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ゴルジ体が発生・分化に果たす役割の解析

高尔基体在发育和分化中的作用分析

基本信息

批准号：
16044218
负责人：
中村暢宏
金额：
$ 3.97万
依托单位：
Kanazawa University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2004
资助国家：
日本
起止时间：
2004 至 2005
项目状态：
已结题

来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-16044218/
关键词：
ゴルジ体ゼブラフィッシュ初期発生

项目摘要

ゼブラフィッシュで使用できるゴルジ体マーカータンパク質遺伝子としてGM130とgolgin97のクローニングを行った。ラット及びヒトのGM130及びgolgin97の相同遺伝子のcDNA、EST及びゲノムDNA配列を検索したところ、それぞれについて部分的に相同な配列が同定できたが、完全長のcDNA配列は同定できなかった。GM130とgoglin97両遺伝子について、N末端とC末端部分のcDNA配列を同定することができたので、この配列を用いてプライマーを合成した。これらのプライマーを用いて、6ヶ月齢のメス固体一匹の全体よりpolyA-RNAを抽出し、オリゴdTをプライマーとして合成したcDNAライブラリーを鋳型としてRT-PCR法でクローニングを行った。クローニングの後、GM130及びgolgin97の両遺伝子について10個以上のポジティブクローンを取得し、制限酵素地図を作成したのち、配列決定を行った。最終的に、golgin97のcDNAを一種、また、GM130のcDNAを数種得た。golgin97遺伝子は、全長に渡ってヒト及びラットの遺伝子と高い相同性を示し、オーソログ遺伝子である事が確認された。一方、GM130で得られた数種のcDNA配列を比較検討したところ、これらは、全てが読み枠の変異を伴わない挿入や欠失であり、部分配列の異なるGM130タンパク質をコードするcDNAである事が示唆された。cDNA配列が他の部分で大きく異なっていない事からこれらの変異体がスプライシング変異体であることが示唆された。

For example, if you want to use the GM130 and golgin97, you can use the GM130 and golgin97. The cDNA, EST and DNA sequences of the same genes of GM130 and Tgolgin 97 are identical to each other, and the cDNA sequences of the same genes are identical to each other. GM130 and goglin97 cDNA sequences are identical, and the sequences are identical. The gene expression of the gene was detected by RT-PCR. After the game, GM130 and Golgin97 have more than 10 games to acquire, limit enzyme site to create, and arrange. Finally, golgin97 cDNA was obtained from one species, and GM130 cDNA was obtained from several species. Golgin97 is the first to confirm the identity of the gene, the full length of the gene and the high degree of identity of the gene. A comparison of several cDNA sequences found in GM130 shows that there are some differences in the sequence of GM130 cDNA. The cDNA sequence is different from other parts of the genome.

项目成果

期刊论文数量（5）

专著数量（0）

科研奖励数量（0）

会议论文数量（0）

专利数量（0）

Dynamics of Golgi matrix proteins after a block of ER to Golgi transport

内质网到高尔基体运输受阻后高尔基体基质蛋白的动态

DOI：
发表时间：
2004
期刊：
J Biochem. 135
影响因子：
0
作者：
Yoshimura S;Yamamoto A;Misumi Y;Sohda M;Barr FA;Fujii G;Shakoori A;Ohno H;Mihara K;Nakamura N.
通讯作者：
Nakamura N.

Depletion of vesicle-tethering factor p115 causes mini-stacked Golgi fragments with delayed protein transport