することができたので、この配列を用いてプライマーを合成した。これらのプライマーを用いて、6ヶ月齢のメス固体一匹の全体よりpolyA-RNAを抽出し、オリゴdTをプライマーとして合成したcDNAライブラリーを鋳型としてRT-PCR法でクローニングを行った。クローニングの後、GM130及びgolgin97の両遺伝子について10個以上のポジティブクローンを取得し、制限酵素地図を作成したのち、配列決定を行った。最終的に、golgin97のcDNAを一種、また、GM130のcDNAを数種得た。golgin97遺伝子は、全長に渡ってヒト及びラットの遺伝子と高い相同性を示し、オーソログ遺伝子である事が確認された。一方、GM130で得られた数種のcDNA配列を比較検討したところ、これらは、全てが読み枠の変異を伴わない挿入や欠失であり、部分配列の異なるGM130タンパク質をコードするcDNAである事が示唆された。cDNA配列が他の部分で大きく異なっていない事からこれらの変異体がスプライシング変異体であることが示唆された。

ゼ ブ ラ フ ィ ッ シ ュ で use で き る ゴ ル ジ body マ ー カ ー タ ン パ ク qualitative heritage 伝 son と し て GM130 と golgin97 の ク ロ ー ニ ン グ を line っ た. ラ ッ ト and び ヒ ト の GM130 and び golgin97 の same heritage 伝 son の cDNA, EST and び ゲ ノ ム DNA match column を 検 cable し た と こ ろ, そ れ ぞ れ に つ い て part が に な with same column with fixed で き た が, long completely の cDNA match column は be で き な か っ た. Son GM130 と goglin97 struck heritage 伝 に つ い て と C and N end end part の cDNA match column を with fixed す る こ と が で き た の で, こ の matched with column を い て プ ラ イ マ ー を synthetic し た. こ れ ら の プ ラ イ マ ー を with い て, 6 ヶ 齢 の メ ス solid a horse の all よ り を polyA - RNA extraction し, オ リ ゴ dT を プ ラ イ マ ー と し て synthetic し た cDNA ラ イ ブ ラ リ ー を type where と し て rt-pcr method で ク ロ ー ニ ン グ を line っ た. After ク ロ ー ニ ン グ の, GM130 and び golgin97 の struck heritage 伝 son に つ い て more than 10 の ポ ジ テ ィ ブ ク ロ ー ン を we get し limitations and enzyme 図 を made し た の ち, line arrangement decided を っ た. The final に, one type of golgin97 cDNAを, and several types of GM130 cDNAを result in た. Golgin97 heritage 伝 は, span に crossing っ て ヒ ト and び ラ ッ ト の posthumous son 伝 と high い identity を し, オ ー ソ ロ グ heritage 伝 son で あ る が sure さ れ た. Side, GM130 で have ら れ た several の cDNA match column を compare beg し 検 た と こ ろ, こ れ ら は, whole て が 読 み 枠 の - different を with わ な い scions into や owe lost で あ り, distribution of column の different な る GM130 タ ン パ ク qualitative を コ ー ド す る cDNA で あ が る things in business さ れ た. CDNA match column が he の part で き く different な っ て い な い matter か ら こ れ ら の - variant が ス プ ラ イ シ ン グ - variant で あ る こ と が in stopping さ れ た.

项目成果

Dynamics of Golgi matrix proteins after a block of ER to Golgi transport

内质网到高尔基体运输受阻后高尔基体基质蛋白的动态

• 发表时间: 2004
• 期刊: J Biochem. 135
• 作者: Yoshimura S;Yamamoto A;Misumi Y;Sohda M;Barr FA;Fujii G;Shakoori A;Ohno H;Mihara K;Nakamura N.
• 通讯作者: Nakamura N.

Depletion of vesicle-tethering factor p115 causes mini-stacked Golgi fragments with delayed protein transport

• DOI: 10.1016/j.bbrc.2005.10.084
• 发表时间: 2005-12-16
• 期刊: BIOCHEMICAL AND BIOPHYSICAL RESEARCH COMMUNICATIONS
• 影响因子: 3.1
• 作者: Sohda, M;Misumi, Y;Ikehara, Y
• 通讯作者: Ikehara, Y

Convergence of cell cycle regulation and growth factor signals on GRASP65

• DOI: 10.1074/jbc.m502442200
• 发表时间: 2005-06-17
• 期刊: JOURNAL OF BIOLOGICAL CHEMISTRY
• 影响因子: 4.8
• 作者: Yoshimura, S;Yoshioka, K;Nakamura, N
• 通讯作者: Nakamura, N