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量子ドット・有機・バイオプローブを用いる単一細胞の蛍光ダイナミクス

量子ドット・有機・バイオプローブを用いる単一細胞の蛍光ダイナミクス
使用量子点、有机和生物探针的单细胞荧光动力学
批准号：
17034026
负责人：
青山 安宏
金额：
$2.88万
依托单位：
Kyoto University
依托单位国家：
日本
项目类别：
Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
财政年份：
2005
资助国家：
日本
项目状态：
已结题
起止时间：
2005 至 2006
来源：
https://kaken.nii.ac.jp/en/grant/KAKENHI-PROJECT-17034026/
关键词：
細胞遺伝子診断モレキュラービーコンリボレギュレーターRNaseHセラソーム遺伝子送達サイズ効果リボレギュレータRNase Hシグナル増幅ウイルスサイズ薬物運搬センシングプローブ

项目摘要

项目成果

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今年度は細胞内の遺伝子診断のための手法の確立と、核酸プローブを効率よく細胞内に導入するキャリアの開発について検討した。(1)遺伝子診断に関してはモレキュラービーコン型のリボレギュレータを用いる方法を完成し、何の修飾もしていないRNAあるいはDNAプローブをタンパク合成系の培地の中で用いることにより、ターゲット配列を選択的に感度よく(1塩基の違いを識別)、非PCR的シグナル増幅を伴って検出できることを明らかにした。また、RNAaseHを用いるとターゲット/プローブ(DNA/RNA)鎖が非可逆的に切断されるため、シグナルの増幅効率がさらに向上することも明らかになった。(2)核酸プローブの送達に関しては、表面がゾルーゲル反応によりセラミック(シリカ)架橋されたセラソームがウイルスサイズ(数十nm)の粒径をもち、遺伝子(プラスミド)との複合化においても融合せず、もとのウイルスサイズを維持することを明らかにした。その結果、HeLa細胞やHepG2細胞への遺伝子(ルシフェラーゼ)導入において、通常のカチオン性リボソームに比べて2桁から3桁高い活性を有する。セラソームは膜脂質が頑強に架橋されている結果細胞膜との融合も抑制され、したがって細胞毒性もきわめて軽微であり、血清存在下においても高い遺伝子導入効率を保持することも示された。
期刊论文(6)
专著(0)
科研奖励(0)
会议论文
Cerasome as an infusible, cell-friendly, and serum-compatible transfection agent in a viral size
DOI： 10.1021/ja058016i
发表时间： 2006-03-15
期刊： JOURNAL OF THE AMERICAN CHEMICAL SOCIETY
影响因子： 15
作者： [Matsui, K, Sando, S, Kikuchi, J]
通讯作者： Kikuchi, J
Visible Sensing of Nucleic Acid Sequence with a Genetically Encodable Unmodified DNA
使用遗传编码的未修饰 DNA 进行核酸序列的可见传感
DOI： --
发表时间：
期刊： Angew.Chem.Int.Ed. (in press)
影响因子： --
作者： [A.Narita, K.Ogawa, S.Sando, Y.Aoyama]
通讯作者： Y.Aoyama
Visible Sernsing of Nuclei Acid Sequences with a Genetically Encodable Unmodified RNA Probe
使用遗传编码的未修饰 RNA 探针对核酸序列进行可见测序
DOI： --
发表时间： 2006
期刊： Angew.Chem.Int.Ed. 45
影响因子： --
作者： [A.Narita, K.Ogawa, S.Sando, Y.Aoyama]
通讯作者： Y.Aoyama
遺伝子検出用試薬及びその応用(リボレギュレーターを用いた遺伝子診断法)
基因检测试剂及其应用（利用核糖调节剂的基因诊断方法）
DOI： --
发表时间： 2006
期刊：
影响因子： --
作者： []
通讯作者：
共 6 条
    生体反応をモニターする強力なツールとしての多重共鳴NMRの利用
    サイズ制御エンドサイトーシス:ドラッグデリバリーの新戦略をめざして
    • 批准号：
      17655078
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Exploratory Research
    • 资助金额：
      $2.11万
    • 财政年份：
      2005
    • 负责人：
      青山 安宏
    • 依托单位：
      Kyoto University
    水が駆動する極性相互作用:グリコクラスターの"溶媒和"効果
    • 批准号：
      16041222
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $7.1万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      青山 安宏
    • 依托单位：
      Kyoto University
    人工“グリコウイルス"ベクターの開発と遺伝子治療への応用
    • 批准号：
      16023230
    • 项目类别：
      Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
    • 资助金额：
      $3.26万
    • 财政年份：
      2004
    • 负责人：
      青山 安宏
    • 依托单位：
      Kyoto University
    海外基金